云南美登木悬浮培养细胞的化学成分

利用组织培养方法以云南美登木(Maytenus hookeri Lose.)未木质化的茎和嫩叶为材料诱导出愈伤组织,经过继代培养建立了悬浮细胞培养系.培养物的乙酸乙酯提取物显示抗橙色青霉(Penicillium avellaneum UC-4376)生长的生物活性.对培养物进行化学成分研究,分离鉴定了9个化合物:2,3-diacetoxyl maytenusone (1)、角鲨烯 (squalene,2)、β-谷甾醇 (β-sitosterol,3)、2′,3′,4′-triacetylsitoindoside Ⅰ (4)、salaspermic acid (5)、美登酮酸 (maytenonic acid,6)、2α-羟基美登酮酸(2α-hydroxy-maytenonic acid,7)、6,11,12-trihydroxy-8,11,13-abietrien-7-one (8)和11,12-dihydroxy-8,11,13-abietrien-7-one (9),其中化合物1为新化合物.通过2D NMR对化合物5-7的NMR数据进行了全指定,并修正了化合物5和6的部分碳谱数据指定.     

印度獐牙菜挥发油化学成分的研究

研究了印度獐牙菜(Swertia chitayita Buch-Ham．)挥发油的化学成分。采用水蒸气蒸馏法提取、毛细管气相色谱-质谱联用技术对印度獐牙菜挥发性化学成分进行了分离,经计算机质谱谱库检索对分离的化合物进行鉴定,并用已知烃类进行标定,共确定了其中63种化合物,所鉴定出的化合物含量占全挥发油的81．36％;用峰面积归一化法测定了各化学成分的相对含量。研究结果表明,印度獐牙菜的主要化学成分为：十六烷酸乙酯(19．54％)、4-(苯甲基)哌啶(11．72％)、油酸乙酯(7．82％)、丁基化羟基甲苯(6．70％)、亚油酸乙酯(5．80％)、丁二酸二乙酯(3．21％)、3a,6a-二氢-2(3H,4H)环戊二烯并[b]呋喃酮(2．13％)等。     

阳桃的组织培养与植株再生

1植物名称阳桃(Averrhoa carambola),别名杨桃、五敛子、三廉子. 2材料类别无菌胚乳. 3培养条件诱导愈伤组织培养基:(1)MS 2,4-D 2.0 mg·L-1(单位下同) 6-BA 0.2;(2)MS 2,4-D 3.0 6-BA 0.1.诱导分化培养基:(3)MS ZT 3.0 NAA 0.2:(4)MS ZT 1.0 NAA 0.2:(5)MS ZT 5.0 NAA 0.2.生根培养基:(6)1/2 MS IBA 0.2 IAA 0.1.     

中国苹果属植物染色体观察

本文采用去壁低渗法,对原产我国的22种37个类型的苹果属植物的染色体数目进行 了观察,发现它们有2n＝34、51、68三种类型,多倍体种占41％,其中以三倍体种类居多,沧江海棠、西蜀海棠、尖嘴林檎、昭觉红花的染色体数以及花红中的四倍体类型均为首次报道。     

红斑丹毒丝菌免疫原性蛋白的鉴定及其编码基因的克隆和测序北大核心CSCD

【目的】为深入研究红斑丹毒丝菌的免疫保护性抗原及其致病机制,采用免疫蛋白组学技术鉴定红斑丹毒丝菌的免疫原性蛋白。【方法】通过SDS-PAGE电泳分离红斑丹毒丝菌C43065株的NaOH提取抗原,用兔抗NaOH提取抗原抗血清经Western blot检测免疫原性蛋白,通过MALDI-TOF质谱技术鉴定蛋白种类,并对部分免疫原性蛋白的编码基因进行克隆和测序。【结果】通过MALDI-TOF质谱技术从C43065株NaOH提取抗原中鉴定出9个免疫原性蛋白,分别为Spa A、伴侣蛋白GroEL、烯醇化酶、ATP结合盒转运蛋白、丙酮酸脱氢酶复合物E1、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、果糖二磷酸醛缩酶、50S核糖体蛋白L1、30S核糖体蛋白S4。其中烯醇化酶、ATP结合盒转运蛋白、甘油醛-3-磷酸脱氢酶和果糖二磷酸醛缩酶已被证实与链球菌、牙龈卟啉单胞菌、脑膜炎奈瑟菌和结核分枝杆菌的致病性相关。C43065株伴侣蛋白GroEL、烯醇化酶、ATP结合盒转运蛋白、丙酮酸脱氢酶复合物E1、甘油醛-3-磷酸脱氢酶和果糖二磷酸醛缩酶编码基因大小分别为1614、1296、1260、1005和867 bp,与已公布的红斑丹毒丝菌Fujisawa株相应基因的相似度高达98%。【结论】本文所鉴定的9个免疫原性蛋白,为进一步开展红斑丹毒丝菌保护性抗原及其致病机制研究奠定基础。     

茶树染色体高分辨G带带型研究

本文应用胰酶法在茶树的晚前期、前中期和早中期的每一染色体的全长上诱导出了清晰而丰富的G带带纹。染色体带纹的数目随染色体的浓缩程度而变化,同源染色体带纹的大小、分布及着色的深浅基本相似。作者认为植物G带的诱导与染色体处理技术及染色体所处的分裂时期密切相关。当胰酶处理超过了G带诱导的临界限度时,常可观察到染色体的大螺旋结构。本文讨论了在染色体前处理中a-溴萘的选用和甲醇-冰醋酸(3:1)的固定时间对G带诱导的影响以及G带的形成与染色体大螺旋结构之间的关系。     

竹节参水煎液对AD大鼠海马神经元尼氏体的影响

探讨竹节参对AD大鼠的作用及海马神经元尼氏体的影响。60只SPF级SD雄性大鼠,随机分为6组,假手术组海马注射生理盐水,其余均注射Aβ_(1-42)以复制AD模型。假手术组及模型组予以生理盐水灌胃,西药组予脑复康悬浮液灌胃,竹节参高、中、低剂量组分别予相应浓度竹节参水煎液灌胃,持续4 w。灌胃结束后,采用Morris水迷宫进行定位航行实验和空间探索实验。取大鼠海马切片,尼氏染色法观察海马神经元尼氏体。定位航行试验中,各组逃避潜伏期均呈逐日下降趋势,但模型组下降趋势最缓,尤其明显缓于假手术组,而西药组和竹节参高、中、低剂量组下降趋势均快于模型组。空间探索试验中,模型组第一次穿越平台的时间明显长于假手术组(p0.001),各治疗组明显短于模型组,且竹节参高剂量组短于西药组;穿越平台的次数,模型组明显少于假手术组(p0.001),各治疗组明显多于模型组,且竹节参高剂量组多于西药组。尼氏染色法观察到模型组大鼠海马神经元的尼氏体明显少于假手术组(p0.001),各治疗组明显多于模型组,且竹节参高剂量组要优于西药组。竹节参能改善海马神经元形态和数量,从而提高AD模型大鼠的学习记忆能力。     

海南岛蚯蚓物种组成及其系统发育分析

海南岛独特的地理位置和复杂的古地理事件使其成为我国生物多样性的热点地区。已有的海南岛蚯蚓资料显示, 该岛的蚯蚓区系十分特殊, 且与大陆地区蚯蚓存在扩散与迁移。然而, 当海南岛与周围大陆断开形成独立岛屿后, 海南岛蚯蚓如何为适应海南岛的环境而逐渐形成现在岛内的分布与区系, 仍然是一个值得研究和探讨的问题。因此, 本研究在海南岛全面调查和采集蚯蚓标本, 整理海南岛地区的蚯蚓物种组成及其地理分布特征, 并联合5个线粒体基因COⅠ、COⅡ、ND1、12S rRNA和16S rRNA构建海南岛蚯蚓的分子系统发育树, 推测其分化时间和祖先分布区域, 探讨海南岛蚯蚓在岛内的分化与扩散过程。研究结果表明: (1)海南岛共有蚯蚓6科9属122种, 巨蚓科蚯蚓为优势科, 且全部为环毛类蚯蚓, 其中103种为海南岛特有种。蚯蚓物种数沿海拔呈先增加后减少的趋势, 在800‒1,000 m最大; (2)海南岛环毛类蚯蚓不同水平的遗传距离与我国巨蚓科蚯蚓的遗传距离区间基本一致。物种水平上, 美丽远盲蚓(Amynthas scitulus*)与纬向远盲蚓(A. zonarius)的基因遗传距离最小。在亚种水平, 保宁腔蚓指名亚种(Metaphire magna magna)和保宁腔蚓小型亚种(M. magna minuscula)的遗传距离均接近整体的物种水平。在种群水平, 等毛远盲蚓(A. homosetus)不同种群间遗传距离均接近整体的亚种水平; (3)海南岛环毛类蚯蚓可划分为7个类群, 其祖先于68.26 Ma开始分化, 可能起源于吊罗山。在新生代, 7个类群均得到较大发展。通过对海南岛蚯蚓组成及系统发育的梳理, 不仅为我国蚯蚓物种多样性研究提供基础资料, 也为岛屿蚯蚓物种系统发育关系分析提供科学参考。     

药用级微生物谷氨酰胺转胺酶的纯化工艺研究

为了提高谷氨酰胺转胺酶的纯度和扩展在医药领域的应用,探索了一种适合工业化生产的、安全高效的微生物谷氨酰胺转胺酶纯化方法。轮枝链霉菌发酵后,经离心10 000 r/min 4℃除去菌体,调节发酵液电导率至4.1mS/cm和pH6.0后,以直线流速60cm/h通过SP Sepharose FF阳离子交换层析柱对目的蛋白高 选择性和高载量地捕获,再通过phenyl sepharose 6 FF（high sub）疏水层析柱进行精细纯化。纯化后经SDS-PAGE鉴定纯度达到95%以上,HPLC分析纯度> 99%。鲎试剂测定内毒素含量为0.013EU/ml,达到中国药典中血制品要求的低于0.15EU/ml标准。