miRNA-145通过下调ROCK1的表达抑制人牙周膜成纤维细胞的迁移

目的:研究微小核糖核酸-145(microRNA-145,miRNA-145)对人牙周膜成纤维细胞迁移的影响及其作用机制。方法:体外采用酶消化法培养人牙周膜成纤维细胞并传代,将其分为对照组和转染miRNA-145组,按50 ng/mL的miRNA-145浓度转染人牙周膜成纤维细胞,转染72 h后提取各组蛋白,用Western blot检测miRNA-145的靶蛋白ROCK1的表达水平的相关变化;采用划痕试验检测各组划痕细胞间距离的相关变化,选取划痕后的0 h、24 h、48 h、72 h时间点,测量各时间点划痕细胞间的距离并计算平均值。结果:与对照组相比,转染miRNA-145后,miRNA-145靶蛋白ROCK1的表达量显著降低(p0.05);转染24 h、48 h后细胞间距离的均值大于对照组(p0.05)。结论:miRNA-145可能通过下调ROCK1的表达抑制人牙周膜成纤维细胞的迁移。     

利用DNA Shuffling技术构建重组PRRSV ORF5基因

通过DNA shuffling技术对PRRSV ORF5基因进行改组,研究其对异源毒株交叉中和能力。将获得的嵌合基因△2ORF5与载体pET-32a连接,转化到大肠杆菌Escherichia coli BL21中,经诱导表达获得约42 kDa重组蛋白。将纯化的重组△2ORF5蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,Western blotting试验表明其与4株亲本毒株重组ORF5蛋白具有良好的反应性。病毒感染抑制试验结果表明,多克隆抗体对4株亲本毒株具有较高的抑制率(53%)。研究结果为研制新型PRRSV疫苗奠定了基础。     

小陇山国家级自然保护区华山松种群更新动态分析

以种群生命表及生存分析理论为基础,将林木依胸径大小分级,以林木径级结构代替年龄结构,采用分段匀滑技术编制小陇山国家级自然保护区华山松种群静态生命表,对其种群年龄结构、死亡率曲线、损失度曲线、存活曲线、生存函数曲线及其幼苗的更新动态、死亡率和原因进行分析。结果表明:该种群属于增长型,表现出前期增长,中期稳定,后期衰退的特点;该种群的整个生命过程,显示了三次死亡高峰,其中幼苗死亡率较高,以后的死亡率低而平缓,符合种群的自然动态规律,也指出"天保工程"实施的意义和效果;该研究指示了华山松的动态以及种群的变化趋势,对保护区已经实施的生态监测和森林保护有着十分重要的意义。     

激光辐照对铁棍山药块茎贮藏保鲜的生理效应初探

用25mW红外线激光辐照铁棍山药芦头10、15和30min后,其芦头芽萌发受抑,块茎含水量、可溶性总糖和可溶性蛋白含量下降幅度均变小,丙二醛(MDA)和O_(2·)~-含量上升幅度也变小,贮藏前期的超氧化物歧化酶(SOD)活性升高幅度增大,贮藏后期的SOD活性下降幅度变小,以辐照30min的效果为最佳。     

信息物质的化学分析技术

化学生态学研究中最常应用的化学分析技术是气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)和高压液相色谱技术(HPLC)。本文根据实践经验和体会,重点介绍样品制备要点、GC-MS和HPLC的基本原理、如何选择化学分析技术、信息化学物质定性和定量分析的要点以及示例等。     

白木香 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶 A 合酶(AsHMGS)基因的克隆与表达分析简

以白木香（Aquilaria sinensis(Lour.) Gilg）茎cDNA为模板,采用反转录PCR及RACE技术分离得到HMGS基因cDNA全长。序列分析表明该基因序列全长1 831 bp,共编码465个氨基酸,推导的蛋白质分子量为51.4 kD,理论等电点6.25,命名为AsHMGS。推导的AsHMGS蛋白质序列具有植物HMGS酶的典型结构,并预测出HMGS酶的活性中心。系统进化树分析表明,AsHMGS蛋白与拟南芥、琴叶拟南芥、芥菜的相应蛋白相似度最高,其次为人参、喜树和野茶树。荧光定量PCR结果显示,茉莉酸甲酯能诱导白木香AsHMGS的表达。     

我国家庭过期药品回收的滞后性分析与对策探讨

药品作为一种特殊的商品,关乎民生,紧系健康。近年,有关家庭过期药品回收的问题受到社会广泛关注。虽然制药企业和国家等相继出台了有力措施,但总体而言,我国家庭过期药品仍然处于滞后阶段。家庭过期药品如若处理不当,可能引发用药安全,环境污染,非法倒卖等严重社会问题。本文通过分析我国家庭过期药品回收工作的进展情况以及发展障碍,并针对其滞后性提出相应的对策。     

Proteus sp.脂肪酶基因在大肠杆菌中表达及性质研究

目的:筛选获得高活力的微生物脂肪酶,实现其异源高效表达。方法:通过富集培养、平板筛选、单菌落发酵验证以获得产脂肪酶菌株,克隆脂肪酶基因,构建重组质粒在大肠杆菌中表达,纯化后进行酶学性质研究。结果:获得一株高产脂肪酶的菌株,经16S rDNA鉴定属于Proteus sp。根据已报道的来源于Proteus vulgaris的脂肪酶基因设计引物,克隆其全长基因,大小为864 bp,编码287个氨基酸。构建重组表达质粒pET32a-lipK19,在大肠杆菌中表达酶活达1 500 U/mL。该脂肪酶的最适温度为40℃,最适pH为9,在pH 8~10之间稳定性较好,Ca2+对酶有激活作用,表面活性剂等对酶抑制作用明显,对有机溶剂有一定的耐受性。结论:克隆表达了一Proteus sp脂肪酶,并对其性质进行了研究,为其应用奠定基础。     

植物叶片形成露水的室内模拟

叶片在空气中形成露水是干旱、半干旱地区植物水分来源之一,具有重要的生态意义.本文借助人工智能气候室和叶片温度自控系统,对影响露水形成的环境温湿度、叶片温度和叶片倾角进行调节,研究了叶倾角、环境温湿度、露点-叶温差对叶片露水累积速率和叶片露水量的影响.结果表明: 叶片露水累积速率和叶片最大露水量均随叶倾角的增加而减小,但随着环境温度、湿度和露点-叶温差的增加而增大.叶片处于水平状态时,叶片露水在达到最大露水量前呈线性快速递增,露水达到最大露水量(0.80 mm)后处于稳定值;当叶片有倾角时,叶片露水达到一定值就会发生叶片露水滑落现象,使得叶片露水量呈现锯齿形变化,且露水累积速率明显变慢.     

接种变栖克雷伯氏菌DX120E对不同甘蔗品种的促生效应

为探究具有高固氮酶活性的变栖克雷伯氏菌DX120E回接甘蔗后的固氮能力和促生效应,以甘蔗品种B8和GT21的无菌组培苗为材料,采用根部接种的方法,研究固氮菌DX120E在甘蔗体内的定殖数量及其对甘蔗组培苗植株生长、氮代谢关键酶活性和硝态氮含量及矿质元素吸收的影响.结果表明： 固氮菌DX120E能在甘蔗根和地上部分组织内生存和定殖;接种固氮菌DX120E可以有效促进甘蔗植株生长和对矿质营养的吸收;显著提高甘蔗植株体内的硝酸还原酶(NR)活性,同时也能在一定程度上提高植株体内谷氨酰胺合成酶(GS)活性,增加硝态氮含量.表明变栖克雷伯氏菌DX120E对甘蔗具有明显的促生效应,在生物固氮肥开发方面具有较大的应用前景.