丙型肝炎病毒北京株NS3基因的克隆及测序

用ＲＴ－ＰＣＲ方法从北京株丙型肝炎病毒中扩增出ＮＳ３区基因片段,该片段经ｐＧＥＸ－Ｔ载体克隆到大肠杆菌ＤＨ５α菌株中．经自动序列分析仪测出ＮＳ３基因的７２８ｂｐ长的核酸序列．发现在该片段中第３１位核苷酸发生Ａ→Ｔ突变,产生一个终止突变．这表明,丙型肝炎病毒北京株存在一定的变异,产生缺陷型病毒,这类缺陷型病毒的出现可能是丙型肝炎病毒持续性感染的原因之一．     

杜仲次生木质部分化过程中的细胞编程死亡

通过电子显微镜观察、DNA断裂检测及类似半胱氨酸蛋白酶(caspase-like proteases,CLPs)降解检测等技术,对杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)次生木质部分化过程的细胞编程死亡进行了研究.分化中的次生木质部细胞总DNA凝胶电泳检测到DNA ladder,并通过TUNEL检测进一步确定了DNA被降解.Western blot结果表明;caspase-8和caspase-3状蛋白酶(caspase-8-和caspase-3-like proteases,CLPs)及多聚ADP-核糖聚合酶(poly(ADP-ribose)polymerase,PARP)在次生木质部分化过程中被降解.这些研究结果表明,杜仲次生木质部的细胞分化是一个典型的编程性死亡(Programmed cell death,PCD)过程,CLPs可能参与了此过程.     

番茄叶绿体DNA的分离纯化及某些性质的研究

分离纯化了番茄的叶绿体DNA(ct DNA)。热变性分析测得Tm=82.1℃,由此计算得(G+C)％=31.2％。热变性微分曲线表明,在番茄ct NDA分子上存在着碱基组成比例分布上的异质性。分析超离心测得沉降系数S_(20w)=62.4。据此计算出分子量为80×10~6d。用电子显微镜观索了制备的ctDNA.     

贺兰山划蝽科中国新纪录种记述

贺兰山划蝽科中国新纪录种记述ＮＥＷＲＥＣＯＲＤＥＤＳＰＥＣＩＥＳＯＦＣＯＲＩＸＩＤＡＥ（ＨＥＭＩＰＴＥＲＡ：ＣＯＲＩＸＩＤＡＥ）ＦＲＯＭＨＥＬＡＮＭＯＵＮＴＡＩＮ,ＣＨＩＮＡ￥Ｊｏｒｉｇｔｏｏ;Ｎｏｎｎａｉｚａｂ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇ...     

X,Y精子分离技术的进展

自本世纪伊始,就有许多有关分离X精子(具有X染色体的精子)和Y精子(具有Y染色体的精子)的研究报告.近年来,美国、日本等国相继报道分离人和牛的X、Y精子获得成功,然而其实验效果的重复性极低.本文仅就最近有关X、Y精子的分离研究进展情况作以扼要的介绍.     

绿豆Ty1／Copia类反转录转座子逆转录酶序列的克隆和分析

利用Ty1/copia类反转录转座子的保守位点设计简并引物,从绿豆(Vignaradiata(L.)Wilczek)基因组中扩增得到了反转录转座子的逆转录酶序列。对扩增得到的约270bp的片段进行分离和克隆,并随机挑选了40个克隆进行测序,结果得到了36个单独的核酸序列,其中18个含有移码突变或终止子。根据序列比对,这些克隆可分为9组以及单个的9种。这40个克隆中,核酸序列相似性从8%到100%,显示出其核酸序列的高度异质性。将这些克隆的核酸序列与来自其他种植物的相应序列进行谱系分析,发现有些克隆与来自其他种植物的相应序列的亲缘关系比这些克隆之间更为接近。斑点杂交显示Ty1/copia反转录转座子约占绿豆基因组的9.3%。     

未培养微生物的研究与微生物分子生态学的发展*

近年来现代分子技术和基因组学逐渐渗透到有关生命科学的整个领域,也为微生物生态学提供了新的研究方法和机遇。16S rRNA基因序列分析、DNA-DNA杂交、核酸指纹图谱以及宏基因组学等分子技术检查自然环境中的微生物,可以克服传统纯培养技术的不足,是一条探知未培养微生物、寻找新基因及其产物的新途径,开启了我们认识微生物多样性和获得新资源的大门。     

微生物可培养性低的生态学释因与对策

纯培养技术一直是微生物学研究的基石,但其单一的营养结构和生境与自然环境中微生物多样性、协同代谢等明显矛盾,从而成为部分微生物难以复苏的主要障碍。细菌共同协作的自然生存方式的崩溃、生境的极度营养变化和生态位巨变等是微生物可培养性低的主要生态学原因。非培养技术、加富培养、混合培养、稀释培养、模拟自然培养和综合方法等是主要的研究手段和策略,可在不同程度上解决微生物可培养性低的缺陷和问题。     

杜仲次生木质部分化过程中的细胞编程死亡

通过电子显微镜观察、DNA断裂检测及类似半胱氨酸蛋白酶（caspase-like proteases,CLPs)降解检测等技术,对杜仲（Eucommia ulmoides Oliv.）次生木质部分化过程的细胞编程死亡进行了研究。分化中的次生木质部细胞总DNA凝胶电泳检测到DNA ladder,并通过TUNEL检测进一步确定了DNA被降解。Western blot结果表明：caspase-8和caspase-3状蛋白酶（caspase-8-和caspase-3-like proteases,CLPs)及多聚ADP-核糖聚合酶（poly(ADP-ribose) polymerase,PARP)在次生木质部分化过程中被降解。这些研究结果表明,杜仲次生木质部的细胞分化是一个典型的编程性死亡（Programmed cell death,PCD)过程,CLPs可能参与了此过程。     

嫁接导致的绿豆可遗传性变异及其在绿豆育种中的应用

植物嫁接可以导致接穗的后代中有可遗传性变异的发生.我们将绿豆(Vigna radiata (L.) Wilczek)的幼苗嫁接在红薯(Ipomoea batatas (L.) Lam.)的茎上, 维护其生长至结实.将收获的绿豆种子连续几代播种于普通环境时, 其后代中出现了明显的遗传变异.这些变异在未经嫁接的绿豆接穗品系中并不出现.为了研究这种嫁接诱导变异现象可能的机理, 我们对变异品系的细胞质和细胞核DNA进行了分析.结果显示,在原绿豆和变异品系之间未发现细胞质DNA的RFLP(限制性酶切片段多态性)差异.而细胞核DNA却发生了高频率的序列重组.同时,本研究没有发现砧木与接穗间基因转移的迹象.根据以上事实,我们推测远缘嫁接变异很有可能是嫁接生长逆境诱导的抗逆变异.