农杆菌转化的小冠花发状根的诱导及其植株再生

利用野生型发根农杆菌15834菌株感染小冠花15日龄无菌苗子叶和下胚轴切段,建立了高效的发状根培养及其体细胞胚胎发生再生体系。发状根可直接从受伤的外植体表面产生,也能在外植体诱导的愈伤组织上发生,在无外源激素的MS固体和液体培养基上,转化根能自主生长,表现出典型的发根特征。用适宜浓度的乙酰丁香酮处理对数生长期的农杆菌菌液2h,感染预培养2d的子叶获得了最高的转化频率(87.4%)。在附加0.2mgL2,4_D,0.5mgLNAA和0.5mgLKT的MS培养基上,发状根能100%形成胚性愈伤组织,并于含0.5mgLKT,0.2mgLIBA和300mgL脯氨酸的MS培养基上顺序经过体细胞胚胎发育的各个典型时期,转换成完整植株。再生植株除具有发达的侧根外,其它形态特征与未转化植株未见明显的差异,但在获得的5个转化克隆中,其中1个的发状根及其再生植株叶片中有毒物质3_硝基丙酸的含量显著下降,分别为未转化对照的57.68%和58.17%。冠瘿碱纸电泳检测和rolB基因PCR扩增检测均证明农杆菌Ri质粒上的T_DNA已经整合到小冠花转化细胞的基因组中。     

高效液相色谱检测聚乙二醇化天花粉蛋白方法比较

目的：建立聚乙二醇化天花粉蛋白纯度的检测方法。方法：使用分子筛色谱法和反相高效液相色谱法测定了聚乙二醇天花粉蛋白。结果：聚乙二醇天花粉蛋白纯度分别为100％和98．14％。结论：高效液相色谱法简单易行、准确、灵敏度高,适用于聚乙二醇化天花粉蛋白纯度检测。     

细胞因子和视黄酸调节肺癌细胞补体的生物合成

目的探讨近年用来治疗恶性肿瘤的视黄酸与细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6、IFN-γ)对人肺癌细胞株A549分泌C3及Β因子的影响。方法分别用ELISA、Western blot和RT-PCR检测培养上清中C3及B因子的水平及细胞C3及B因子mRNA表达。结果TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6和IFN-γ诱导A549细胞分泌C3及B因子是未处理组的6.84、11.0,7.27、8.04,6.16、1.08,4.75、1.43和2.10、1.59倍。视黄酸对Α549细胞分泌C3及B因子没有影响,但它能增强TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6和IFN-γ诱导的A549分泌C3及B因子分别是TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6和IFN-γ组的1.46、1.90,1.44、1.90,1.18、1.69,0.94、2.52,和1.09、2.39倍。RT-PCR半定量分析C3及B因子mRNA的结果与蛋白水平相似。结论视黄酸能调节诸细胞因子增强诱导人肺癌细胞株A549细胞分泌C3及B因子,这可提高细胞因子对肿瘤细胞的杀伤作用。     

EMT标志分子Vimentin在胃癌中的表达和临床意义

目的:探讨EMT标志分子Vimentin在胃癌中的表达和临床意义。方法:利用免疫组化染色的方法检测Vimentin在120例胃癌及其相应癌旁组织中的表达,统计分析Vimentin的表达水平与年龄、性别、组织学类型、TNM分期、淋巴结转移等临床病理特征间的相关性。结果:Vimentin在胃癌中的表达阳性率为55.8%,远高于相应癌旁组织的22.5%(P0.01),进一步分析研究发现Vimentin的表达水平在Ⅲ和Ⅳ期的胃癌中(TNM分期)的表达明显高于Ⅰ和Ⅱ期的胃癌,差异具有统计学意义(P=0.009),在发生淋巴结转移胃癌中表达明显高于未发生淋巴结转移的胃癌,差异具有统计学意义(P0.000)。结论:Vimentin在胃癌中高表达,其表达水平与TNM分期、淋巴结转移密切相关,提示Vimentin在胃癌的转移过程中可能发挥重要作用。     

鸟市贸易威胁野生鸟类生存——以哈尔滨道外花鸟鱼市场为例

为探讨鸟市贸易对野生鸟类的威胁与影响,给当地野生动物保护部门实施监管提供科学依据,于2016年11月—2017年11月对黑龙江省哈尔滨市最大鸟市——道外花鸟鱼市场进行调查。结果发现:(1)共记录6目34科83属117种18 729只鸟类,其中野生鸟类5目32科77属108种11 662只。有出售国家保护鸟种黄胸鹀 Emberiza aureola、猛禽及非法捕猎工具的现象。(2)所有被贩卖的野生鸟类中,在黑龙江省有分布的共69种,数量达9 707只。相关分析结果表明,黑龙江省有分布的野生鸟类是鸟市非法捕捉及贩卖的主要对象。(3)贩卖量为春、秋季多,夏、冬季少,7—10月鸟类迁徙季节时最多,占总贩卖量的45.2%,说明鸟类秋季迁徙是非法猎捕的高峰期。(4)调查中发现较多的南方鸟种(32.4%)也一定程度上说明野生鸟类非法运输的严重性。建议当地林业和草原局及时加强对道外花鸟鱼市场的监管,在鸟类迁徙季节从非法捕捉和运输环节实施严厉打击。     

土壤铅胁迫对地被竹出笋成竹的影响研究

以6种地被竹(菲黄竹、菲白竹、铺地竹、美丽箬竹、白纹椎谷笹和狭叶倭竹)为材料,设计3个土壤铅浓度处理(0、300、1500mg·kg^-1),研究土壤铅胁迫对地被竹出笋成竹数量和新竹抗逆生理特性的影响,并采用隶属函数法对地被竹出笋成竹期的土壤铅耐受性进行综合评价。结果表明:(1)土壤铅胁迫对地被竹笋期节律的影响主要出现在出笋盛期(4~5月),发笋数的降低会导致多数竹种退笋率下降,以稳定新竹数量,只有菲白竹、白纹椎谷笹、狭叶倭竹的新竹数在高浓度土壤铅胁迫下显著低于CK,降幅分别为15.87%、23.64%和31.25%。(2)土壤铅胁迫会普遍引起地被竹新竹超氧阴离子和丙二醛含量的增加,在高浓度铅胁迫下铺地竹中二者含量最低(9.96μg·g^-1、0.016μmol·g^-1),狭叶倭竹的超氧阴离子含量最高(15.99μg·g^-1),菲黄竹的丙二醛含量最高(0.021μmol·g^-1)。(3)与其余4个竹种不同,在土壤铅胁迫下白纹椎谷笹和狭叶倭竹不能显著积累游离脯氨酸,细胞渗透调节作用弱。(4)6种地被竹在出笋成竹期对高浓度土壤铅的耐受性排序为:美丽箬竹(0.79)>铺地竹(0.75)>菲白竹(0.70)>狭叶倭竹(0.49)>白纹椎谷笹(0.39)>菲黄竹(0.38),其中美丽箬竹、铺地竹和菲白竹出笋成竹数量正常,且具有较强的抗逆生理特性,具有在高浓度土壤铅污染地区应用的潜力。     

红背桂花化学成分研究

为了对红背桂花(Excoecaria cochinchinensis Lour.)的化学成分进行研究,采用了硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、反相ODS柱色谱等色谱方法,对红背桂花的80%乙醇提取物进行系统的分离,得到了10个单体化合物,通过理化性质与波谱数据分析,分别鉴定为:齐墩果酸(oleanolic acid,1)、2α,3β,23-三羟基齐墩果-12-烯-28-酸(arjunolic acid,2)、山奈酚(kaempferol,3)、槲皮素(quercetin,4)、高山黄芩(isoscutellarein,5)、6-甲氧基-7-羟基香豆素(scopoletin,6)、3,4,5-三羟基苯甲酸(3,4,5-trihydroxybenzoic acid,7)、间苯三酚(phloroglucinol,8)、β-谷甾醇(β-sitosterol,9)和胡萝卜苷(daucosterol,10)。化合物2,5和8为首次从海漆属植物中分离得到,化合物1,4和6为首次从红背桂花植物中分离得到。     

脂氧素A4对瘢痕成纤维细胞生物学活性的影响及机制研究

最新文献表明,脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)对组织纤维化及相关疾病有防治作用。为了观察脂氧素A4对瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡和胶原合成的影响并探讨其抗瘢痕形成的机理,该文首先通过RT-PCR和Western blot法检测瘢痕成纤维细胞是否表达脂氧素受体ALX;然后将不同浓度脂氧素A4加入瘢痕成纤维细胞培养液中分别作用相应时间后,MTT法检测细胞的增殖程度,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,羟脯氨酸测试盒检测细胞培养液中羟脯氨酸含量,ELISA法检测细胞培养上清中TGF-β水平。结果发现,瘢痕成纤维细胞表达ALX,脂氧素A4抑制瘢痕成纤维细胞增殖、羟脯氨酸释放及TGF-β分泌,同时还诱导细胞凋亡。综上所述,脂氧素A4抑制瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成并诱导其凋亡,可能是防治瘢痕形成的重要潜在药物。