基于网络药理学和实验研究Jolkinolide B治疗结肠肿瘤的作用机制

通过网络药理学方法及生物学实验研究Jolkinolide B治疗结肠肿瘤的作用机制。通过TCMSP等数据库预测Jolkinolide B作用靶点，并通过靶点富集分析及分子对接预测其防治结肠肿瘤的作用机制，基于预测结果，体内生物学实验初步验证Jolkinolide B对移植瘤小鼠肿瘤的抑制作用，MTT法检测不同浓度的Jolkinolide B对HCT116细胞的增殖抑制活性，流式细胞术检测细胞凋亡情况，细胞划痕实验观察其对HCT116细胞迁移能力的影响。Western blot检测相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2、金属基质蛋白酶MMP3和MMP12的表达。网络靶点分析结果显示Jolkinolide B与结肠癌(CRC)匹配后得到78个靶点，富集信号通路主要有IL-17信号通路、PD-1/PD-L1信号通路等。分子对接结果显示Jolkinolide B以氢键与STAT3、MAPK8、JUN核心蛋白结合，结合构象较稳定。体内实验结果表明，Jolkinolide B能有效抑制移植瘤小鼠肿瘤体积；细胞水平验证实验结果表明，Jolkinolide B能够有效地抑制结肠肿瘤细胞HCT116的增殖，促进...     

双盲交叉筛选分泌抗直肠腺癌神经节苷脂单克隆抗体杂交瘤细胞株PG 10

采用改良脾内免疫的方法,比较分析了甲、乙两组,经不同方法处理的直肠腺癌细胞株HR-8348的免疫效果(甲组未经酶处理;乙组用0.25％胰蛋白酶,37℃孵育20分钟)。实验结果表明:乙组对正常直肠和直肠腺癌神经节苷脂的阳性杂交瘤细胞集落数远远高于甲组。用分别分离、纯化自同一个体的正常直肠和直肠腺癌的神经节苷脂作检测抗原,交叉筛选出分泌抗直肠腺癌特异神经节苷脂单克隆抗体的PG10杂交瘤细胞株,经三次克隆,二次达百分之百阳性,培液中抗体的最高O.D.值(490nm)为1.85。描述了用双盲交叉法筛选抗直肠腺癌特异的神经节苷脂单克隆抗体的新方法。