利用大肠杆菌表达系统制备抗VEGF螺旋-环-螺旋多肽及其纯化的研究

VEGF(血管内皮生长因子)是一种诱导肿瘤血管形成的作用最强、特异性最高的血管生长因子.本实验利用抗VVEGF螺旋-环-螺旋多肽的基因M49,通过PCR技术扩增获得目的基因,构建原核表达pET-32a(+),转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21进行表达,并对目的蛋白进行诱导表达及纯化.结果表明PCR...     

去包埋剂制片术揭示小麦珠被组织中微丝的跨胞分布

以DGD(diethylene glycol distearate)包埋、去包埋剂制片法,结合常规电镜制备术,观察研究了小麦珠被组织中胞间连丝的结构与分布特征及其与微丝的关系。试验结果表明,同层珠被细胞间壁上胞间连丝的分布密度比上下层珠被间的要显著地高得多;珠被中胞间连丝保持固有的正常结构,孔径30—40 nm,变动幅度不大,观察不到如作者以前在小麦珠心和胚乳中所见的那种胞间连丝经结构修饰而扩大、转变为开放态的景象。对去包埋剂制片的观察进一步揭示,从胞质骨架网络表层有纤细微丝以分散状向外伸展突入分界壁,时而可见各个微丝横贯分界壁而连接相邻骨架网络的图象。联系珠被中正常胞间连丝结构的稳定性与各个微丝以分散状跨越分界壁,讨论了微丝参与胞间连丝结构的可能性与可能模式。     

新疆北疆棉田立枯丝核菌菌丝融合群及其营养亲和群研究

从新疆北疆棉区采集了典型的棉花立枯病病苗及棉田土标样686份,按常规分离方法分离得到399个分离物,从中鉴定出272个纯化的立枯丝核菌(Rhizotonia solaniKühn)菌株,经玻片吉姆萨氏染剂(Gimsa′sstain)染色程序观察细胞核数目,全部测试菌株均属于多核。用标准菌株,通过载玻片菌丝融合实验测定,将纯化的272个菌株划归为3个菌丝融合群:AG-2、AG-4和AG-5,分别占总菌株的6.24%、84.2%和1.1%。另有23个菌株不与任何标准菌株融合,占8.46%,说明新疆北疆棉田立枯丝核菌的优势菌系是多核丝核菌的AG-4融合群。通过从10种不同配方的培养基中筛选的效果好的麦芽蛋白胨(MPDA)配方培养基(Ⅱ)进行对峙培养,以建立标准菌株,将纯化获得的272个丝核菌菌株,划分为6个不同的营养亲和群,研究说明新疆北疆地区棉田立枯丝核菌各菌丝融合群内确有不同程度的分化。     

光和暗条件培养的眼虫藻(Euglena gracilis)内RuBP羧化酶的免疫定位

应用免疫金标记技术证明,在眼虫藻和其它藻类中RuBP羧化酶主要分布在蛋白核部位,这与高等植物中RuBP羧化酶分布不同,在眼虫藻叶绿体间质中有少量RuBP羧化酶存在,这与高等植物中RuBP羧化酶的分布也有相似之处。 暗中培养的眼虫藻不能形成类囊体,无RuBP羧化酶,无光合能力,只能进行异养代谢。     

不同覆盖方式对黄土高原旱地土壤水分及糜子生长、光合特性和产量的影响

为探索黄土高原旱地覆盖栽培模式下糜子田土壤蓄水保墒和节水增产效果,于2011—2013年连续3个糜子生长季在陕西横山县小杂粮试验示范基地,研究了不同覆盖栽培方式对农田土壤水分、糜子生长发育、光合特性、产量及水分利用效率的影响.试验设置4种覆盖栽培处理,分别是“W”垄覆地膜+垄间覆秸秆(SG)、垄覆地膜+垄间覆秸秆(LM)、双垄面覆地膜+垄间覆秸秆(QM)、秸秆覆盖(JG)处理,以传统平作无覆盖(CK)为对照.结果表明：各覆盖处理均较CK显著提高了糜子各生育期0～100 cm土层土壤含水量,其中以SG处理蓄水保墒效果最好,其次依次为LM、QM和JG处理,且各覆盖处理间差异达到显著水平.在各覆盖处理中,SG处理对糜子生长发育和光合能力的影响最大,增产效果最显著,3年平均产量和水分利用效率分别较CK提高55.9％和64.9％,其中各覆盖处理之间差异达到显著水平.因此,“W”垄覆地膜垄间覆秸秆的二元沟垄集雨覆盖种植模式提高糜子产量和水分利用效率的效果最为明显,适宜在黄土高原旱地糜子生产中应用和推广.     

突变MARCH作用靶点在假病毒产率提升中的应用

抗病毒药物、中和抗体和预防性疫苗是应对新发、再发高致病性和高感染性病毒(如新冠病毒)最有效的策略。然而,涉及上述活病毒的实验操作必须在包含生物安全3级和4级设施的实验室中开展。为了便于评估上述抗病毒制品,研究者开发了基于人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)和水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus, VSV)骨架的假病毒包装系统。该系统同时包含靶标病毒的囊膜蛋白表达质粒,使包装好的假病毒具备与野生型病毒相似的受体吸附和膜融合功能。鉴于此,在特定的包装系统中,囊膜蛋白的包装过程对假病毒产率和感染性影响巨大。研究发现膜相关泛素连接酶家族蛋白(membrane-associated RING-CH,MARCH)能够降解病毒囊膜蛋白,下调假病毒产率和感染性。讨论了囊膜蛋白胞内域赖氨酸修饰对假病毒产率影响的研究进展,以期提高囊膜蛋白表达量和加工成熟效率,促进抗病毒药物研发、抗体筛选、疫苗创制和病毒受体鉴定。     

缺氧状态下绿豆(Phaseolus radiatus L.)根部细胞内高尔基体的形态变化(英文)

用铀—铅—铜浸染技术处理样品后,通过透射电子显微镜观察绿豆根部细胞内高尔基体。在缺氧3d,5d和5d后转入供氧条件3d后根部细胞的超微结构变化表明,缺氧3d高尔基体的内质网的液泡仍能生成分泌泡,这种分泌泡不能排出到细胞外,而滞留于细胞质中;缺氧5d的高尔基体则不能形成分泌泡,而分泌物积累于内质网的液泡,使内质网的液泡膨大。当缺氧条件解除3d后,高尔基体的形态和功能基本恢复到正常状态。Russell(1973)证明,培养液缺氧能阻碍植株根部生长。Mollenhauer和Morre(1980)观察到细胞壁和膜的增殖有赖于高尔基体形成的分泌泡。本试验表明:由于缺氧引起高尔基体分泌泡形成和转运受阻,看来可能是它阻碍植株根部生长的主要原因之一。     

家蚕丝心蛋白H链基因的荧光原位杂交(FISH)

蚕丝业在国民经济中占有极为重要的地位. 家蚕作为重要的模式生物和生物反应器, 历来为人们所关注. 有关蚕丝基因的结构、表达调控和分子进化都已有较详细的研究和报道, 但关于蚕丝结构基因的分子细胞遗传学基因定位的研究, 几乎尚无报道. 经用荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization, FISH)对家蚕丝心蛋白H链基因(Fib-H)的分子细胞遗传学定位研究结果, 初步将家蚕丝心蛋白H链基因定位在了分子细胞遗传学第25连锁群染色体的端部, 即25~0.0的位置, 从而解决了该基因迄今尚未定位的问题, 并证实了丝心蛋白H链基因在染色体位置上为单一座位.     

糖苷水解酶7家族蛋白在纤维素降解中作用的研究进展

糖苷水解酶7家族（glycoside hydrolase family, GH7）是一类来源于真菌的水解酶,作用于纤维素结晶区或不定形区的β-1,4 键,可用于高效降解纤维素转化为可发酵的糖。GH7的成员具有高度保守序列以及相似三维结构,其催化结构域是由多个loop区围绕反向平行的β 折叠形成的β 三明治结构。目前已有17个GH7成员的结晶结构得到解析,明确了酶的结构与催化功能之间的关联,对GH7的来源及分类、蛋白序列、结构特征与催化纤维素降解功能关系的研究进展进行阐述。