易发生聚集的重组HBcAg病毒样颗粒的纯化*

目的:探索针对易发生聚集的重组HBcAg病毒样颗粒(VLP)的有效纯化方案。方法:培养的大肠杆菌经IPTG诱导重组HBcAg蛋白的表达,菌体超声破碎后的离心沉淀用含有不同浓度尿素的PBS缓冲液重悬溶解,经密度梯度离心并结合电镜观察对VLPs行为进行分析鉴定。以Sepharose 4 FF凝胶过滤层析在选定的尿素条件下纯化沉淀溶解液,纯化获得的目的蛋白进一步在含30%山梨醇的PBS中脱盐去除尿素。整个过程以SDS-PAGE及电镜进行各步骤样品中目的蛋白的分析。结果:含有1mol/L尿素的PBS缓冲溶液重悬超声沉淀,可有效溶解聚集的VLPs,在蔗糖密度梯度离心中显示典型HBcAg VLPs的行为,且电镜观察颗粒形态结构完整。经1mol/L尿素下凝胶过滤,VLPs进一步获得纯化。在脱尿素过程中流动相采用含30%山梨醇的PBS,有效避免了VLPs在尿素去除后重新聚集。结论:尿素与山梨醇的联合应用,为具有聚集现象的VLPs纯化制备提供了一种有效解决方案。     

PEDF蛋白在子痫前期患者胎盘上的表达及意义

目的:研究子痫前期患者胎盘组织中色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)的表达,探讨PEDF在子痫前期发病中的作用。方法:选取2012年3月至2013年3月在我院产科住院剖宫产的20例子痫前期孕妇作为研究对象,另选取同期正常分娩的孕妇20例作为对照组。采用Western blot、免疫荧光组织化学方法检测子痫前期患者和正常对照组妇女胎盘组织中PEDF和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,并通过免疫荧光方法计数胎盘微血管密度(MVD)。结果:同正常对照组相比,子痫前期患者胎盘组织中PEDF表达升高,而VEGF表达则减少。PEDF与VEGF组织表达位置大致相同。子痫前期患者胎盘组织中PEDF表达与24h尿蛋白定量呈正相关,与VEGF表达及MVD计数呈负相关;VEGF表达与MVD计数呈正相关。结论:PEDF与子痫前期疾病发生发展及病情轻重程度有关;PEDF可能是通过影响胎盘血管的重铸,而参与子痫前期疾病的发生发展。     

双歧杆菌活菌制剂对慢性乙肝病人细胞免疫功能影响的观察

在应用双歧杆菌活菌制剂治疗慢乙肝期间,重点观察了Ｔ细胞亚群（ＣＤ３,ＣＤ４,ＣＤ８）、ＮＫ细胞（ＣＤ（１６））、白细胞介素Ⅱ（ＩＬ－２）分泌细胞、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）等细胞免疫指标治疗前后的动态变化,同时观察了病人血内毒素水平的动态变化和乙肝病毒标志物（ＨＢＶＭ）的改变。结果表明：（１）与对照组比较,双歧杆菌活菌制剂可使慢乙肝病人ＣＤ３＋,ＣＤ４＋数目明显增多,而对ＣＤ８＋细胞数目无明显影响;（２）双歧杆菌活菌制剂可使ＣＡＨ组的ＣＤ１６＋细胞显著增多（ｐ＜０．０５）;使ＣＡＨ组和ＣＰＨ组的ＩＬ－２分泌细胞均有非常显著和显著增加（分别ｐ＜０．０１和ｐ＜０．０５）;（３）ＣＡＨ组病人血中内毒素和ＴＮＦ水平在双歧杆菌活菌制剂治疗后,匀出现非常显著降低（ｐ＜０．０１）;ＣＰＨ组ＴＮＦ水平较对照组无显著变化,但内毒素水平较对照组显著降低（ｐ＜０．０５）;（４）满疗程后（６０天）ＣＡＨ组有６例,ＣＰＨ组有５例ＨＢｅＡｇ阴转（分别为２６．０６％和２５．０％）,而对照组仅２例阴转（１３．３３％）,两治疗组与对照组比较有显著性差异（ｐ＜０．０５）。     

雄激素对肺发育的影响

肺是呼吸系统的重要组成部分,由以气管为主的实质以及其周围的间质组成.研究表明,肺的成熟具有性别差异,通常男性胎儿的肺比女性胎儿更晚成熟,这主要与雄激素的调节有关.此外,临床数据表明,一些肺部相关疾病也受雄激素的重要影响.目前,雄激素对肺部发育的研究逐渐增多,本文主要综述了雄激素对气管、末端肺泡发育以及肺部免疫3个方面的...     

西藏墨脱地区一些植物的染色体报道

西藏东南部的墨脱地区处于雅鲁藏布江的腹地,其河谷区域的海拔在６００～２５００ｍ之间,属热带亚热带地区。１９９２年孙航等对这一地区的植物区系作了实地的调查研究,在大量标本的采集过程中,获得部分种的细胞学研究材料,随后我们对这些植物进行了染色体的观察研究...     

基于近低空遥感技术的国家公园功能分区边界识别: 以钱江源国家公园体制试点区为例

边界划分是国家公园保护与管理的重要手段, 通常以行政区和自然地理边界为参考, 借助人工干预的方法进行划分, 而较少考虑当地生态系统的完整性以及人为干扰因素, 造成边界划分不合理、不清晰。本研究以钱江源国家公园体制试点区中横岭角和古田山访客中心2处干扰较大的典型区为例, 用无人机近低空遥感技术结合实地植被调查, 评估现有功能分区。结果表明, 横岭角和古田山访客中心功能分区修正面积分别为53,550 m ²和19,667 m ², 分别占航拍研究区域面积的29.75%和16.39%。功能分区不合理划分的原因包括: (1)人为干扰较大的区域与自然地物较难分辨; (2)部分边界划分没有考虑生态系统的完整性, 将面积较小或完整性稍差的天然林划分为保护级别较低的区域。本研究采用航拍影像结合地面调查, 从保护当地生态系统完整性和减小人为干扰因素的角度出发, 为国家公园功能分区边界划分与细化提供一种合理可行的方法。     

端粒蛋白TRF1与肌动蛋白结合蛋白PFN2相互作用的鉴定

目的:鉴定端粒蛋白TRF1和肌动蛋白结合蛋白PFN2是否存在相互作用,并且两者的相互作用是否与端粒在细胞核周的锚定有关。方法:将TRF1构建到myc标签载体,PFN2构建到GST标签载体,采用GST-pull down技术,验证两者是否存在相互作用;同时将TRF1构建到EGFP标签的绿色荧光载体,PFN2构建到RED标签的红色荧光载体,两者共转入细胞,利用荧光显微镜观察两者在细胞中的共定位情况。结果:GST-pull down证明TRF1与PFN2存在直接相互作用,两者在细胞中可以共定位。结论:TRF1与PFN2存在相互作用,且这种相互作用发生在细胞核周。     

支气管哮喘患者血清IL-4、TNF-α 及IgE 水平变化及临床意义

目的:研究支气管哮喘患者白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及免疫球蛋白E(IgE)水平变化及临床意义.方法:对78例支气管哮喘患者(急性发作期组39例、缓解期组39例)血清IL-4、TNF-α、IgE水平进行检测,并与正常对照组的40例健康受试者进行比较分析.结果:支气管哮喘患者组血清IL-4、TNF-α、IgE水平显著高于正常对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);急性发作期组血清IL-4、TNF-α、IgE水平均显著高于缓解期组,差异亦均有统计学意义(P＜0.05);支气管哮喘患者血清IL-4、TNF-α、IgE水平两两之间呈正性显著相关(P＜0.05).结论:检测支气管哮喘患者血清IL-4、TNF-α、IgE水平对患者疾病预测及治疗具有重要的临床意义.     

汉滩病毒S片段基因编码区在Vero—E6细胞中的表达

汉滩病毒属于布尼亚病毒科汉坦病毒属,主要引起人类肾综合征出血热［１］。我国是肾综合征出血热发生和流行的主要疫区,该病起病急、病死率高,流行范围广,因此寻找安全有效、低廉的疫苗是控制本病流行和发生的关键。基因免疫是近年来微生物学和免疫学研究的新热点［２...     

我国生态问题鉴定与国土空间生态保护修复方向

研究目的：聚焦生态问题研究热点区域,鉴定不同生态区生态问题,提出不同生态区生态保护修复方向,以期为国家有针对性、有目的性、有方向性的开展生态保护与修复工作提供有效基础支撑。研究方法：研究热度评价模型、比较分析法和归纳总结法。研究结果：(1)20世纪80年代以来,我国生态问题研究热度总体呈增长态势,1998年以后生态问题的研究热度进入加速期,且在2012年掀起了新一轮的生态文明研究热潮。(2)我国各类生态问题研究热度存在明显的内部差异和空间差异,研究热度较高的生态问题主要是水土流失和生物多样性丧失,超过85%的城市均发表过关于这两个生态问题的学术论文,且研究热点区域集中在我国西部省份。(3)水土流失、荒漠化、生物多样性、林草湿地生态系统退化是各生态区重点关注的生态问题,超过半数的生态区重点关注森林生态系统退化;而石漠化、盐碱化、矿区生态退化等生态问题集中分布在几个脆弱生态区。超过80%生态区的主要生态问题都在3个及以上,这体现出我国多数生态区生态问题的紧迫性和复杂性。(4)各生态区生态保护修复方向存在差异,生态本底好且人类活动少的生态区以保育保护和自然恢复为主,此类生态区的保护修复重点应...