碱蓬cDNA表达文库的构建

以盐生植物盐地碱蓬（Suaeda salsa)地上部分为材料,提取植物总RNA,纯化出mRNA,合成cDNA第一链,得到双链cDNA后,连接入植物表达载体,构建cDNA表达文库。该文库重组子约10^6。将该文库转化农杆菌GV3101,可直接用以转化拟南芥。     

精氨酸和一氧化氮合成的关系及其在免疫调节中的作用

精氨酸 (Arginine,Arg)因其具有广泛的生物学作用而在所有氨基酸中占有重要地位。一定剂量的Arg可促进创伤愈合和胶原生成 ,刺激若干内分泌腺分泌激素 ,调节某些类型肿瘤生长 ,并增强细胞介导的免疫应答。因而常将Arg作为免疫增强膳食的一部分来对抗应激及严重疾病病人中常见的免疫抑制。Arg是高活性基团一氧化氮 (nitricoxide ,NO)的唯一供氮前体 ,已认定NO对越来越多的细胞过程有影响并存在于全身的许多组织。它可影响多种类型的免疫细胞。Arg自身或通过生成的NO参与了许多免疫调节过程 ,因此 ,对Arg体内合成、降解及外源性Arg转运在NO合成中作用的了解对其合理应用具有重要意义     

放牧对内蒙古锡林河流域草原土壤碳组分的影响

选择内蒙古锡林河流域三种草原,较系统地研究了放牧对微生物量碳(MB-C)和易分解碳(Lab-C)两种碳素组分的影响。结果表明,自由放牧22年后,羊草(Leymus chinensis)草原土壤0~10 cm和10~20 cm土层土壤微生物量碳分别下降了27.9%和12.8%;土壤易分解碳分别下降了22.0%和12.6%,自由放牧没有改变羊草草原土壤活性碳的季节变化形式。大针茅(Stipa grandis)草原0~5 cm表层和5~15 cm下层土壤微生物量碳分别下降了38.2%和12.2%。大针茅草原季节波动出现高峰的时间较羊草草原推后,基本在8月下旬,并且与地上生物量存在明显的正相关关系(p<0.001)。土壤活性碳在表征羊草草原和大针茅草原土壤的动态变化时,要敏感于土壤总有机碳。冷蒿-小禾草草原(Artemisia frigida-short bunchgrasses steppe)连续放牧11年恢复2年后,土壤各碳素组分都没有发生明显变化,但随着放牧率的增加,MB-C/Org-C比值和Lab-C/Org-C比值逐渐降低,表现为轻牧>中牧>重牧,这说明,在表征放牧对冷蒿-小禾草草原土壤的影响指示上,MB-C/Org-C和Lab-C/Org-C要比MB-C和Lab-C敏感。     

DNA 去甲基化机制的研究进展*

DNA甲基化作为动植物体内一种重要的表观遗传修饰形式,在调控基因表达、维持基因组的稳定性等方面发挥重要的生物学作用。固有DNA甲基化水平和模式的变化会导致生物的表型异常甚至死亡。而5-甲基胞嘧啶的水平和模式是由DNA甲基化和去甲基化共同决定的。DNA去甲基化可以分为主动去甲基化与被动去甲基化,而基因组甲基化模式的形成主要依赖于主动去甲基化。本文综述了生物体内DNA主动去甲基化五种潜在机制:DNA转葡糖基酶参与的碱基切除修复途径、脱氨酶参与的碱基切除修复途径、核苷酸切除修复途径、氧化作用去甲基化与水解作用去甲基化。     

HS-SPME-GC-MS分析蒟酱叶挥发性成分

首次采用顶空固相微萃取和气质联用技术(HS-SPME-GCMS),结合保留指数法,用峰面积归一化法测定蒟酱叶中挥发性成分及相对百分含量。结果表明,从蒟酱叶中鉴别出27个化学成分,占峰面积的97.53%,化合物结构类型包括醛、酸、酯、酚、烯烃、芳香烃和(环)烷烃。2-甲氧基-5-甲基苯甲醛(42.89%)、胡椒酚醋酸酯(12.49%)、异丁香酚(13.42%)、4-烯丙基-1,2-二乙酰氧基苯(9.47%)、胡椒酚(2.89%)、γ-毕橙茄烯(2.74%)、丁香酚(2.66%)和乙酸异丁香酚酯(2.06%)是蒟酱叶的主要挥发性成分。     

DNA-based方法及其在研究动物食物组成中的应用

了解动物的食物组成是研究生态系统的多样性和生态系统功能的基本要求,在动物生态学的研究中至关重要。DNA-based方法包括样本采集、DNA提取、PCR扩增、序列比对分析等一系列步骤,实验的成败取决于标记基因的选择、引物的设计及每个步骤的优化。文章综述了DNA-based方法的各个基本步骤及其优化方法,并对该方法在今后用于国内相关研究的可能性进行展望,关注用于研究国内三峡大坝这个大型水域生态系统的可能性,期望推动国内该领域的研究。     

番茄SlGRAS4基因特征分析和耐热功能鉴定

GRAS转录因子是调控植物生长发育和非生物胁迫响应的重要转录因子之一,而目前还没有GRAS调控高温胁迫的研究。为了深入研究番茄SlGRAS4生物功能,以耐热番茄LA2093为试验材料,分析番茄SlGRAS4基因结构、启动子序列及进化关系,利用qRT-PCR检测SlGRAS4在不同胁迫和不同激素处理下的表达水平,利用VIGS验证SlGRAS4基因耐热功能。结果表明:(1)生物信息学分析显示,SlGRAS4蛋白长度为666 aa,分子量为75 737.72 Da,理论等电点为6.31,含有GRAS转录因子家族典型的结构域,主要集中在C末端的277～657 aa之间;在SlGRAS4启动子区域发现脱落酸(ABA)和水杨酸(SA)响应元件;SlGRAS4与烟草NtGRAS1蛋白亲缘关系最近,推测SlGRAS4可能与其同源基因具有相似的生物功能。(2)在高温、低温、盐和干旱胁迫处理12 h时番茄SlGRAS4基因表达量升至最高,分别增加到对照的8.86、4.86、55.38和7.63倍;在ABA和SA激素处理8 h时SlGRAS4基因的表达量达到峰值,分别达到对照的120.72和3.55倍,说明SlGRAS4可能参与了多种非生物胁迫响应和激素信号传导。(3)沉默SlGRAS4基因番茄植株(VSlGRAS4)在高温胁迫下较对照植株(Ve)更容易萎蔫,且F_v/F_m与SOD、POD活性显著降低,REL和H_2O_2含量显著升高,说明在高温胁迫下沉默SlGRAS4使番茄植株细胞膜氧化损伤加重,光合能力降低,活性氧(ROS)清除酶活性减弱。(4)qRT-PCR分析显示,VSlGRAS4植株中高温信号应答关键基因HsfA1b、ROS信号应答基因ZAT10和ZAT12以及ROS清除酶编码基因CuZnSOD、FeSOD、APX1、APX2、CAT的表达水平均显著低于Ve植株,表明SlGRAS4转录因子可以通过调控高温和ROS信号转导来影响番茄的耐热性。研究认为,高温、低温、干旱、盐、ABA和SA均可显著诱导番茄SlGRAS4基因的表达,沉默SlGRAS4基因番茄植株的耐热性显著降低,证明番茄SlGRAS4基因具有耐热功能,为进一步解析SlGRAS4参与番茄耐热调控的分子机制奠定基础。     

胃癌细胞中Ras 基因的表达、突变分析及新剪接型Kras△E2 的发现

目的：传统Ras家族由Kras,Hras 和Nras 基因组成,这类基因的点突变经常在人类肿瘤中发现,突变热点位于12,13,61 位 密码子。ERas 基因是2003 年在鼠胚胎干（ES）细胞中发现的,其cDNA编码的蛋白与Kras,Hras 和Nras分别有46%,43%和47% 的相似性,故属于新的Ras 家族成员,近几年发现ERas 基因的表达与胃癌密切相关,而传统Ras 基因在胃癌细胞中的表达及突 变情况系统报道较少,本文旨在研究传统Ras基因Kras,Hras,Nras及其家族新成员ERas 基因在胃癌细胞中的表达和突变情况。 方法：选用7 株不同来源不同分化程度的胃癌细胞系,利用RT-PCR 及real-timePCR 检测Ras基因在这些胃癌细胞系中的表达, 并通过测序对传统Ras基因突变热点12,13,61 位密码子及ERas 基因全长进行突变分析。结果：①Ras基因在这些胃癌细胞系中 均有不同程度的表达,其中Hras 和Nras 基因在各株细胞中表达水平均一,而Kras 和ERas 基因则呈差异性表达;②在这些胃癌 细胞中传统Ras基因突变热点12,13,61位密码子不存在突变,ERas基因全长亦未检测到突变．③发现Kras 基因一新的剪接型, 特点为第一、三外显子直接拼接,缺失第二外显子,命名为Kras△E2。结论：与在其他肿瘤中不同,传统Ras 基因在胃癌细胞中不 存在突变热点,家族新成员ERas 基因全长亦无突变,在国际上首次报道新剪接型Kras△E2,从而得出创新性结论：Ras基因家族 在胃癌细胞中并不是通过热点突变导致持续活化而致癌,而可能是通过ERas 基因表达量的调节或形成新的剪接型Kras△E2 而 致癌。另外,Kras 基因是一被受国际关注的肿瘤基因,新剪接型的发现可能会对Kras 基因致癌机制产生新的认识,意义重大。     

盐度对滨海修复种海马齿生长及荧光参数的影响

为探究海马齿(Sesuvium portulacastrum)生长的适宜盐度和适宜区域,利用恒温培养箱,模拟人工生态浮床进行水培,对其在不同盐度培养液中的生长情况和荧光参数进行测定.结果表明,海马齿在0～15‰盐度下生长状况良好,且10‰盐度的海水对其生长具有促进作用,相对生长率和荧光参数在盐度5‰和20‰以上均会受到...     

苜蓿幼苗对铝胁迫的生理响应及综合评价

为探讨铝胁迫对苜蓿(Medicago sativa)幼苗生长和生理特性的影响,对铝胁迫下苜蓿地上和地下生物量、光合色素及根尖胼胝质含量进行测定,并对根尖结构进行观察,最后采用隶属函数分析法对苜蓿耐铝性进行评价。结果表明,随着铝胁迫的增加,苜蓿地上、地下部分生物量呈降低趋势,低浓度和高浓度铝胁迫使苜蓿生物量显著下降(P0.05);苜蓿的叶绿素含量呈下降趋势,胼胝质积累量增多;中、高浓度铝胁迫使根尖胼胝质含量显著上升。随铝胁迫浓度升高,根尖横切面细胞发生较大变化,尤其在高浓度时,细胞干瘪且排列紊乱。隶属函数分析结果表明,No. 12和No. 18苜蓿材料的耐铝性较好,可在南方酸性富铝化土壤中推广应用。