大容量人天然抗体库的构建、鉴定及初步应用

从未经主动免疫的健康志愿者的外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR扩增人抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,得到了6种VH家族基因,11种VL家族基因,这些抗体基因家族覆盖了人抗体基因多样性的95%以上。采用改进的SOEPCR法将VH基因和VL基因连接成人单链抗体(scFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,将连接产物电转化大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13KO7超感染,构建了库容为5.58×109的噬菌体单链抗体库。采用BstNI酶切法证明,构建的噬菌体单链抗体库具有良好的多样性。以TNF-α为靶,从该抗体库中筛选到了抗TNF-α抗体,这说明该抗体库可用于人源抗体的筛选。     

应用于生物技术的微机软件

新生物学的最新之点就在于它是信息科学。它力图发现、整理和解释存贮于核酸并可表达成多肽的信息。其信息量是极其巨大的,没有计算机的帮助,要解释它是不可能的。近十年来,在大研究机构工作的大多数研究工作者都是通过大型计算机系统而获得这种帮助的。     

PCR放大产物的转变与积累规律

本文提出了特异性DNA序列PCR放大机制中的一个新理论。首先从研究PCR放大产物的形成和来源组成特点人手,进而研究了它们的转变关系和积累规律,指出在任一PCR放大体系中所放大的目的产物—“短片段产物”拷贝数的积累量(S^NC）及其放大倍数（X^SN)与模板基数(C)、反应周期数（N）和反应效率(x)成一定的函数关系,即： S^NC=C[1/2(1+x)ⁿ-N] X^SN=1/2(1+x)ⁿ-N 计算机模拟结果表明,该理论值与PCR放大过程的试验观测值是一致的。     

综合遗传学公司推出食品沙门氏菌快速诊断试验盒

综合遗传学(Integrated Genetics)公司最近推出它的第一个产品--检出食品沙门氏菌用的快速诊断试验盒。它被称为GENE-TRAK,是以DNA杂交技术为基础的。目前只能用于沙门氏菌的检出。该公司的科学家已分离出DNA探针,含有与沙门氏菌DNA互补的碱基序列模式。分离出可能存在于食品样品中的任何微生物的DNA链后,将沙门氏菌DNA探针加入样品中,若探针与存在于样品中的DNA单链杂交,则表明其中有沙门氏菌存在。     

丝状真菌能分泌外源蛋白

Genencor公司的一个研究小组已用重组DNA技术开发出一种丝状真菌分泌系统。他们是用一种曲霉(Aspergillus)实现这一点的。该公司现用大规模发酵曲霉及其他丝状真菌来生产商用的食品级酶。已用这项新技术分泌凝乳酶,此酶通常由牛第四胃的壁衬细胞分泌,可用于奶酪生产。     

世界研究和开发专家聚会迈阿密

今年1月11-15日,在美国佛罗里达州南部迈阿密港市,举行了一次名为“从基因到蛋白质:转向生物工学”的专题讨论会,出席会议的科学家和生物业商人共731位,其中66位来自欧洲、亚洲和拉丁美洲的十三个国家。 这次讨论会由迈阿密大学生物化学系和巴氏(papanicolaou)癌研究所联合发起。     

大鼠前脂细胞质膜Na+/H+交换同时参与细胞的增殖和分化

以原代培养的大鼠前脂细胞为模型 ,以 2′ ,7′ bis ( 2 carboxyethyl) 5 ( 6 ) carboxyfluorescein (BCECF)作为检测胞内pH(pHi)的荧光探针 ,测定不同生长因子刺激下胞内pH的变化 ,证明大鼠肾周前脂细胞质膜存在Na⁺/H⁺交换活性 ,胎牛血清(FCS)能快速激活Na⁺/H⁺交换 ,导致pHi升高 (约 0 .2pH单位 ) ,并引起DNA合成 .Ethyl isopropyl amiloride (EIPA)抑制Na⁺/H⁺交换与DNA合成 .在无血清条件下 ,胰岛素不刺激DNA合成但引起细胞分化 ,表现为胞内脂滴积累和 3 磷酸 甘油脱氢酶(G₃ PDH酶 )活性增强 ,同时激活Na⁺/H⁺交换活性导致pHi升高 ;EIPA既抑制胰岛素对Na⁺/H⁺交换的激活 ,也抑制G₃ PDH酶活性增强 .结果证明 :Na⁺/H⁺交换的激活不仅与大鼠前脂细胞增殖相关 ,同时也是细胞分化的早期事件 .     

中国天牛新记录

Ⅰ.天牛亚科 Cerambycinae1.白角刺虎天牛 Demonax alboantennatus Gressitt et Rondon 1970 分布:广东海南尖峰岭,广西田林;2.阿氏艳虎天牛 Rhaphuma anongae Gressitt et Rondon 1970 分布:广西龙州;3.八字纹脊虎天牛 Xylotrechus emaciatus Bates 分布:沈阳