依托泊苷影响HEK293细胞同源重组修复体系

抗肿瘤药物疗效的研究多集中在肿瘤细胞,目前针对正常细胞的研究颇少,有必要建立能进行定量分析的同源重组定量修复体系。我们已建立的模型可以探讨肿瘤药物化疗后对HEK293细胞DSBs修复的继发性后果。通过构建含有带I-SceⅠ酶切位点的同源介导的重组修复底物（homologous direct recombination, HDR）,或单链退火修复（single strand annealing, SSA）底物的细胞株,定量检测依托泊苷 (etoposide,VP-l6)对同源性重组修复(homologous recombination, HR)通路的影响。成功构建了可用于定量检测DNA双链断裂(double-strand break, DSBs)诱导的SSA和HDR修复的正常人HEK293细胞应用模型。细胞毒结果证实,与SSA/293对照组对比,VP-16给药组 16 μmol/L（0.475±0.029 vs 1.000±0.000, P<0.001)细胞活力明显降低;与HDR/293对照组相比,VP-16 给药组16 μmol/L（0.458±0.188 vs 1.000±0.000, P<0.05)细胞活力降低。此外,本研究证实,VP-16抑制SSA修复,VP-16给药组 2 μmol/L与SSA/293对照组相比（0.575%±0.177% vs 1.352%±0.195%, P<0.05）,修复效率降低;VP-16抑制HDR修复,VP-16给药组1 μmol/L与HDR/293对照组修复效率相比（0.305%±0.078% vs. 0.635%± 0.049%,P<0.05),修复效率降低。VP-16诱导DNA损伤的同时,抑制HDR修复和SSA修复,修复效率呈现剂量依赖性。本研究结果可为抗肿瘤药物的临床应用提供某些指导。     

金针菇担孢子核相及遗传属性的研究

以3个不同的金针菇菌株为材料,研究了其担孢子的核相及遗传属性。荧光染色观察显示,担孢子核相以双核为主,双核孢子、单核孢子和无核孢子分别占80.2%、7.5%和12.3%。源于单孢分离物的菌丝为有隔膜、无锁状联合的多核菌丝。在交配试验中,源于不同菌株单孢分离物的菌丝原生质体的配对形成具锁状联合的菌落,而源于同一单孢分离物的菌丝原生质体的配对则形成无锁状联合的菌落,暗示担孢子中的两个核具有相同的交配型。RAPD分析显示,源于同一单孢分离物的菌丝原生质体为10个随机引物所扩增的图谱彼此完全相同,印证了担孢子中的双核是同质的。此外,观察表明,一个担子上着生有4个担孢子。因此,金针菇是一种具4个含同质双核担孢子的四极性蕈菌。     

西双版纳不同经济作物环境泥蜂物种多样性研究

泥蜂是一类重要的捕猎性天敌昆虫和传粉昆虫。本研究于2018年6月-2019年11月对西双版纳地区观赏经作区、柚林区、古茶林区和农田区（样地Ⅰ-Ⅳ）4个调查区采用马氏网诱捕方法定期定点调查,每月调查一次。结果如下：西双版纳调查区域分布有泥蜂类群3科15族27属110种;其中,泥蜂科包括3族5属7种;蠊泥蜂科包括2族3属8种;方头泥蜂科包括10族19属95种,为该地区的优势科。脊短柄泥蜂属Psenulus、小唇泥蜂属Larra和短翅泥蜂属Trypoxylon为优势属,刻臀小唇泥蜂Larra fenchihuensis、磨光小唇泥蜂红腿亚种Larra polita luzonensis为优势种。4个作物区的优势科均为方头泥蜂科,但不同作物区泥蜂的优势属种存在差异,观赏经作区（样地Ⅰ）优势属为脊短柄泥蜂属和短翅泥蜂属,优势种为普氏脊短柄泥蜂指名亚种Psenulus pulcherrimus pulcherrimus（17.4%）和岩田隆痣短柄泥蜂Carinostigmus iwatai（15.6%）;柚木林区（样地Ⅱ）优势属为脊短柄泥蜂属和短翅泥蜂属,优势种为普氏脊短柄泥蜂指名亚种（17.7%）和锡兰脊短柄泥蜂Psenulus ceylonicus（11.3%）;古茶林区（样地Ⅲ）优势属为短翅泥蜂属和小唇泥蜂属,优势种为刻臀小唇泥蜂（15.6%）和吉打州短翅泥蜂Trypoxylon kedah（12.5%）;农田区（样地Ⅳ）优势属为小唇泥蜂属和短翅泥蜂属,优势种为刻臀小唇泥蜂（21.7%）和磨光小唇泥蜂红腿亚种（21.7%）。15属多区分布,12属单区分布。植被差异是影响泥蜂物种多样性的重要因子,植被群落复杂程度影响泥蜂群落特征指数,植被群落越复杂的环境,泥蜂群落种类越丰富,物种多样性越高。泥蜂物种多样性随季节的变化而明显变化,降雨量和温度等气候因素是影响泥蜂多样性变化的重要因子。4个样地之间泥蜂群落相似性系数表示为中等不相似或极度不相似水平,表明不同样地中泥蜂群落组成差异很大。本研究明确了西双版纳4个不同经济作物环境中的泥蜂物种多样性,可为天敌昆虫资源的保护和利用以及害虫生物防治等研究提供依据。     

铝对秋茄幼苗生理特性的影响

为探讨铝对秋茄幼苗生理特性的影响,实验研究了不同浓度铝盐(0-100 mmol/L AlCl3)处理后秋茄的各种生理反应,对幼苗的生长、净光合效率、膜脂过氧化作用、游离脯氨酸含量等生理指标与胁迫程度及时间的关系作了对比研究,特别分析了高浓度(25-100 mmol/L Al3+)胁迫下,秋茄叶片和根部活性氧清除系统保护酶活性的变化趋势。研究发现,在10 mmol/L浓度以下,秋茄在生理特性上表现出对铝胁迫的最大适应性,能维持正常生命生长过程。当浓度增加至25-100 mmol/L,秋茄的生理反应较为敏感,膜脂过氧化加重,MDA含量及保护酶活性随铝浓度增加的变化趋势与其在海莲中的表现基本相似。高浓度铝胁迫的极端环境使植物体内产生过量的活性氧自由基,诱导了细胞膜系统的氧化损伤,最终导致秋茄植株衰老甚至死亡。抗氧化保护酶系统SOD、CAT、POD的协同作用,在一定时间内可以维持细胞内活性氧代谢平衡;特别是POD被激活的程度最大,且持续时间最长,可以考虑作为秋茄幼苗抗铝胁迫的生理标志。秋茄叶片和根部的游离脯氨酸含量在25和100 mmol/L Al3+胁迫下均显著增加。       

广州市在校高职大学生饮食行为与身体活动调查分析

摘要：目的：了解广州市在校高职院校大学生饮食行为与身体活动现状。方法：以广州市某职业学院1 310名学生为调查对象,采用随机抽样的方法进行问卷调查。结果：有52.67%的学生不会每天吃早餐,仅有7.63%每天喝奶类,每天吃新鲜蔬菜和水果的分别为56.49%和16.79%,有45.8%的学生有偏食的倾向;只有16.03%的学生能经常参加体育锻炼。结论：高职学生存在较多健康危险行为,仍需有效的健康教育。     

重组人卵透明带蛋白(rhZP3)的生物活性研究

为了研究毕赤酵母表达的重组人卵透明带蛋白(rhZP3)的生物活性,分别用空白培养液,含孕酮或rhZP3的培养液对人精子进行顶体诱发实验,用考马斯亮蓝染色法对顶体状态进行评价;用不同浓度的rhZP3以及空白培养液分别处理精子,然后再与卵子进行结合实验,观察经过不同处理的精子在精卵结合中的情况;用抗rhZP3抗血清与阴性血清分别处理卵子,再与精子进行结合实验,观察经过不同处理后的卵子在精卵结合中的情况。rhZP3诱发顶体反应实验结果显示,rhZP3处理组与空白对照组之间差异显著(P<0.01);精卵结合实验结果显示,各实验组和对照组之间存在显著性差异(P<0.01),rhZP3、抗rhZP3抗体均能抑制精卵结合。实验结果表明,rhZP3具有天然人卵透明带蛋白相似的活性。     

弗劳地枸橼酸盐杆菌基因种与小儿腹泻关系、耐药性的研究

从１４５７例腹泻患儿大便中分离出１６４株弗劳地枸橼酸盐杆菌复合群的菌株,而对照组中分离率仅４．２６％,具统计学差异。为探讨其致病性,采用不耐热性肠毒素,耐热性肠毒素基因探针,菌液直接ＬＴ－ＰＣＲ,家兔肠袢结扎和刚果红结合试验检测细胞的腹泻毒力因子,证实４７．１％的菌株产生ＬＴ,系腹泻重要毒力因子,不具侵袭性因子。     

谷氨酸脱羧酶的分子改造及酶学性质研究

以大肠杆菌(Escherichia coli)来源的谷氨酸脱羧酶(GadB)为研究对象,通过组合突变,获得了pH适用范围拓宽、催化活力提高和稳定性增强的组合突变体M2。与野生型GadB-WT相比,组合突变体M2的pH适用范围有效拓宽,在pH6.0时催化活力比GadB-WT提高113.43%。之后对含有M2突变体基因重组菌的发酵培养基和诱导条件进行优化,优化后单位培养基酶活力比未优化时提高了104.13%。在此基础上对M2的酶学性质进行测定,测得其最适pH为5.0,最适温度为37℃。通过稳定性测定M2的pH稳定性和热稳定性与野生型GadB-WT相比都有一定程度的增强。M2的动力学参数K_m值为7.316μmol/L,k_cat为13.387 s^-1,k_cat/K_m为1.830 L/(s·μmol)。研究获得的组合突变体M2进一步丰富了催化合成γ-氨基丁酸的GadB突变体酶库,具有良好应用前景。     

新疆米短柄泥蜂属二新种记述(膜翅目,蜜蜂总科,方头泥蜂科)(英文)

记述了采自新疆2新种,四齿米短柄泥蜂M.quadridentata Ma,Liet Chen,sp.nov.和散点米短柄泥蜂M.sparsipunctulata Ma,Liet Chen,sp.nov.,对米短柄泥蜂属中国已知种类检索表进行了部分修订。模式标本分别保存在浙江大学寄生蜂标本室和中国科学院动物研究所昆虫标本馆。