蒽酮—硫酸法测定菊花多糖方法的研究

研究了蒽酮-硫酸法测定菊花多糖含量时各因素对结果的影响,并对这些因素进行了优化.通过实验发现,波长为644 nm,反应温度40℃,反应时间15 min,在10.00～ 100.00 μg/mL范围内吸光度与被测物含量呈良好的线性关系,相关系数r =0.988 3,平均回收率88.95％,相对标准偏差(RSD)为8.09％.     

低浓度CO2对水车前和黑藻光合特性的影响

本实验通过对沉水植物水车前（offelia alismoides）和黑藻（Hydrilla verticillata）进行低浓度C02诱导,研究其光合特性的变化。研究显示,诱导后,水车前的PEPC／Rubisco活性比值由0．45上升到4．17,黑藻由0．47上升到4．17,两种植物的C4途径光合酶PEPC和NAD—ME的活性升高了10倍左右,其他C4光合酶如NAD—MDH和PPDK的活性也大幅升高;诱导后,水车前和黑藻的其他光合特性也发生了显著变化：净光合速率比对照分别提高了50．8％和74．1％,O2对处理组光合速率的抑制分别为对照组的35％和60％,叶绿素荧光基本参数也有显著性变化。研究结果表明,经低浓度C02诱导,水车前和黑藻光合碳同化途径可能由C3转变成为C4。     

古生代有孔虫实体化石研究方法

古生代有孔虫大部分是通过切片进行研究的,但是普通的切片法很难得到非常好的定向标本,这就产生了很多同物异名,限制了有孔虫在古生代生物地层学、古生态学和古海洋学中的应用。另外由于口孔的内部和外部特征在分类学中的地位越来越重要,所以通过实体化石来研究古生代有孔虫理应受到更多的重视。本文论证了在古生代地层中获得实体化石的可能性,对化石提取的实验步骤进行了系统总结,细述了对实体化石进行扫描电镜和切片研究的全过程,并根据笔者的经验,对一些技术细节及注意事项进行了详细介绍。本文最后建议,古生代的有孔虫研究应该尽可能地利用实体化石来进行。     

乙酸钙不动杆菌磷脂酶C在大肠杆菌中重组表达、纯化及酶学性质分析

【目的】构建乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)ATCC17902磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)的重组大肠杆菌菌株、纯化重组酶并进行酶学性质分析比较。【方法】以A.calcoaceticus ATCC17902基因组DNA为模板,PCR扩增得到两段磷脂酶C基因(PLC1、PLC2),构建重组大肠杆菌表达质粒并转化大肠杆菌BL21(DE3)中,实现PLC1、PLC2基因的表达。IPTG诱导表达后,经镍柱亲和层析纯化重组蛋白。【结果】成功构建两株产磷脂酶C的重组大肠杆菌并纯化,样品经SDS-PAGE分析在80 kDa附近均出现显著的特异性条带。NPPC法测得PLC1、PLC2酶活分别为31160±418 U/mg、13640±354 U/mg,最适反应温度分别为65、50℃,最适pH值分别为8、7.5。在低于30℃时,pH值7-8时,PLC1、PLC2重组酶较稳定,40℃处理30min,PLC1酶活稳定而PLC2残余酶活低于25%。Mg2+、Ca2+增强PLC1、PLC2的活性,Zn2+增强PLC1酶活性却抑制PLC2酶活。底物特异性分析表明PLC1、PLC2均水解磷脂酰肌醇(Phosphatidylinositol,PI),对其他种类磷脂不能水解或水解程度很低。【结论】本文首次实现了A.calcoaceticus ATCC17902来源的磷脂酶C的重组表达与功能验证,为其它食品安全性微生物来源的磷脂酶C的研究提供了一定的借鉴意义。     

近红外漫反射光谱法快速测定当归中阿魏酸及亚油酸北大核心CSCD

以反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定的当归中阿魏酸及亚油酸含量作为参考值,利用TQ Analyst 8.0软件的偏最小二乘法(PLS)建立了快速、准确测定当归中阿魏酸及亚油酸含量的定量模型。结果表明,阿魏酸校正集的相关系数(R)为0.9721,校正均方差(RMSEC)为0.5942,预测均方差(RMSEP)为0.6747。亚油酸校正集的相关系数为0.9673,校正均方差为0.4573,预测均方差为1.0682。验证集中阿魏酸及亚油酸的平均预测回收率分别为101.98%和102.03%。该方法操作简单、快速,所建模型预测结果准确、可靠,可用于中药当归中阿魏酸及亚油酸的含量测定。     

346株鲍曼不动杆菌临床分布及耐药率分析

目的了解鲍曼不动杆菌引起医院感染的特点以及对抗菌药物的耐药性的变化趋势。方法应用美国BD公司Phoenix^TM100全自动细菌和药敏系统鉴定仪对所分离的364株鲍曼不动杆菌进行鉴定和药敏试验,并进行统计学分析。结果 346株鲍曼不动杆菌来自痰液、伤口分泌物、中段尿、静脉血及大便,分别占58.96%、30.92%、5.49%、4.34%、0.29%。药敏结果显示鲍曼不动杆菌对多粘菌素和米诺环素敏感性最高,耐药率低于10.4%。结论加强鲍曼不动杆菌的耐药监测,了解其耐药性变迁,可合理指导用药,有效控制鲍曼不动杆菌耐药菌株的产生。     

液态型凝乳酶储藏条件的初步研究

为进一步延长液态型凝乳酶的储藏时间,以金属离子、糖类、多羟基醇、大分子助剂和表面活性剂等为稳定剂优化得到最优的复合保护剂配方:山梨醇7.5%、明胶1%、甘油15%、吐温400.25%、氯化钾50 mmol/L;添加0.1 g/L对羟基苯甲酸乙酯可有效抑制在储藏过程中由杂茵繁殖导致的发臭、浑浊。添加复合保护剂和防腐剂的液态型凝乳酶,室温放置90 d,凝乳酶活力保留率为80.8%,比对照组提高41.6%。     

云南不同产地臭灵丹精油化学成分及抗菌活性

采用水蒸气蒸馏的方法,对采自云南4个不同地区（昆明,丽江,普洱,新平）的臭灵丹叶子进行挥发油提取,并利用GC MS和GC FID气相色谱联用技术分析其化学组成,分别从中鉴定出39、37、33、44个化合物。鉴定的化合物各占挥发油总量的9332% (昆明)、8057% (丽江)、9224% (普洱)和9385% (新平)。研究结果表明,采自这四个地区植物样品提取所得挥发油化学组成不尽相同：昆明产臭灵丹挥发油富含芳香族化合物(3806%);而从丽江和普洱样品中获得的挥发油化学成分以倍半萜（分别为1989%和4465%）和氧化倍半萜（分别为4085%和3511%）为主;非氧化单萜和非氧化倍半萜化合物（分别为4223%和3325%）则是新平产臭灵丹挥发油的主要化合物类型。同时,对这些不同产地的臭灵丹挥发油也进行了抗菌活性测试。从以上实验研究结果推测环境差异是影响臭灵丹挥发油化学组成差异的重要因素,而不同的化学组成可能是导致4种样品抗菌敏感程度不同的原因。     

红冬孢酵母苯丙氨酸解氨酶基因pal在大肠杆菌中的克隆与表达

以红冬孢酵母总RNA为模板反转录获得其苯丙氨酸解氨酶基因pal,测序与已公布蛋白序列进行比对,相似度为99％.并以含有T7强启动子的pET - 28a(+)为载体构建重组质粒pET - 28a(+)- pal,通过异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导实现苯丙氨酸解氨酶(PAL)在大肠杆菌中的表达.对诱导条件进行初步优化后,重组茵PAL比酶活可达到42.99 U/g.转化实验中肉桂酸的转化率为48.52％,L-苯丙氨酸生成量为1.73 g/L.结果表明,红冬孢酵母pal基因通过表达载体pET - 28a(+)在E.coli中获得了高效表达.     

薰衣草精油缓释固体分散体的制备及其体外释药性能研究

目的：优化薰衣草精油（LEO）缓释固体分散体的制备工艺,并探讨体外释药模型。方法：以芳樟醇及乙酸芳樟酯为指标,建立气相-色谱质谱联用（GC-MS）技术测定溶出度的方法;选用硬脂酸、聚乙二醇6000(PEG 6000)和单硬脂酸甘油酯为辅料,优化辅料配比,采用熔融法制备LEO缓释固体分散体,考察其体外释药性能。结果：LEO缓释固体分散体的最佳处方配比为硬脂酸∶PEG 6000∶单硬脂酸甘油酯：LEO=3∶5∶1∶1,该条件下所制备的固体分散体在体外能够持续释药12 h,体外释药符合一级动力学模型。结论：所优选的处方配比工艺稳定可靠,所得缓释固体分散体能显著改善药物溶出,缓释效果令人满意。