El Tor型霍乱弧菌分泌性蛋白初步分析

摘要：【目的】利用高通量蛋白质组分析技术,初步探讨El Tor型霍乱弧菌的分泌性蛋白组成,为进一步的功能研究打下基础。【方法】选取El Tor型霍乱弧菌流行株N16961和非流行株92-3,用双相电泳和激光辅助解析-飞行时间串联质谱（Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight,MALDI-TOF）技术对培养上清的全部蛋白质组份进行鉴定和分析。【结果】从N16961株培养上清中可检测到206个蛋白点,并鉴定出49种蛋白;从92-3株培养上清中可检测到236个蛋白点,并鉴定出42种蛋白,两株菌共鉴定蛋白68种,其中经预测含有信号肽的蛋白占总数的55.88%（38/68）。按功能不同将所鉴定出的蛋白分为10类,其中代谢酶、蛋白折叠/伴侣蛋白、蛋白合成以及信号传导相关蛋白占全部培养上清蛋白数的36.76%,转运蛋白占14.71%,鞭毛蛋白占11.76%,降解酶占10.29%,外膜蛋白占5.88%,毒素占1.47%,在所鉴定出的蛋白中有11种具有信号肽的假想蛋白和2种功能未知的蛋白为首次被实验证实可出现在霍乱弧菌培养上清中,占19.12%。【结论】初步获得了El Tor型霍乱弧菌流行株和非流行株的分泌性蛋白谱及其组成特征,并提示与霍乱弧菌致病关系密切的鞭毛蛋白在胞外释放机制、红血球凝集素/蛋白酶在非流行株中的高表达特征等值得高度关注。     

稻田免耕和稻草还田对土壤腐殖质和微生物活性的影响

为了阐明免耕和稻草还田土壤固碳机制,研究了无稻草还田免耕（NT）、无稻草还田常耕（CT）、稻草还田免耕（NTS）和稻草还田常耕（CTS）对水稻不同生育期不同土层（0—5,5—12,12—20cm）土壤腐殖质形态、含量及微生物活性的影响。结果表明,免耕（NT和NTS）处理显著增加0—5 cm土层土壤游离松结态、联结态和稳紧结态腐殖质含量和游离松结态腐殖质占总腐殖质的比例,且免耕对土壤各结合态腐殖质含量的影响程度有随生育期的推后而增加的趋势;5—12cm和12—20cm土层土壤各结合态腐殖质含量和0—20cm各土层微生物活性有减少趋势;在水稻分蘖期免耕对微生物活性影响很弱,在水稻拔节—灌浆期免耕处理显著降低5—12 cm土层土壤微生物活性,相反,免耕却增加水稻成熟期0—5 cm土层的微生物活性;另一方面,稻草还田（CTS和NTS）显著提高土壤各结合态腐殖质含量,尤其是0—5 cm土层、游离松结态腐殖质及水稻生育后期;CTS处理显著增加分蘖期—孕穗期0—20 cm土层的呼吸强度,而稻草还田显著增加孕穗期—成熟期0—5cm土层的纤维素分解强度。可见,通过增加土壤腐殖质含量和各结合态腐殖质含量并改变微生物活性免耕有利于表土层碳的固定作用,而免耕与稻草还田相结合更有利于土壤碳的积累。     

支气管灌洗液SIRT-1、TGF-β1及PINP水平与肺结核患者支气管狭窄发生风险的关系及其预测价值分析

摘要 目的：探讨支气管灌洗液中沉默信息调节因子1（SIRT-1）、转化生长因子-β1（TGF-β1）及I型前胶原N端前肽（PINP）水平与肺结核患者支气管狭窄发生风险的关系，并分析三指标预测肺结核发生支气管狭窄的价值。方法：选择2020年2月至2023年2月江苏大学附属宜兴医院收治的187例肺结核患者，根据是否发生支气管狭窄分为狭窄组（86例）和非狭窄组（101例）。检测并比较两组支气管灌洗液SIRT-1、TGF-β1及PINP水平和肺功能。Pearson相关性分析支气管灌洗液SIRT-1、TGF-β1及PINP水平与肺功能的相关性。多因素Logistic回归模型分析肺结核患者发生支气管狭窄的影响因素。受试者工作特征（ROC）曲线分析支气管灌洗液SIRT-1、TGF-β1及PINP水平预测肺结核患者发生支气管狭窄的价值。结果：狭窄组肺不张、呼吸困难比例、支气管灌洗液TGF-β1、PINP水平高于非狭窄组（P＜0.05），SIRT-1水平、第1秒用力呼气量（FEV1）、用力肺活量（FVC）、最大呼气峰流速（PEF）低于非狭窄组（P＜0.05）。支气管狭窄肺结核患者的支气管灌洗液SIRT-1水平与FEV1、FVC、PEF呈正相关（P＜0.05），TGF-β1、PINP水平与FEV1、FVC、PEF呈负相关（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析，结果显示，呼吸困难、高水平TGF-β1、高水平PINP是肺结核患者发生支气管狭窄的危险因素（P＜0.05），高水平SIRT-1则是保护因素（P＜0.05）。支气管灌洗液SIRT-1、TGF-β1及PINP单独检测预测肺结核患者发生支气管狭窄的曲线下面积（AUC）为0.736、0.799、0.730，联合检测支气管灌洗液SIRT-1、TGF-β1及PINP预测的AUC为0.861，高于单独指标检测的预测效能。结论：支气管狭窄肺结核患者的支气管灌洗液中SIRT-1水平降低，TGF-β1、PINP升高，且与肺功能下降以及支气管狭窄发生风险增加有关，支气管灌洗液SIRT-1、TGF-β1及PINP水平检测对肺结核患者发生支气管狭窄具有一定预测价值，且联合检测的预测效能更高。     

魏氏拟尾柱虫休眠包囊及其细胞器超微结构的观察

为研究纤毛虫休眠状态下细胞的分化及其胞器的特征,本文以透射电镜术显示,魏氏拟尾柱虫（Ｐａｒａｕｒｏｓｔｙｌａｗｅｉｓｓｅｉ）休眠包囊中,颗粒层壁内有小泡,表膜位置偶见小泡样结构,大部分线粒体以多个相互聚集在一起,自噬泡将线粒体等胞器包裹在内经历消化过程,细胞内膜系统十分发达。作者推测,颗粒层及表厝小泡可能是休眠细胞经由表膜进行物质交换的结构,自噬泡消化现象可能是细胞中物质和能量来源的主要途径。     

环状β-(1,2)-葡聚糖的提纯与鉴定*

三叶草根瘤菌H954在GMS培养基上 2 8℃培养 8d后 ,发酵液用无水乙醇分步沉淀法抽提 ,经过SephadexG 50、SephadexG 1 0、DEAE 纤维素柱层析纯化 ,并用气相色谱 (GC)、^{1 3}C 核磁共振(NMR)和质谱分析 ,证明该菌产生环状 β( 1 ,2 ) 葡聚糖 ,该糖是一种以葡萄糖为单体 ,通过 β ( 1 ,2 ) 葡聚糖苷健连接而成的环状分子 ,且绝大部分为中性糖 ,聚合度从 1 7到 2 2 ,其中以 1 9为主 ,分子量为 30     

细胞诱导分化剂对HL60细胞β-1,4-半乳糖基转移酶活性的影响

用荧光标记的受体底物（Ｇｎβ１－２Ｍα１－６（Ｇｎβ１－２Ｍα１－３）Ｍβ１－４Ｇｎβ１－４（Ｆｕｃα１－６）Ｇｎ－ＰＡ）,结合高效液相层析（ＨＰＬＣ）建立了细胞β－１,４－半乳糖基转移酶的活性检测方法．研究了ＨＬ６０细胞在体外低血清培养后不同的时间其酶活性的变化,发现１２至２４ｈ酶活性达到一个高峰,为５０．１４ｐｍｏｌ／ｍｉｎ（１０６ｃｅｌ）,此时细胞处在分裂间期,其它各测定时间变化不大．用ＰＭＡ,ＲＡ等细胞诱导分化剂处理ＨＬ６０细胞株时,发现其活性发生了较明显的变化,ＰＭＡ诱导的细胞其酶活性在２４ｈ变化最大,升高到对照的１．３２倍;而ＲＡ处理的细胞其酶活性在７２ｈ变化最大,升高到对照的２．１５倍．     

植物园发展的动向

对国内外植物园近十余年来发展的动向进行评述,列举了近年来一系列重要的植物园国际会议与重大活动,指出当前国际植物园工作的中心任务首先是物种保护。总结和分析我国植物园发展的历史和现状、存在问题以及在园貌建设上与国际先进植物园的差距。这些差距主要表现在：（１）植物的收集量;（２）活植物数据的积累;（３）罕见植物的引种;（４）现代技术的应用。作者最后提出,我国植物园发展应把握的几个主要问题是：（１）既是多功能全方位发展,又应各具特色;（２）生物多样性是植物园永恒的主题;（３）植物园应着重物种迁地保护的研究和实践;（４）植物园应重视栽培和利用植物并着重以药用植物为对象。     

实验性大鼠肝癌组织中NOS之分布及意义

以酶组织化学方法对实验性大鼠肝癌组织中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的分布进行定位研究。结果显示：原发及转移的肝癌组织癌细胞中ＮＯＳ呈阴性反应,不同类型肝癌组织内未见明显差异,表明ＮＯＳ活性的降低与细胞的恶变相关。提示可作为临床肝癌诊断的一个指标。癌旁肝细胞、Ｋｕｐｆｅｒ细胞及癌组织中的巨噬细胞胞浆呈ＮＯＳ阳性,此处ＮＯ是否属于一种参与活化巨噬细胞杀伤肿瘤细胞的效应分子有待探讨。     

芜菁中性多糖对PC12细胞氧化损伤保护作用机制的初步研究CSCD

以H_(2)O_(2)诱导PC12细胞建立氧化损伤模型,研究芜菁中性多糖(neutral polysaccharide from Brassica rapa L.,BRNP)对PC12细胞氧化损伤保护及初步作用机制。采用CCK-8法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶(LDH)检测H_(2)O_(2)对PC12细胞氧化损伤的保护作用;JC-1法检测BRNP对H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞线粒体膜电位的影响;Western blot法检测BRNP对H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平。结果表明,BRNP对PC12细胞无明显细胞毒性;H_(2)O_(2)的造模浓度和时间分别为300μmol/L、4 h;BRNP在一定程度上可减轻H_(2)O_(2)对PC12细胞的氧化损伤;BRNP可降低H_(2)O_(2)对PC12细胞线粒体膜电位的损伤;以不同剂量BRNP干预PC12细胞后,Bax、Caspase-3蛋白表达水平均有显著降低(P<0.05);而Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。综上所述,BRNP能够改善H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞氧化应激损伤及保护其细胞功能,其作用机制可能与抑制细胞内LDH生成、提高抗氧化酶活性及其凋亡蛋白表达水平有关。     

大鼠诱发肝癌过程中N乙酰氨基葡萄糖转移酶V的高效液相层析测定

提纯人血浆运铁蛋白,经链霉蛋白酶水解,再经肼解法制备Ｔｆ中的二天线Ｎ糖链,后者经还原末端的氨基吡啶化进行荧光标记,再切除外链的唾液酸和半乳糖残基,获得Ｇｎ２Ｍａｎ３Ｇｎ２－ＰＡ荧光标记糖链,以此制备的糖链为受体底物,ＵＤＰ－ＧｌｃＮＡｃ为供体底物,用反相ＨＰＬＣ分离底物和产物,建立了Ｎ乙酰氨基葡萄糖转移酶测定法,用ＧｎＴ－Ｖ作为肿瘤生化标志物,观察到在二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌的过程中,此酶在诱癌第