心肌α肌球蛋白重链启动子驱动的CREG蛋白表达载体的构建及鉴定

目的：构建心肌特异性α-肌球蛋白重链（α—myosin heavy chain,α—MHC）启动子启动E1A基因阻遏子（cellular repressor of E1A—stimulated genes,CREG）和增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein,EGFP）融合的真核表达载体。绿色荧光蛋白作为报告基因,方便在心肌细胞中直接观察CREG蛋白的表达,为心肌特异性转CREG基因动物模型制备提供载体。方法：用BamHI和EcoRI双酶切pcDNA3．1myc—His／hCREG质粒得到CREG基因,亚克隆入增强绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-N1中,构建pCREG-EGFP-N1;根据Genebank中公布的α-MHC基因的启动子序列,人工合成pUC57-α-MHC启动子基因序列,经AseI和NheI双酶切得到启动子α—MHC,亚克隆入pCREG—EGFP-N1中替代原CMV启动子,构建pα-MHC-CREG—EGFP-N1,测序鉴定。用脂质体法将该质粒转染体外培养的小鼠原代心肌细胞,荧光显微镜下观测绿色荧光蛋白的表达;Western blot检测CREG蛋白的表达。结果：成功构建pα—MHC—CREG-EGFP-N1质粒,酶切及测序结果正确;成功转染入原代培养小鼠心肌细胞,在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白的表达,Westem blot检测到CREG蛋白的表达。结论：重组质粒pα-MHC—CREG—EGFP-N1体外转染入原代培养小鼠心肌细胞后,目的基因能够在心肌细胞中有效表达,检测方法简便可靠,为下一步建立心肌细胞特异性表达CREG的过表达转基因小鼠、深入探讨CREG在心肌疾病发生中的生物学功能研究奠定了基础。     

连栽措施对桉树人工林结构及持水性能的影响

以海南岛4代连栽桉树人工林为研究对象,对比分析了不同连栽措施间,桉树人工林的结构、组成及其林下凋落物和土壤持水性的变化规律,探讨了桉树连栽措施对林地生态系统结构和水文调节功能的影响.结果表明,在桉树林生长特征上,第4代比第1代桉树林在胸径、树高和生物量上分别降低了43.4%、33.7%和42.7%;在生物多样性方面,桉树林下植物种类的数量随着连栽代次增加而呈下降趋势(p<0.05);在凋落物持水性能上,第1代桉树林下凋落物蓄积量和最大持水量最大,要比第4代高30.0%以上,但是最大持水率在不同连栽代次间差异不显著(p>0.05);在土壤持水特征上,随连栽代次增加,桉树林下土壤容重提高,而孔隙度、渗透速率以及持水量明显降低,其中1代桉树和3、4代间存在显著差异(p<0.05).连栽措施明显改变了桉树人工林群落结构特征及其持水功能.     

川崎病患儿并发冠状动脉损伤的危险因素及风险预测指标模型的评价与构建

摘要 目的：分析川崎病（KD）患儿并发冠状动脉损伤（CALs）的危险因素,并评价风险预测指标构建的模型价值。方法：选取2019年1月～2022年5月我院收治的100例KD患儿,根据是否合并CALs分为CALs组33例和非CALs组67例。采用单因素和多因素Logistic回归分析KD患儿并发CALs的影响因素。以多因素Logistic回归所保留的变量构建KD患儿并发CALs的预测模型。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析构建的预测模型对KD患儿并发CALs的预测价值。结果：CALs组发热持续时间≥10 d、丙种球蛋白（IVIG）治疗延迟、IVIG无反应比例、中性粒细胞计数、红细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、N端脑利钠肽前体（NT-proBNP）、肌酸激酶MB（CK-MB）水平高于非CALs组（均P＜0.05）。多因素Logistic回归分析分析显示,发热持续时间≥10 d、IVIG治疗延迟、IVIG无反应、ESR、CRP、PCT、NT-proBNP、CK-MB为KD患儿并发CALs的危险因素（均P＜0.05）。以上述指标所构建KD患儿并发CALs的联合预测模型评估效能较高,其ROC-AUC（0.95CI）为0.891（0.813～0.950）。结论：发热持续时间、IVIG治疗延迟、IVIG无反应和ESR、CRP、PCT、NT-proBNP、CK-MB升高是KD患儿并发CALs的危险因素,根据风险预测指标构建的预测模型对KD患儿并发CALs的预测能效较好。     

ROS和丁内酯-Ⅰ抑制山羊卵母细胞的减数分裂

本文研究了ROS（Roscovitine）和丁内酯-Ⅰ（ButyrolactoneⅠ,BL-Ⅰ）两种细胞周期依赖性激酶抑制剂对山羊卵母细胞减数分裂恢复的抑制作用,并研究了抑制对卵母细胞成熟、激活和发育的影响。结果表明：ROS和BL-Ⅰ对山羊卵母细胞减数分裂恢复的抑制作用具有浓度依赖性;200μmol／LROS、100μmol／LBL-Ⅰ、100μmol／LROS＋6．25μmol／LBL-Ⅰ和50μmol／LROS＋25μmol／LBL-Ⅰ都能有效抑制山羊卵母细胞减数分裂的恢复,24h的抑制率分别为78．4％、80．9％、80．3％和77．8％。用ROS和BL-Ⅰ抑制24h后转为正常培养24h,各处理组卵母细胞的成熟率（分别为81．3％、81．9％、83．2％和85．2％）与对照组（83．0％）无显著差异;成熟卵母细胞的化学激活率分别为93．3％、96．2％、92．5％和90．5％,与对照组（97．8％）无显著差异。然而,抑制处理后卵母细胞的卵裂率和桑椹胚率降低,未能发育到囊胚。ROS和BL-Ⅰ抑制山羊卵丘扩展,并且转为正常培养后卵丘不能再扩展。ROS和BL-Ⅰ能够浓度依赖性地抑制山羊卵母细胞减数分裂,二者既可单独,又可降低浓度联合使用,但抑制山羊卵母细胞的浓度远高于牛和猪卵母细胞的;ROS和BL-Ⅰ抑制24h不影响山羊卵母细胞的成熟和激活能力,但影响卵母细胞的卵丘扩展和胚胎发育能力。因此,山羊卵母细胞减数分裂调控可能比它动物更精细。     

国内外生物信息学数据库服务新进展

生物信息学是生命科学中最活跃的领域之一. 各类生物信息学数据库在近年不断出现,其规模呈爆炸趋势增长,同时数据结构日趋复杂. 目前生物信息学数据库服务已实现了高度的计算机和网络化. 算法和软件的进步、数据库的一体化、服务器-客户模式的建立使之成为生物、医药、农业等学科的强有力工具. 在国内北京大学物理化学研究所于1996年建立了第一家生物信息学网络服务器. 现已为国内外科学家提供了7万余次服务,在国际上具有一定影响.     

综合手术救治方舱内采用不同栓塞材料救治脾破裂的对比研究

目的：探讨在战争或自然灾害等野战条件下,使用综合手术介入方舱,现场对脾脏实施快速微创介入栓塞的可行性及效果,对比分析综合手术救治方舱内采用不同栓塞材料介入救治脾破裂的适应症及有效性、安全性。方法：采用Seldinger技术,经股动脉插管至脾动脉,行数字减影血管造影术（DSA）,显示出血动脉,然后超选择插管至该动脉,经导管注入不同类型栓塞剂以栓塞出血动脉。术后观察不同栓塞剂成功封堵受损血管所用时间,封堵时造影剂用量,封堵效果。结果：手术均成功,止血效果确切,无严重并发症。术后观察2周动物无死亡。结论：综合手术救治方舱具有良好的机动性和较强的自然环境适应能力,灾难现场应用综合手术救治方舱开展血管损伤应急介入救治具有可行性。根据血管损伤的不同类型,恰当选择不同类型的栓塞剂,可以取得很好的疗效。     

利用GARP生态位模型预测日本松干蚧在中国的地理分布

采用GARP生态位模型预测分析了松属植物的重要入侵害虫日本松干蚧Matsucoccus matsumurae（Kuwana）在中国的潜在地理分布。对现有分布地点的分析表明：日本松干蚧在 我国的扩散蔓延有三个主要阶段, 即零散分布期、逐步扩散期和迅速蔓延期。全国范围内的预测显示：该虫可以在中国27个省、市、自治区生存,主要集中在东北和东部沿海地区;在全国 扩散的趋势是向内陆发展。对辽宁省和吉林省地进一步预测分析验证了该方法的准确性,其蔓 延趋势与全国的预测结果相一致;同时还确定了6个高度危险区和13个影响该虫扩散的关键区。     

青藏高原高寒草甸生态系统碳增汇潜力

为了揭示青藏高原高寒草甸生态系统植被变化对碳储量的影响,以原生矮嵩草草甸、退化草甸、人工草地以及农田为研究对象,对比分析了该4种不同土地格局下生态系统的有机碳现状.以原生矮嵩草草甸土壤碳储量为基准对不同类型高寒生态系统的碳增汇潜力进行了估算.结果表明:不同类型生态系统的碳储量和碳增汇潜力有很大差异,在0-40cm土层中,(1)原生草甸碳储量最高,达到17098 g C/m2,退化草甸、人工草地和农田的有机碳汇增加潜力分别为:5637、3823、1567 g C/m2.(2)对于退化草甸和人工草地,土壤有机碳含量和密度明显低于原生草甸和农田.(3)地下生物量碳储量主要集中在0-20cm,且原生草甸地下生物量的碳储量比其他3个植被类型高3.6-5倍.总体上,青藏高原草地生态系统存在巨大的碳增汇潜力.     

螺内酯对充血性心衰患者心功能和血浆脑钠肽的影响

目的:观察螺内酯治疗充血性心力衰竭患者前后心功能和脑钠肽的变化及临床意义.方法:选取2008-2010年沈阳军区总医院心内科门诊的充血性心力衰竭患者70例,随机分为螺内酯治疗组和对照组,对照组采用常规内科治疗.螺内酯治疗组在常规内科治疗的基础上加用螺内酯治疗.结果:两组治疗前左室收缩末期容积(LVESV),左心室射血分数(LVEF),血浆BNP水平比较无差异(P＞0.05),治疗后两组LVESV,血浆BNP明显下降,LVEF水平明显升高(P＜0.05).螺内酯治疗组临床疗效高于对照组(P＜0.05).结论:螺内酯可以改善充血性心力衰竭患者的心脏功能.     

对剖宫产产妇进行针对性心理护理的效果分析

剖宫产是切开产妇的腹壁及子宫壁取出胎儿及附属物的方法。近年来,剖宫产率在不断上升,围产儿死亡率明显降低。但剖宫产的术并发症多,威胁母婴的生命安全,对产妇身心均有不同程度的损伤,从而影响母婴交流和对新生儿的护理喂养。