三种小型猪线粒体DNA控制区的比较研究

目的分析五指山小型猪、巴马小型猪和贵州香猪线粒体DNA控制区碱基序列,比较研究不同猪种的遗传标志。方法应用PCR技术分别对这三种小型猪的血液总DNA样品中线粒体DNA D-loop区进行扩增,测序比对。结果猪的线粒体DNA D-loop区分三个区域。I区（靠近5’端区域）704bp,五指山小型猪在此区共有6个变异位点,通过6个变异位点中归纳出3个单倍体,而巴马小型猪在此区有9个变异位点,通过9个变异位点归纳出4个单倍体,贵州香猪在此区共有6个变异位点,通过6个变异位点归纳出3个单倍体。Ⅱ区（串联重复序列区）,五指山小型猪、巴马小型猪和贵州香猪序列相同。Ⅲ区（靠近3’端区域）三种小型猪的序列几乎相同。结论五指山小型猪、巴马小型猪和贵州香猪三种小型猪之间线粒体DNA碱基序列变异位点较少,五指山小型猪和巴马小型猪亲缘关系较近。     

台湾海峡鱼类绦虫的分子系统学研究

利用DNA测序技术对台湾海峡部分鱼类绦虫的16S rRNA和18S rRNA基因片段序列进行了分析。使用PAUP4·0b10软件构建的进化树显示,目前关于绦虫二叶目、锥吻目、假叶目、盘头目和四叶目的划分是比较合理的,绦虫进化基本遵循了头节形态从简单到复杂的进化规律。报道了国内首次发现的双叶目绦虫,进化树结果初步支持了巨槽属和棘头属的划分。此外,结果也支持了前孔属绦虫的分类地位。但是,对耳槽属绦虫与阶室属绦虫的形态学划分与分子系统学相矛盾,利用16S rRNA基因对盘头目各种的进化树分析与形态学差异很大,这些问题都需要更多研究来进行深入分析。     

体重和温度对黄鳝最大摄食率的影响

室内研究了体重和温度对黄鳝最大摄食率的影响。在水温相同（20℃）的条件下,随着体重的增加（4.77－144.65 g）,黄鳝最大摄食量增加,但最大摄食率呈下降的趋势,两者与体重的相关关系分别为Cmax（g/d•per fish）＝5.86×10－2W0.46和RLmax（J/g•d）＝611.74W-0.54。初始体重（13－21g）对黄鳝最大摄食率没有显著影响（p>0.05）,水温（11－38℃）对黄鳝最大摄食率的影响非常明显（p<0.01）,最大摄食率和水温的回归方程为：RLmax（J/g•d）＝418.56－80.78t＋4.73t2－0.074t3。黄鳝的最佳食欲温度为30.8℃,此时最大摄食率为255.46J/g•d。试验发现,南京地区的黄鳝最低摄食温度为8℃。采用方程RLmax（J/g•d）＝（1526.49－294.60t＋17.25t2－0.27t3）W-0.54能够预测黄鳝在不同体重和不同温度条件下的最大摄食率。     

结构域Ⅰ缺失的丙型肝炎病毒5'NCR调控荧光素酶基因的表达

目的:分析丙型肝炎病毒(HCV)5'端非编码区(NCR)的结构域Ⅰ序列在其翻译启动活性中的作用.方法:以质粒pCMVNCRluc为模板,PCR扩增分别得到缺失5'端20nt和43nt的HCV 5'NCR片段,并分别替换pCMVNCRluc中的完整HCV 5NCR,构建结构域Ⅰ缺失的HCV 5'NCR调控萤火虫荧光素酶(luc)基因表达的真核表达质粒(pCNl-d1、pCNl-d2).以脂质体方法转染人肝癌细胞株HepG2,用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶相对于内参考的海肾荧光素酶表达活性,同时采用RT-PCR方法检测转染后细胞中萤火虫荧光素酶基因的相对表达水平.结果:酶切和测序结果表明,各重组质粒构建成功.各重组质粒转染细胞后luc mRNA的相对表达水平与pCMVNCRluc相比差异无显著性(P＞0.05);pCNl-d1、pCNl-d2表达的荧光素酶活性与pCMVNCRluc差异无显著性(P＞0.05).结论:HCV 5NCR的5'端20nt和43nt序列缺失不影响它的翻译启动活性.     

一株鹅源H5N2亚型高致病性禽流感病毒的分离鉴定及生物学特性分析

分离到一株鹅源 H5N2亚型高致病性禽流感病毒,SPF鸡静脉接种致病指数为2.99,但鸭子对该病毒不敏感．病毒感染小鼠后不致病,但能够在肺内有效复制,表明其具有感染哺乳动物的潜在风险．血凝素(hemagglutinin, HA)蛋白裂解位点上插入有多个连续的碱性氨基酸(-RRRKKR-),从分子上证实这是一株高致病性禽流感病毒．核酸序列比较分析表明,分离的流感病毒HA基因与A/chicken/Hubei/489/2004 (H5N1)同源率达到99.4%,神经氨酸酶(neuraminidase, NA)基因与A/chicken/Jilin/53/01(H9N2)同源率达到99.8%;氨基酸水平上,HA与2004年分离到的A/chicken/Hubei/489/2004(H5N1)、A/swan/Guangxi/307/2004(H5N1)、A/wildduck/Guangdong/314/　2004(H5N1)和A/chicken/Henan/210/2004(H5N1)同源率均为99.3%,NA 与A/chicken/Jilin/53/01(H9N2)同源率为99.6%．进化树分析结果表明,该流感病毒分离株可能是由H5N1和H9N2两个亚型病毒重排而来．     

二甲双胍联合门冬胰岛素对妊娠期糖尿病患者血清胆固醇、总胆红素、尿酸和尿微量蛋白水平及母婴结局的影响

目的:探讨二甲双胍联合门冬胰岛素对妊娠期糖尿病患者血清胆固醇(TC)、总胆红素(TBil)、尿酸(UA)、尿微量蛋白(mAlb)水平及母婴结局的影响。方法:选择2014年6月至2016年6月我院接诊的84例妊娠期糖尿病患者,通过随机数表法分为观察组(n=42)和对照组(n=42)。在常规治疗基础上,对照组使用门冬胰岛素治疗,观察组再联合盐酸二甲双胍。比较两组治疗前后血糖指标、TC、TBil、UA、m Alb的变化以及母婴结局。结果:治疗后,观察组空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、TC、UA、m Alb水平均显著低于对照组(P0.05),TBil水平明显高于对照组(P0.05),妊娠期高血压、羊水过多、早产、剖宫产、巨大儿、新生儿黄疸的发生率均显著低于对照组(P0.05)。结论:二甲双胍联合门冬胰岛素对妊娠期糖尿病患者的疗效显著,可有效改善患者血糖指标以及TC、TBil、UA、m Alb水平,改善母婴结局。     

根际益生菌链霉菌S506固体发酵条件优化

链霉菌S506是一株具有广谱防病、促生和降解根系毒素功能的根际益生菌.采用液固两相发酵工艺,以活菌总数和分生孢子产生量为检测指标,研究了S506活菌制剂固体发酵物料的配方和工艺参数.获得固体发酵物料的最佳参数为:麸皮100 g、M-115g、磷酸氢二钾0.3 g、氯化钠0.25 g、硝酸钾0.1 g、碳酸钙0.8 g,自然pH值,液体菌种种龄84 h,接种量10%,发酵温度30℃,料水比10:6,发酵时间60 h.在最佳发酵条件下,S506固体菌剂的活菌总量达到8.27×109CFU/g,分生孢子数达到6.23×109CFU/g.     

亚低温条件下防控番茄南方根结线虫生防菌株的筛选与鉴定

【目的】筛选亚低温条件下抗线虫和促进植物生长发育的菌株。【方法】采用线虫击倒率测定、室内耐低温测定、拮抗测试和盆栽生物测定相结合的方法进行功能菌株的筛选;采用表型特征、生理生化特征、16S r RNA基因序列测定相结合的多相分类技术对筛选的菌株进行鉴定。【结果】从根结线虫多发的设施黄瓜和番茄病土中分离出细菌和放线菌297株;经对根结线虫击倒率的初步筛选,得到校正击倒率大于70%的活性菌株9株;通过复筛获得1株在亚低温条件下同时具有防线虫、防土传病原菌病、促生特性的生防菌株S205;菌株S205被鉴定为抗生素链霉菌(Streptomyces antibioticus)。【结论】获得一株在亚低温条件下同时具有抗线虫活性和促进植物生长发育的生防菌株S205,该研究对解决亚低温条件下根结线虫的防治具有重要意义。     

多功能链霉菌生物肥对老龄梨树长势和根际与内生可培养细菌的影响

2010-2012年连续3年在河北赵县老梨区25年以上树龄梨树上进行以多功能链霉菌TOR3209为核心的生物有机肥的应用试验。结果表明, TOR3209生物有机肥能显著恢复老梨树的长势,表现为再生根和毛细根数量显著增多;叶片厚度和叶片生物量明显提高、颜色由黄转绿,叶绿素含量提高14.6%;果实品质显著改善,可溶固形物含量提高6.3%,硬度提高10.8%;根际土壤和根系内生可培养细菌多样性显著提高。表明多功能生物有机肥通过根际生态的修复改善老龄梨树的长势,在老果园改良方面具有广阔应用前景。