环氧合酶-2在胃癌中的研究进展

我国胃癌发病人数居全球首位,其发生机制及安全有效的治疗是研究重点。大量研究结果表明,环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)过度表达促进肿瘤细胞增殖和抑制细胞凋亡,并与胃癌的发生发展、淋巴转移、分化程度、病理分期及预后密切相关。随着COX-2与胃癌关系的研究的深入,COX-2已逐渐成为胃癌治疗的新的靶点。近年来,针对细胞受体、信号传导、细胞周期和血管生成等靶点的抗肿瘤治疗已成为肿瘤治疗研究的新方向。因此,以COX-2为特异靶点的治疗策略有望为胃癌治疗提供新的思路。     

EMA3C/SEMA3D基因错义突变对蛋白稳定性和受体亲合力的影响

目的：明确先天性巨结肠患者携带的5 个基因错义突变对Semaphorin 3（Sema3）蛋白自身稳定性和受 体亲合力的影响作用。方法：构建Sema3-Neuropilin-Plexin 配体-受体复合物蛋白质模型,对全部5个错义突变进行定位,通过计 算标准能量功能赋值（驻驻G）和复合物界面值（驻I_sc）预测突变对Sema3 的影响作用。将野生型和突变型AP-tagged Sema3 质粒分 别转染HEK293T 细胞,72 h后收集含有融合蛋白的细胞培养液上清并与分别表达Neuropilin 1（Nrp-1）或Neuropilin 2（Nrp-2）的 COS-7 细胞孵育,洗脱未结合的蛋白后加入碱性磷酸酶底物显色拍片,或提取细胞总蛋白,利用融合蛋白N- 末端含有的碱性磷 酸酶在底物PNPP 存在时可以发生颜色变化的特性,对与受体结合的野生型和突变型AP-Sema3 蛋白进行定量。结果：5 个错义突 变中的4 个都会不同程度地影响相应Semaphorin 3蛋白与其受体Neuropilin 的结合（与Nrp-1 的结合：SEMA3C S329G,V337M, SEMA3D H424Q,V457I,P615T 分别与野生型相比：1.12± 0.15,0.37± 0.03,0.56± 0.07,0.51± 0.05,0.66± 0.05;与Nrp-2 的结合： SEMA3C S329G,V337M,SEMA3D H424Q,V457I,P615T 分别与野生型相比：1.18 ± 0.09,0.37 ± 0.03,0.76 ± 0.01,0.65 ± 0.06,0.85± 0.03,n=3,单因素方差分析,差异有统计学意义),说明它们可能通过严重影响分子通路的信号转导而妨碍蛋白功能的 正常行使。结论：先天性巨结肠患者携带的基因错义突变可不同程度影响蛋白与其受体的结合,提示 Semaphorin 3这类经典的神经元轴突导向因子在功能失常的情况下可能参与先天性巨结肠的发生。     

真双子叶基部类群十种植物的CHS基因家族成员分析

用PCR方法从目前极少被报道的真双子叶基部类群10种植物的总DNA中扩增出CHS基因外显子2的部分序列进行分析,经克隆后测序,共得到26个不同的片段。分析表明,所有序列具有较高的同源性（〉70％）,每种植物有2—4个不同的拷贝,在金鱼藻中发现有一个拷贝（CedeCHS3）含有一段长29个碱基的缺失,可能已失去了该基因的功能,而来自银桦的GrroCHS8拷贝具有较多活性位点的变异,可能具有了新的功能。在对碱基含量的分析中表明,只有来自雀舌黄杨的序列有一定的GC偏好,特别是第三位的GC含量达70％以上。用贝叶斯法、最大简约法和邻接法构建的CHS基因的分子系统树均由3个主要分支构成,其中一个分支由来自金鱼藻的4个序列聚在一起构成了subfamilyⅡ,来自昆栏树的2个序列聚在一起网接于subfamilyⅢ中;来自独叶草的3个序列分散于同一亚家族（subfamilyⅠ）的不同分支中;而多数种的序列分散在相距较远的两个分支中,构成了两个主要的亚家族subfamilyⅠ、subfamilyⅢ。从所建分子系统树看真双子叶基部类群植物的CHS基因家族成员来源于该类群形成前的两个祖先拷贝,在不同植物这两个祖先拷贝经历了不同的进化过程,这些进化上的差异可能与不同植物的生活习性及生存环境的多样性相关。     

西藏小型猪细胞色素b基因序列的比较

目的对西藏小型猪Cyt b-基因序列进行分析,研究其遗传背景及其与国内家猪的亲缘关系。方法提取西藏小型猪和巴马小型猪、贵州香猪、五指山猪的全基因组DNA,设计引物扩增Cyt b基因,测序后进行碱基序列比对,建立亲缘关系树,分析西藏小型猪的遗传背景。结果西藏小型猪等国内部分品种猪的Cyt b基因序列与欧洲猪相比有14个变异位点;但是西藏小型猪与国内品种猪相比存在两个特殊碱基位点即在420位点T→C转换的同时在883位点存在G→A转换。结论西藏小型猪与巴马小型猪、贵州香猪、五指山猪等国内家猪有很近的亲缘关系。同时进一步证实西藏小型猪群体内存在一定的遗传分化。     

胃癌腹膜转移的细胞学及分子生物学检测进展

胃癌是常见的肿瘤之一,在消化道肿瘤中占首位。胃癌的临床病变缺乏特异性,大部分患者就诊时已发生了转移,多数病例就诊时已为进展期或晚期。腹膜转移是胃癌最常见的转移形式,胃癌的腹膜转移是造成患者预后差的主要原因,因此,及时地诊断腹膜转移,从而采取相应治疗,对提高患者术后生存率具有重要意义。     

黄鳝排粪活动的初步研究

室内研究了不同摄食方式下的黄鳝排粪活动以及摄食对黄鳝排粪量的影响.饥饿5d的黄鳝饱食2h,以后不再喂食,其排粪活动分5批完成,排粪时间为38-134h;饥饿5d的黄鳝按照0.5%体重投饵,则其排粪次数减少到2批,排粪时间为64-106h;1d饱食一次的黄鳝排粪活动分3批完成,排粪时间为28-92h;2d饱食一次的黄鳝排粪活动分4批完成,排粪时间为32-90h.换水和摄食极显著地刺激黄鳝排粪活动(p<0.01).每天的摄食量(X)和摄食后15h内的排粪量(Y)存在极显著的直线回归关系:Y=0.1502X 0.0017(p<0.01).这些研究结果将为人工养殖黄鳝的摄食管理和水质调控提供理论依据.     

高纬寒冷地区香椿保护地栽培技术研究

香椿树嫩芽是一种集营养价值和药用价值于一身的名贵木本蔬菜。通过对引进的6个香椿品种进行对比试验,选择出适宜在高纬寒冷地区保护地栽培的菜用型香椿品种——黑油椿,该品种椿芽生长快、产量高、品质优。并总结出香椿保护地栽培技术。     

三种蝮蛇抗栓酶对闭塞性血管疾病血流变学及血小板作用的比较

对蛇岛、浙江、长白山三种不同产地的蝮蛇抗栓酶（ＡｈｙｌｓａｎｔｉｎｆａｒｃｔａｓｅＥｎｚｙｍｅＡＥ）对闭塞性血管疾病患者血流变学变化影响及血小板作用的差异进行了比较。结果表明：三种ＡＥ均有较明显降低全血粘度、血浆粘度及血球压积的作用,而三种ＡＥ间的作用无显著性差异;降低血沉的作用以长白山ＡＥ较佳;祛纤作用以长白山ＡＥ及蛇岛ＡＥ为佳;三种ＡＥ均有明显的降低血小板作用。认为对血流变学及血小板的作用,长白山ＡＥ优于蛇岛ＡＥ,蛇岛ＡＥ优于浙江ＡＥ,而其中长白山ＡＥ的祛纤及蛇岛ＡＥ降低血小板作用最强     

H1亚型猪流感病毒HA基因DNA疫苗的构建及其对Balb/c小鼠的免疫效果评价

以A/Swine/Guangdong/LM/2004(H1N1)猪流感病毒HA基因为模板,通过RT-PCR技术扩增出HA基因,并将其克隆到pCI-neo真核表达载体中,成功构建重组表达质粒pCI-HA,瞬时转染vero E6和293T细胞,通过免疫过氧化物酶单层细胞试验(Immunoperoxidase monolayer assay ,IPMA)、间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay, iIFA)和蛋白免疫印迹（Western blot,WB）实验证明,HA基因能够在哺乳动物细胞中有效表达并具有良好的生物学活性。将重组质粒三次免疫8w雌性Balb/c小鼠后,ELISA试验和中和试验结果表明该重组质粒能够诱导小鼠产生较高的抗体滴度,并具有良好的中和活性。因此为H1亚型猪流感DNA疫苗的研究奠定了理论基础。