末端脱氧核苷酰转移酶——一个独特而应用广泛的酶

一、概况简介末端脱氧核苷酰转移酶最早是在两个不同实验室研究哺乳动物DNA多聚酶的过程中,同时发现的,后来经过分离纯化,为了区别于DNA多聚酶(复制性脱氧核苷酰转移酶replicative deoxynucleotidyltransferase)才定名为末端脱氧核苷酰转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,简称为TdT)也就是     

反胶束萃取血红蛋白的研究

研究了ＣＴＡＢ－正辛醇－正庚烷交束溶液萃取牛血红蛋白（ｐＨｂ）时、ｐＨ值、表面活性剂浓度、助表面活性剂浓度、离子种类和离子强度、溶剂比以及蛋白质浓度等因素对萃取效果的影响,并以蛋白质分子与表面活性剂分子间的相互作用以及反胶束大空间阻碍作用上进行了解释。研究表明,水相ＰＨ值在１０．５￣１２．５之间,ＫＣ１浓度为０．１ｍｏｌ／ｌ,反胶束溶液中表面活性剂浓度为０．０２ｍｏｌ／ｌ,正辛醇与正庚烷之比为０．     

干扰素诱导基因IFIT3对膀胱癌细胞生物学功能及化疗耐药性的影响

摘要 目的：探讨干扰素诱导基因IFIT3在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞生物学功能和化疗耐药性的影响。方法：本研究通过qRT-PCR或Western blot检测了30例膀胱移行细胞癌患者的肿瘤组织和配对正常癌旁组织标本以及人膀胱癌细胞系T24及人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1中IFIT3的表达水平。通过浓度递增法构建顺铂（DDP）耐药T24细胞（T24/DDP）,然后对细胞转染靶向IFIT3的siRNA（si-IFIT3）及阴性对照（si-NC）。将细胞分为4组,分别为T24-si-NC组、T24-si-IFIT3组、T24/DDP-si-NC组、T24/DDP-si-IFIT3组,通过MTT法检测细胞增殖,使用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡,使用Transwell法检测细胞侵袭能力。通过qRT-PCR或Western blot检测HSP90α（HSP90AA1）、MMP2、MMP9、Cleaved-caspase-3、Bcl-2和Bax的表达水平。结果：与配对癌旁组织和SV-HUC-1相比,膀胱癌组织和T24细胞中IFIT3的mRNA和蛋白表达水平显著升高（P<0.001）。与正常T24细胞相比,T24/DDP细胞中的IFIT3 mRNA和蛋白表达水平显著升高（P<0.001）。与T24/DDP-si-NC组相比,T24/DDP-si-IFIT3组的IC₅₀值和侵袭细胞数显著降低,而细胞凋亡率显著升高（P<0.05）。与T24/DDP-si-NC组相比,T24/DDP-si-IFIT3组的Bcl-2、MMP2和MMP9蛋白相对表达量显著降低,而Bax和Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量显著升高（P<0.05）。String数据库显示,IFIT3与HSP90AA1基因存在互作关系。与T24/DDP-si-NC组相比,T24/DDP-si-IFIT3组的HSP90α（HSP90AA1）表达水平显著降低（P<0.05）。结论：下调IFIT3的表达可抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭,并促进细胞凋亡,下调IFIT3可部分通过抑制HSP90α （HSP90AA1）的表达来降低膀胱癌细胞对顺铂的耐药性。     

MTNR1A基因对大白猪和长白猪产仔数的影响

根据MTNR1A基因在GenBank中的已知DNA序列设计了2对引物,采用PCR-SSCP技术在一个大白猪和长白猪群体中进行单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）检测,发现了一个SNP位点,并对其不同基因型个体PCR回收产物进行测序。测序结果发现该SNP是由于在+159碱基处（GenBank中序列）发生了G→A的同义突变而引起的。并对该SNP与产仔数进行了关联分析,结果表明该SNP对产仔数有影响。     

人类活动对青藏高原高寒矮嵩草草甸碳过程的影响

随着人类活动干扰(放牧)的增加,青藏高原高寒嵩草甸的退化演替过程依次为禾草-矮嵩草群落、矮嵩草群落、小嵩草群落和杂类草-黑土滩4个阶。其中小嵩草群落又可划分为草毡表层加厚、开裂与塌陷3个子阶段。采用时空转换的方法,研究了人类活动对青藏高原高寒矮嵩草草甸碳过程的影响。结果表明,随着人类干扰强度的增加,植物群落地上部分有机碳储量逐渐降低,由禾草-矮嵩草群落的(134.7±17.3)gC/m2逐渐降低到杂类草-黑土滩次生裸地(18.96±6.18)gC·m-2。土壤、植物地下部分有机碳贮量呈单峰曲线变化,草毡表层开裂子阶段最高,分别为(49.7±0.83)gC·kg-1和(3596.7±179.8)gC·m-2。;杂类草-黑土滩阶段最低,分别为(19.2±1.13)gC·kg-1和(121.6±6.1)gC·m-2。受植物地下部贮碳的影响,土壤-植被系统呈现逐渐降低的变化特征。随人类活动干扰的加强,高寒嵩草草地植物有机碳地下/地上分配比发生巨大改变,草地草毡表层厚度不高于4.3cm是保证草地生产与生态服功能双赢的重要指标。     

宣肺解痉清热方治疗青年热哮患者疗效及其预后影响因素分析

摘要 目的：探究宣肺解痉清热方治疗青年热哮患者疗效及其预后影响因素。方法：选择2019年10月~2021年9月本院收治的60例青年热哮患者为本次研究对象,依据不同治疗方法将其分为2组,观察组,n=30,对照组,n=30。对照组在吸氧、化痰等常规治疗基础上,依据其严重程度,开展布地奈德福莫特罗粉吸入剂治疗。观察组在对照组基础上,增加宣肺解痉清热方辅助治疗。比较组间治疗前后相关因子、成人哮喘生存质量评分表（AQLQ）、治疗效果,并依据患者预后效果,将其分为预后良好组（n=40）及预后不佳组（n=20）,对热哮患者预后予以单因素分析,并开展Logistic回归分析,判断影响预后的独立因素。结果：治疗前,观察组及对照组白细胞介素-4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）、FEV第1秒用力呼气容积/用力肺活量（FEV1/FVC）水平及AQLQ评分比较无差异（P＞0.05）,治疗后,与治疗前比较,IL-4水平均降低,且观察组水平更低,IFN-γ水平、FEV1/FVC水平及AQLQ评分均升高,且观察组水平更高（P＜0.05）;观察组治疗有效率较对照组高（P＜0.05）;青年热哮预后影响因素分析中,结果显示,病程、BMI、过敏性鼻炎、遗传因素、起病年龄、呼吸道感染次数、吸烟史、发作频率等因素均是影响热哮预后的单因素（P＜0.05）,依从性、皮肤湿疹、给药途径均未对热哮预后效果产生较大影响（P＞0.05）;将影响热哮预后的单因素予以赋值,纳入Logistic回归分析,以病程、BMI、过敏性鼻炎、遗传因素、起病年龄、呼吸道感染次数、吸烟史、发作频率为自变量,结果显示,病程、BMI、过敏性鼻炎、遗传因素、吸烟史、发作频率是影响热哮预后的独立因素（P＜0.05）。结论：宣肺解痉清热方可有效调节青年热哮患者机体炎症因子及肺功能,提高生活质量及治疗效果,依据热哮患者预后效果,病程、BMI、过敏性鼻炎、遗传因素、吸烟史、发作频率是影响热哮预后的独立因素,可予以针对性干预,以提升患者预后效果。     

花生根际微生物的分离及高效功能菌株筛选

【背景】花生根际分布着丰富的微生物类群,分离筛选多种功能的高效微生物是研发高效复合菌肥的基础。【目的】从花生根际土壤及根表分离微生物,分析可培养微生物的多样性,筛选高效解有机磷和无机磷、产吲哚乙酸(indole-3-acetic acid, IAA)和铁载体功能的菌株,为研发花生微生物菌肥打下基础。【方法】利用稀释涂布法,从采自山东省栖霞市、平度市、烟台市莱山区 3个样点的花生根际土、根表样品中分离微生物,基于16S rRNA基因序列对其进行系统发育分析,并通过初筛和复筛筛选高效解磷、产IAA和铁载体的菌株。【结果】共分离、纯化、保藏147株菌,其中75株分离自根际土壤,72株分离自根表样品。系统发育分析表明所有的菌分布于放线菌门(Actinomycetota)、芽孢杆菌门(Bacillota)、拟杆菌门(Bacteroidota)和假单胞菌门(Pseudomonadota)这4个门的40个属,优势属为链霉菌属(Streptomyces, 21.77%)、芽孢杆菌属(Bacillus, 16.33%);根表样品微生物的多样性高于根际样品;共筛选到解有机磷菌株62株,短波单胞菌(Brevundimonas) YTU21021解有机磷能力最强为1.12 mg/L;解无机磷菌株31株,不动杆菌(Acinetobacter) YTU21009解无机磷能力最强为7.04 mg/L;产IAA的菌株63株,肠杆菌(Enterobacter) YTU21054产IAA量最高,达184.19 mg/L;产铁载体细菌7株,伯克氏菌(Burkholderia) YTU21051产铁载体能力最强,A_s/A_r为0.90。【结论】花生根际和根表样品中可培养微生物多样性较为丰富,本研究筛选到的高效功能菌丰富了花生根际功能微生物资源,为后续与高效根瘤菌联合研发花生复合微生物菌肥奠定了基础。     

围封对不同退化程度荒漠草原植物群落和土壤的影响

围封是退化草原生态系统恢复的有效措施之一,已在中国北方草原地区实施多年并取得良好的效果。由于不同退化草原生态系统具有完全不同的植被和土壤条件,围封对不同退化草原植物群落和土壤的恢复是否具有一致的影响,目前仍不清楚。对内蒙古地区轻度、中度和重度退化荒漠草原分别设置6年围封后,对植物群落特征和土壤理化性质进行了调查和测定。研究结果发现,围封显著提高了3种退化荒漠草原短花针茅（Stipa breviflora）和无芒隐子草（Cleistogenes songorica）种群以及群落的高度、盖度和地上生物量（P<0.05）,表明围封从多组织层次使退化草原植物群落得到有效的恢复。围封总体提高了轻度和中度退化荒漠草原植物多样性,但降低重度退化荒漠草原的植物多样性。重度退化荒漠草原在围封后群落高度、盖度和地上生物量恢复效率显著高于轻度和中度退化的（P<0.05）,表明围封对重度退化荒漠草原植被恢复更加有效。除轻度退化外,围封显著降低中度和重度退化荒漠草原土壤全碳、全氮、全磷、有效氮和速效磷含量（P<0.05）,但对3种退化荒漠草原的土壤水分含量无显著影响,表明围封对不同退化荒漠草原土壤的影响具有滞后性。研究为荒漠草原围封成效评估提供理论指导和退化荒漠草原生态系统科学合理实施围封政策提供科学依据。     

细胞凋亡抑制家族蛋白在阿尔茨海默病动物模型中的表达及其初步作用机制研究

随着全球老龄化日益严重,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)作为神经退行性疾病的最常见类型,以进行性认知障碍为主要临床表现,以老年斑、神经纤维缠结和神经元及突触的凋亡缺失为主要病理特征.细胞凋亡抑制家族蛋白(inhibitor of apoptosis family protein,IAP)是一类内源性细胞凋亡抑制蛋白,它们在AD病理进程中的功能尚未十分明确.本研究从AD患者数据库、动物模型和诱导的脑片模型分析IAPs蛋白表达,并通过EMSA和免疫印迹实验初步探索了NFκB信号通路的活化.结果表明:存活蛋白(Survivin)在AD患者、小鼠模型以及Aβ、冈田酸和LPS诱导脑片中共同上调,同时NFκB通路被显著激活,两者变化趋势相似,可能通过NFκB-Survivin轴抵抗神经元凋亡. Survivin蛋白在AD中的进一步深入研究将成为AD治疗和预防的重要靶标.     

上海市常见养殖水产重金属残留与膳食风险评估

水产品是人类摄入重金属的重要来源之一。为检测上海市常见养殖水产品的重金属残留及其污染来源，并进行膳食风险评估，文章采用快速消解-电感耦合等离子体质谱法（inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS）测定水产品及其养殖环境中铅、镉、铬、汞、砷的含量；并使用单因子指数（single factor pollution index,Pi）、重金属污染指数（metal pollution index,MPI）、相关性分析和危害商数（hazard quotient,HQ）对水产品的金属残留现状、污染来源、膳食风险进行评估。结果表明，重金属污染程度依次为：蟹类>虾类>鱼类、青鱼>鲢鱼>鳙鱼>草鱼、底泥>饲料>养殖水。Pi结果显示，虽然饲料中的Cr、Pb、Cd超出了限量标准，但所有样品的污染均不明显。相关性分析结果显示，水产与饲料中Cr含量之间存在明显的相关性，与其他4种重金属不具相关性。膳食风险评估结果显示，水产品中5种重金属的HQ值均小于1，因此可认为摄入鱼类、甲壳类水产品不会给暴露人群带来明显的健...