干扰素a-2b的聚乙二醇修饰

采用分子量为20 kD的单甲氧基聚乙二醇丙醛(mPEG-ALD)修饰重组人干扰素a-2b(IFN a-2b), 建立了修饰反应及分离纯化工艺。考察了修饰反应各因素对单修饰转化率以及单修饰产物体外活性的影响, 获得了优化的修饰反应条件, 即在pH 6.5, 20 mmol/L的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液中, 干扰素a-2b的浓度为4 mg/mL, PEG与IFN a-2b的摩尔比为8:1, 4oC时反应20 h; 在优化的反应条件下, 单修饰PEG-IFN a-2b的转化率达到55%。并且, 采用离子交换层析对修饰产物进行分离纯化, 单修饰产品纯度达到97%, 体外活性保留达到未修饰干扰素a-2b的13.4%, 其在SD大鼠体内的循环半衰期得到了较大的延长, 且具有较好的水溶液稳定性。     

中药降脂方与阿托伐他汀代谢性相互作用的体外研究

目的：本研究旨在评估降脂中药复方2（Fang-2）及其6个饮片（虎杖、泽泻、甘草、苍术、厚朴和夏枯草）的水提物对肝脏细胞色素CYP3A4的抑制作用,及对阿托伐他汀的代谢性药物相互作用。方法：（1）应用中药标准化制备技术,制备降脂中药复方2及其6个饮片的水提物;采用超速离心法制备肝微粒体。（2）评价降脂中药复方2及其饮片对CYP3A4抑制作用。（3）评价降脂中药复方2及其饮片的水提物对阿托伐他汀的代谢的影响。结果：（1）体外实验的结果提示复方2的水提物显著地抑制了微粒体CYP3A4的活性,其IC50值为9．884mg／mL。虎杖水提物对微粒体CYP3A4的活性具有显著的抑制作用,其IC50值为0．5491mg／mL。（2）阿托伐他汀是首过代谢CYP3A4的底物,在肝脏微粒体中大于70％的母体被代谢,其体外清除率Clint和半数清除时间分别为41．10mL／mg／min和60．43分钟。降脂中药复方2水提物与肝微粒体孵育后,阿托伐他汀的首过代谢显著减慢。降脂中药复方2及其6个饮片水提取物对CYP3A4的抑制强度与避免阿托伐他汀首过代谢的潜力成正比。结论：本文首次应用体外方法研究了在临床上共同使用与PCI术后的阿托伐他汀和降脂中药复方2之间的代谢性相互作用,揭示了后者及其饮片通过抑制CYP3A4改善了前者的强烈的首过代谢,从而可能优化临床治疗方案。     

Bacillus sp. fmbJ224发酵产新型抗菌肽培养基的优化研究

采用Plackett-Burman设计(Plackett_Burman Design,PB) 法,对影响Bacillussp.fmbJ224产新型抗菌肽的17个因素进行了筛选。结果表明：影响该菌发酵产新型抗菌肽的主要培养基成分为葡萄糖、NH₄NO₃、谷氨酸、CaCl₂、MnSO₄。在此基础上,再采用响应曲面法(Response Surface Methodology RSM)对其5个显著因子的最佳水平范围进行研究。通过对二次多项回归方程求解得知,在上述自变量分别为葡萄糖8.13g/L、NH₄NO₃6.14g/L、谷氨酸4.2g/L、CaCl₂ 3.98mg/L、MnSO₄4.87mg/L时,新型抗菌肽的产量从1304.21μg/mL提高到了1487.58μg/mL。     

植物防御素PD5基因在毕赤酵母中的分泌表达*

将植物防御素PD5基因克隆到载体pPIC9的XholI和EcoRI位点之间,得到重组载体pPIC9/PD5。pPIC9/PDF5经BglII线性化,电转化法转入Pichia pastorisGS115,MD和MM平板筛选表型为His⁺Mut^s的转化子,PCR鉴定阳性转化子。转化子D24用BMGY培养至OD₆₀₀为6.0时,经BMM诱导,上清液用Tricien-SDS-PA     

千岛湖岛屿小型兽类群落分布格局及其影响因素

2007年秋季和2008年春季,采用夹夜法对千岛湖14个岛屿进行小型兽类群落组成调查,研究其群落空间分布格局及其影响因素。两季度共布置夹16 800只,捕获小型兽类1 037只,隶属2目2科7属11种。其中啮齿目（Rodenria）鼠科（Muridae）9种,食虫目（Insectivora）鼩鼱科（Soricdae）2种。结果显示：千岛湖小型兽类群落呈非随机分布格局;嵌套分析表明,千岛湖岛屿小型兽类群落呈现极显著嵌套格局,植物丰富度和生境专属性两项参数对其嵌套格局的形成具有显著影响,从而使适应力强的物种能够在多样的环境中生存,而适应力弱的物种则局限在特定的环境中。由于取样强度差异会过高地估计嵌套程度,故在研究中应尽量去除取样强度的干扰。     

闭鞘姜根中的甾体皂甙

从闭鞘姜「Ｃｏｓｔｕｓ ｓｐｅｃｉｏｓｕｓ（Ｋｏｅｎｉｇ）Ｓｍｉｔｈ」根茎中分离出五个化合物。经波谱解析和化学降解,证明其化学结构分别为胡萝卜甙（Ａ）：薯芋皂甙元３－Ｏ－ａ－Ｌ鼠李吡喃糖基（１－２）－β－Ｄ－葡萄吡喃糖甙（Ｂ）;薯芋皂甙元３－Ｏ－ａ－Ｌ－鼠李吡喃糖基（１－２）「ａ－Ｌ－鼠李吡喃糖基（１－４）」β－Ｄ葡萄吡喃糖甙（Ｃ）;薯芋皂甙元－３－Ｏ－ａ－Ｌ－鼠李吡喃糖基（１－２）「β－Ｄ－葡萄     

云南兔耳草的化学成分研究

从云南兔耳草 (LagotisyunnanesisW .W .Smith)的乙醇提取物中分离得到 8个化合物 ,经波谱分析确定其结构分别为 :柯伊利素 (chrysoeriol 1) ,芹菜素 (apigenin 2 ) ,茴香酸 (anisicacid 3) ,β 谷甾醇 (β sitosterol4) ,肉桂酸 (cinnamicacid 5 ) 3,4 二甲氧基肉桂酸 (3 ,4 dimethoxycinnamicacid 6 ) ,香草醛(vanillin 7) ,胡萝卜苷 (daucosterol8)。以上化合物均为首次从该植物中分离得到。     

社鼠和褐家鼠的能量代谢及消化道形态的比较

比较研究了社鼠和褐家鼠的摄入能、消化率、同化率以及消化道长度和重量的差异。结果表明,在饲养条件下,社鼠每天摄入能为1069．43kJ·（kg0.75）－1,高于褐家鼠（708．55kJ·（kg0.75）-1）,社鼠对花生的消化率（95．38％）较褐家鼠（91．74％）为高,但两种动物对大米的消化率和同化率较为接近。社鼠消化道各器官（除小肠）的长度和重量皆明显高于褐家鼠。具有较大的消化道和较高的消化率是社鼠对野外较差食物条件的适应对策。     

羊抗人IgG的纯化及其在抗—HCV检测中的应用

单独或联合应用辛酸沉淀、饱和硫酸铵沉淀、阴离子交换等方法对羊抗人IgG进行纯化,对纯化前后抗体的纯度和免疫学活性进行比较,并与辣根过氧化物酶连接,作为二抗用于抗－HCV的ELISA检测。结果表明,不同方法纯化的抗体其纯度和免疫学活性具有一定程度的差别,其中经辛酸＋饱和硫酸铵沉淀纯化的抗体为最佳,凝胶扫描纯度为98．05％,比活性近1800,为纯化前的6．8倍。用痞根过氧化物酶标记后,作为酶标二抗检测HCV阴性和阳性标准血清各40份,阴性符合率为97．5％,阳性符合率为95％,可用于抗－HCV的ELISA检测。     

猪生长激素基因在杆状病毒载体系统中的表达

通过对猪生长激素(pGH)基因的cDNA进行测序,得到pGH cDNA的全序列,并与Seeburg等报道的序列进行了比较和讨论.然后利用具人工合成启动子和多角体蛋白XIV启动子的转移载体质粒pSXIVVI+X3/4构建出含pGH基因的重组质粒pX3/4-pGH.将pX3/4-pGH与致死缺失型线性化AcMNPV-OCC- DNA共转染Sf9细胞,构建出既能形成多角体又能表达pGH基因的苜蓿丫纹夜蛾核多角体重组病毒AcMNPV-pX3/4-pGH-OCC+.感染重组毒株的Hi 5细胞可溶蛋白及其培养上清的SDS-PAGE和Western blot的分析结果表明,感染细胞的蛋白电泳带的20.7 kDa处有一条猪生长激素特异带,但培养上清中没有.凝胶黑度扫描估测结果显示pGH蛋白占细胞可溶蛋白的4.48%.