吸附法提取分离水杉总黄酮的研究

研究了我国重要经济植物水杉总黄酮的提取工艺,实验证明用70％的乙醇渗漉提取水杉总黄酮的工艺是经济实用的。正交实验显示用吸附法分离水杉总黄酮的影响因素依次为吸附剂选择,洗脱剂乙醇浓度,吸附剂用量及洗脱剂乙醇用量。将D140树脂用于水杉总黄酮的分离,具有收率高、操作简单、成本低、环境污染小等优点,适用于工业化生产。     

国内外从海洋微生物-开发新型药物的研究概况

本文根据国内外文献资料报道,综述了海洋微生物所产生的活性物质的特性及其药用价值,并阐述了国内外目前对海洋微生物资源的研究开发和发展展望。     

芜菁花叶病毒粒体及寄主细胞内内含体的超薄切片电镜观察

从沈阳地区分离到侵染大白菜(Brassicapekinensis)及萝卜(Raphanussativus)的芜菁花叶病毒(TurnipMosaicVirus,TuMV)纯化繁殖于大白菜(小白口)及萝卜(长白品种)上。经约25天采收纯化繁殖的毒原材料,进行病毒粗提纯,并做病毒粒子的电镜观察。看到病毒粒体较为疏散清晰,丝状,长度多分布在720nm之间。另将接种TuMV的感病寄主有关部位,切成小块经固定、系列脱水、环氮树脂包埋后,制作超薄切片并用电镜观察,看到病叶、病茎和病根韧皮部细胞内,均有清晰的风轮状、环状及带状的内含体,这是马铃薯Y病毒组(Potyvirus)成员特征之一。     

甲型流行性感冒病毒自然温度敏感株基因损害定位

采用重组试验和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,把晚期甲3型流感病毒自然ts突变株齐防79-39的ts损害定位在膜蛋白(M)基因上。但互补试验表明,齐防79-39与M基因损害的WSN标准株ts51可以发生互补,这是基因内互补的一个证据。PAGE技术证实,新甲1型流感病毒自然ts株津防77-78的M基因上确有损害。互补试验证明齐防79-39属于一个互补组,而津防77-78与ts51同属于另一个互补组。 本文结果还表明,晚期甲3型齐防79-39的ts损害基因可能是由甲3型野毒株自发突变所产生,而并非通过在自然界与新甲1型重组而获得。     

适应性进化与甜菜碱的添加促进安丝菌素的生产

【背景】安丝菌素是一类由珍贵束丝放线菌橙色亚种(Actinosynnema pretiosum ssp. auranticu)生产的美登素类衍生抗生素,属于大环内酰胺类物质,根据不同的C-3位基团可以分为一系列衍生物。目前已上市的高效抗癌药物曲妥珠单抗(T-DM1)以AP-3 (Ansamitocin P-3)为生产底物,并表现出很好的乳腺癌治疗效果。然而当前AP-3的产量较低,其过高的成本限制了进一步发展。【目的】应用适应性进化及添加适量甜菜碱策略提高安丝菌素AP-3的产量。【方法】以珍贵束丝放线菌橙色亚种为出发菌株,链霉素和巴龙霉素为胁迫压力进行适应性进化,筛选出安丝菌素积累较高的菌株,随后向进化菌株的发酵培养基中添加0.1%的甜菜碱,AP-3的产量进一步提高,同时分析了进化菌株AP-3相关基因的转录水平,初步探索进化菌株安丝菌素积累提高的原因。【结果】得到2株进化菌株Str16-4-4和Par16-2-1,发酵7d后AP-3产量分别提高了33.4%和31.7%,添加甜菜碱后其AP-3产量相比出发菌株提高了54.6%和47.4%。【结论】通过适应性进化的策略获得了AP-3生产能力提高的珍贵束丝放线菌橙色亚种进化菌株,对促进AP-3的生产提供了新思路,而且为适应性进化策略提高目标产物的产量提供了新的例证。     

饲喂四环素和链霉素对贡嘎蝠蛾幼虫生长和肠道消化酶的影响

以抗生素(四环素和链霉素)处理的食物饲喂贡嘎蝠蛾Hepjalus gonggaensis Fu & Huang,sd.nov.4龄幼虫1个月后,肠道主要消化酶的种类和酶活都发生了显著变化。经测定知,淀粉酶和蛋白酶是4龄幼虫主要的消化酶,其次为海藻糖酶、麦芽糖酶和纤维素酶。经抗生素处理的食物饲喂后,与正常对照相比,抗生素处理的幼虫体重增长百分比显著降低(P<0.01),所测的消化酶酶活比对照也显著降低(P<0.01)。另外,肠道内原有的半纤维素酶和纤维素酶在抗生素处理后没有检测出酶活。据此认为,抗生素可能对幼虫生长有毒害作用。其原因可能是抗生素长期使用导致肠道菌群紊乱,消化生理发生改变,从而导致一些消化酶活性下降甚至完全失去活性。     

w-转氨酶分子改造研究进展

ω-转氨酶能催化羰基化合物发生不对称还原胺化反应,在制备手性胺类化合物方面具有较好的应用前景。由于底物结合区域特殊的空间结构,野生型ω-转氨酶在合成大位阻手性胺方面的应用受到了限制。此外,在立体选择性和稳定性方面这一类酶也存在一些不足,目前满足工业应用需求的ω-转氨酶仍较为有限。文中首先介绍了ω-转氨酶的结构特征和催化机制,并探讨S型和R型酶在结构特征方面的主要差异。然后对ω-转氨酶的分子改造研究进行了综述,重点阐述了基于结构特征和催化机制进行的分子改造研究,包括底物特异性改造、立体选择性改造和稳定性改造三方面。最后,对ω-转氨酶分子改造研究进展进行总结和展望。     

不同类型喀斯特植物的荧光特征及抗旱性比较

利用叶绿素荧光技术观测了五个不同类型的喀斯特植物翅荚香槐、大盔凤仙、红背叶、牛耳朵和青冈栎在不同作用光强下的光能利用特征,并且对这五种类型植物在PEG诱导水分胁迫下的抗旱性作了比较。结果表明,随着作用光强的增加,这五种植物的光化学反应能力(qP)逐渐降低,非光化学耗散作用(NPQ)明显增加,同时PSⅡ有效光化学效率(Fv′/Fm′)随之下降,导致PSⅡ电子传递量子效率(ΦPSⅡ)也明显下降,但在相同作用光强下这五个类型植物的荧光特征无明显差异。在PEG诱导水分胁迫的实验中,牛耳朵、青冈栎在PEG处理后Fv/Fm变化不明显,而红背叶Fv/Fm值下降程度最大,其次为翅荚香槐、大盔凤仙。由此推测,牛耳朵和青冈栎的耐干旱能力最强,红背叶抗旱能力最弱,翅荚香槐、大盔凤仙居中。     

复方甘草酸苷和氟康唑与氯柳酊联合治疗马拉色菌毛囊炎106例疗效观察

目的观察复方甘草酸苷片和氟康唑胶囊与氯柳酊联用治疗马拉色菌毛囊炎的疗效。方法将202例患者随机分为治疗组106例,给予复方甘草酸苷50mg,每天3次;氟康唑200mg顿服,每天1次,连服3天,以后改为隔3天1次;皮损外涂氯柳酊,早晚各1次,连续2周为1疗程。对照组96例,单纯口服氟康唑和外用氯柳酊,方法及疗程同治疗组。结果治疗组的治愈率78．30％,总有效率95．28％,对照组的治愈率53．13％,总有效率78．13％。两组治愈率比较有非常显著性差异（P〈0．01）,两组总有效率比较亦有非常显著性差异（P〈0．01）;停药2周后,两组的复发率比较有非常显著性差异（P〈0．01）。结论复方甘草酸苷和氟康唑与氯柳酊联合治疗马拉色菌毛囊炎的效果好,治愈率高,不良反应发生率低,复发率低,值得推广应用。     

人γ干扰素转座子质粒构建及其在HEK293T细胞中的表达

[目的]克隆人γ干扰素(hIFNγ)基因,借助自剪切肽P2A,构建hIFNγ-P2A-RFP(红色荧光蛋白)融合基因转座子表达载体,并在HEK293T细胞中检测其表达水平.[方法]首先,以脂多糖(LPS)激活人外周血淋巴细胞,提取总RNA,经RT-PCR扩增hIFNγ基因;再通过重叠延伸PCR,获得hIFNγ-P2A-...