胚胎干细胞体外诱导分化

胚胎干细胞能在体外长期不断自我更新,具有高度分化潜能,可分化成胎儿和成体的几乎所有类型的细胞,如心肌细胞、神经细胞、上皮细胞、肝细胞、血细胞、胰岛细胞、脂肪细胞及生殖细胞等。在细胞治疗和组织器官替代治疗、发育生物学等的研究中将具有广阔的应用前景。目前已有多种胚胎干细胞体外定向诱导的报道。本文从体外诱导分化影响因素和几种主要诱导细胞类型进行分析和总结,为胚胎干细胞的诱导分化研究提供参考资料。     

禽类胚胎生殖细胞的研究

胚胎干细胞有2种来源：一种来自于早期胚胎囊胚期内细胞团（inner cell mass,ICM）的胚胎干细胞（embryonic stem cells,ES细胞）,另一种是来自胚胎生殖腺原始生殖细胞（primordial germ cells,PGCs）的胚胎生殖细胞（embryonic germ cells,EG细胞）。PGCs是生殖母细胞的前体细胞,是精子或卵子的祖先细胞。自Matsui等证实了PGCs同样可以作为胚胎干细胞的原材料之后,现已在人、小鼠、猪和鸡等多种动物的PGCs进行了分离培养并获得了EG细胞。现从形态特征和迁移、分离培养及鉴定方面对禽类EG细胞的研究进展作一综述。     

环境胁迫和抗坏血酸的氧化还原状态

为了解环境胁迫对植物体中抗坏血酸含量及氧化还原状态的影响，以不同强度的冰冻和干旱两种胁迫为例，研究了它们对沈阳几种针叶树离体叶抗坏血酸、脱氢抗坏血酸含量以及抗坏血酸-谷胱甘肽循环中4种酶活性的影响。结果表明，两种胁迫达到一定强度后，都能使还原态抗坏血酸含量下降而使脱氢抗坏血酸含量上升。冰冻使抗坏血酸过氧化酶和单脱氢抗坏血酸还原酶活性下降。轻度失水使这两种酶活性上升，失水加重后转而趋于下降。脱氢抗坏血酸还原酶和谷胱甘肽还原酶活性对两种胁迫反应均不如前两种酶敏感。结合以前的研究结果，认为这一H2O2清除系统在导致驯化(acclimation)的轻度胁迫作用下可以得到加强，而当胁迫强度过大时则其清除能力下降并使组织受到伤害。文中还报告了沈阳几种针叶树抗寒性和针叶中抗坏血酸含量及上述4种酶活性之间的相关关系。     

超抗原SEA增强小鼠对HBV DNA 疫苗的免疫反应

观察超抗原SEA(D227A)的真核表达载体（pmSEA）, 对HBV DNA 疫苗诱导Balb/c 小鼠(H2d）免疫应答的调节作用。 肌内注射空载体pcDNA3、HBV DNA 疫苗加pmSEA佐剂（pHBVS2S+pmSEA）或不加佐剂（pHBVS2S）; ELISA 法测定血清抗HBs; ELISPOT检测分泌IFN-γ的脾淋巴细胞;4 h51Cr 释放法检测小鼠脾细胞CTL 活性。HBV DNA佐剂组免疫小鼠抗HBsAg抗体滴度明显高于不加佐剂组,其IgG1/IgG2a的比例不同于多肽免疫组,二者分别为0.282与10。HBV DNA佐剂组均能增强IgG1和IgG2a的产生,是不加佐剂组的1.36、1.73倍。佐剂组小鼠脾淋巴细胞IFN-γ的分泌量是不加佐剂组2～3倍。CTL 细胞杀伤活性（E:T=100）佐剂组与不加佐剂组分别为：69.77%±7.5%、 42.81%±7.7%,差异显著(P<0.05)。HBV DNA 疫苗具有较强的免疫原性, 能够诱导机体产生特异性的抗体及CTL反应;pmSEA佐剂能够提高小鼠对DNA 疫苗的免疫应答,有望成为DNA 疫苗的免疫佐剂。     

中华真地鳖共附生放线菌DB2C2的筛选和鉴定

利用稀释平板法从中华真地鳖体内分离得到52株共附生放线菌,活性筛选表明菌株BD2C2具有较好的抗菌活性,其发酵液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径超过23mm,对枯草芽胞杆菌的抑菌圈直径约17.5mm,对大肠杆菌也有一定的抑制作用。进一步研究表明其活性物质主要集中在中等极性部位。在供试浓度为每张滤纸片30μg时,菌株BD2C2发酵液的乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌和大肠杆菌的抑菌圈直径分别约27.5、22.4和10.7mm,其抑制活性与阳性对照硫酸庆大霉素相当。利用形态学观察和分子生物学方法初步鉴定该菌为Streptomyces sp.,为一个潜在新种。作为微生物源杀菌剂,DB2C2具有一定开发潜力,值得进一步研究。     

腹腔镜前列腺癌根治术治疗前列腺癌的疗效及对患者血清激素水平的影响

目的:分析腹腔镜前列腺癌根治术治疗前列腺癌的疗效及其对患者血清激素水平的影响。方法:选择86例前列腺癌患者为研究对象并按抽签法随机分为对照组与观察组,每组43例。对照组行开放前列腺癌根治术治疗,观察组采用腹腔镜前列腺癌根治术,比较两组手术指标,手术前后血清促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、双氢睾酮(DHT)、游离睾酮(FT)、总睾酮(T)、前列腺特异性抗原(T-PSA、F-PSA),CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+水平的变化及术后并发症的发生情况。结果:观察组手术时间明显长于对照组,失血量、肠功能恢复时间、住院时间、疼痛评分均明显低于或短于对照组(P0.05)。两组治疗前后血清FSH、LH、DHT、FT、T、T-PSA、F-PSA比较差异均无统计学意义(P0.05)。观察组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+显著高于对照组(P0.05),CD8~+低于对照组(P0.05)。观察组术后并发症的发生率明显低于对照组(P0.05)。结论:腹腔镜前列腺癌根治术可起到与开放手术相似的控瘤效果,提高血清雄激素水平和患者的免疫功能,控制肿瘤进展,且安全性更高。     

胸腺素α原作为乙型肝炎表面抗原佐剂的研究

目的：研究胸腺素α原（ProTα）作为佐剂对重组乙型肝炎表面抗原（HBsAg）诱导小鼠产生乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）的影响。方法：以纯系BALB/c小鼠为免疫对象,分组情况为：①HBsAg组（1μgHBsAg）;②0.1μgProTα＋1μgHBsAg组;③0.5μgProTα＋1μgHBsAg组;④1μgProTα＋1μgHBsAg组;⑤铝佐剂组（1μgVacon疫苗）;⑥1μgPro-Tα＋1μgVacon疫苗组;每组10只小鼠,分别于0、2周各肌肉注射免疫1次。采用ELISA法检测血清抗-HBs滴度（即IgG亚类IgG1和IgG2a）。结果：与单独注射HBsAg组相比,1μgProTα＋1μgHBsAg组抗-HBs总抗体滴度明显增高（P〈0.05）,抗体持续时间更长,且ProTα可以平衡Th1和Th2免疫反应;2组间IgG1/IgG2a差异显著（P〈0.05）。与铝佐剂相比,ProTα增强了小鼠对HBsAg的反应性,提高抗-HBs阳转率。结论：ProTα在增强小鼠抗-HBs产生的同时,提高细胞免疫反应,提示ProTα是一种很有潜力的HBsAg佐剂。     

水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E在昆虫细胞中的表达、鉴定及免疫原性分析

目的:利用昆虫-杆状表达系统建立表达和纯化分泌形式的水痘-带状疱疹病毒(varicellazoster virus,VZV)糖蛋白gE的方法,并鉴定其理化性质及免疫原性。方法:利用Gibson assembly同源重组试剂盒快速构建重组质粒pFastbac-VZV gE。在sf9昆虫细胞中鉴定序列优化前后表达量的差异,并在High FiveTM细胞中大量表达。通过Ni-NTA亲和层析方法得到高纯度gE蛋白,之后通过酶联免疫吸附试验等验证了其理化性质,并进行小鼠免疫分析其免疫原性。结果:构建了pFastbac-VZV g E1/2重组质粒,经过PCR及双酶切鉴定后均为阳性克隆。使用BAC/PAC试剂盒提取Bacmid转染sf9细胞制备杆状病毒,经Western blot检测,sf9细胞开始表达gE蛋白且随着病毒代次升高g E蛋白表达量增加。序列优化后表达量明显增加,但是大部分以胞内形式存在。通过Ni-NTA一步亲和层析获得纯度较高的gE蛋白,并与VZV单抗9C8具有较好的反应性。通过免疫小鼠产生高滴度抗体,且免疫荧光结果显示其血清可以与天然病毒上的gE抗原结合。结论:成功获得了杆状表达系统表达的gE蛋白并且纯化和鉴定了蛋白质的性质及免疫原性,为进一步研发具有自主产权的VZV亚单位疫苗研究奠定了基础。     

两种冷冻保护剂和冷冻程序对兔精子冷冻效果的比较

目的比较不同冷冻保护剂和冷冻程序对兔精子冷冻保护的影响,以期提高兔精子冷冻保存的效果和效率。方法用三步降温法（程序Ⅰ）和两步降温法（程序Ⅱ）两种冷冻程序与终浓度分别为2%,3%,4%,5%的甘油和乙酰胺两种冷冻保护剂配合进行精液冷冻保存,统计精子复苏率。结果使用程序Ⅱ添加3%乙酰胺的冷冻保护剂实验组的精子复苏率较高,同其它组比较差异有显著性意义（P〈0.05）;程序Ⅱ比程序Ⅰ节省约70%的时间,同种浓度冷冻保护剂的不同冷冻程序组之间精子复苏率差异无显著性意义（P〉0.05）。结论程序Ⅱ与3%乙酰胺配合可以取得良好的冷冻保存效果;用程序Ⅱ进行兔精液冷冻保存可以大幅缩短操作时间。     

中国鸟类亚种新记录——草鹭指名亚种

2018年5月27日,在新疆克孜勒苏柯尔克孜自治州阿克陶县帕米尔高原湿地自然保护区内木吉河边湿地(38°56′33″N,74°34′22″E,海拔3421m)发现2只草鹭(Ardea purpurea),依据现场观测及拍摄到的照片分辨,该鸟为成鸟,额和头顶黑色,后颈有2枚延长的黑色饰羽。