菊芋类金属硫蛋白基因htMT2的克隆及其表达特征分析

从菊芋 (HelianthustuberosusL .)块茎cDNA文库中得到了一个新的植物类金属硫蛋白基因htMT2的cDNA序列 ,全长 5 0 9bp ,包括 2 4 0bp的开放阅读框、6 2bp的 5′端非翻译区、2 0 7bp的 3′端非翻译区。通过PCR获得了 2个htMT2编码区的部分基因组片段htMTG_1及htMTG_2 ,长度分别为 986bp和 982bp。分析表明两个基因组片段均包含 3个外显子及 2个内含子 ,编码一个由 79个氨基酸残基组成的多肽 ,与从htMT2推测的多肽完全一致 ,该多肽具有植物类金属硫蛋白的典型结构特征 ,N端及C端结构域富含Cys ,分别具有 8个和 7个Cys残基 ,上述两个结构域被一个无Cys的中间区分开。Southern杂交结果表明 ,htMT2在菊芋基因组中以小基因家族的形式存在。Northern杂交结果表明htMT2在叶片、叶柄、茎及块茎中均有表达 ,在茎中有较高水平的表达 ,但在根中未检测到杂交信号。经Cu2 处理后 ,htMT2在茎中的表达量显著降低。与其他 2型金属硫蛋白的序列同源性比较及htMT2对金属离子处理的反应均表明 ,htMT2是一种新的植物类金属硫蛋白基因。     

PTEN对SMMC—7721人肝癌细胞迁移增殖及粘着斑激酶磷酸化水平的影响

抑癌基因PTEN编码产物具有双专一性磷酸酶活性 ,并与细胞骨架张力蛋白同源。PTEN可参与粘着斑的形成和解聚而影响细胞迁移。现用PTEN表达质粒转染SMMC 772 1肝癌细胞 ,研究SMMC 772 1细胞运动能力的变化及PTEN与粘着斑激酶 (FAK)酪氨酸磷酸化水平之间的关系。PTEN过表达能够显著抑制细胞在Fn基质上的活动 :细胞在Fn基质上的迁移下降了 35 % ;在 30min和 6 0min两个时间点 ,Fn基质上细胞铺展分别降低了 2 9%和 2 6 % ;而在多聚赖氨酸基质上细胞铺展并没有变化。运用免疫沉淀和Western印迹方法 ,分析FAK及其酪氨酸磷酸化水平 ,发现PTEN过表达不影响FAK表达 ,但显著降低Fn诱导的FAK酪氨酸磷酸化水平 ,两者水平呈负相关。流式细胞仪分析细胞周期结果表明 ,PTEN抑制细胞 ,S期细胞下降了 16 %。上述结果提示 ,PTEN抑制肝癌细胞迁移铺展和增殖 ;PTEN对细胞运动的影响可能通过调节FAK酪氨酸磷酸化水平而实现。     

大熊猫母性行为培训

圈养大熊猫初产母兽弃仔和抚育行为不当是导致幼仔死亡的主要原因之一。针对这种情况,从1998－2000年,分别采用幼仔模型、尿液、叫声录音、实体和乳汁等多种刺激信号,对1只弃仔的雌性大熊猫（谱系号：446）母性行为培训的结果表明,首先采用幼仔模型、尿液、叫声录音和乳汁等多种信号的刺激,有助于弃仔的初产母兽再接受其幼仔。进一步对母兽抚育行为的培训,其母性行为逐年增强,并最终掌握各项育幼技能,使幼仔存活率得到显著提高。     

半干旱地区不同地膜覆盖时期对土壤氮素效性的影响

在年降水量415mm的半干旱地区黄棉土上,以春小麦为供试作物进行大田试验,研究地膜覆盖（包括不覆膜、播种后覆膜30d、覆膜60d和全程覆膜）对土壤水分、温度和氮素有效性的影响。结果表明,覆膜对2m土层贮水量基本没有影响,能显著提高0－20cm土层的含水量;覆膜对5cm处土壤温度的影响呈“U”型变化,即在作物生长前期和后期影响显著,中期影响较小;覆膜能增加土壤呼吸和有机氮的矿化,因而显著影响土壤剖面中NO^-3-N的累积;表现为在收获时覆膜30d和60d处理剖面中NO^-3-N的累积明显下降,而全程覆膜处理剖面中NO^-3-N的累积显著增加,在覆膜的基础上施用氮肥,这种作用会更加突出。显然全程覆膜易造成有机质的大量矿化和NO^-3-N的淋溶损失。     

镍处理对水稻叶片H2O2积累和抗病的诱导效应

2.20mmol/L的硝酸镍处理水稻幼苗后第3天用稻白叶枯菌（Xanthomonas oryzae pv.oryzae）挑战接种,硝酸镍处理的稻苗病情比对照明显减轻,并且叶片中过氧化物酶（POD）活性上升,过氧化氢酶（CAT）和抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性明显下降,H2O2和丙二醛（MDA）含量显著增加。这些结果表明,H2O2积累与镍诱导的抗病作用密切有关。     

产环氧化物水解酶的黑曲霉菌种分离和发酵条件的研究

从土壤中筛选出一株能将苯基环氧乙烷立体选择性水解为R－苯基乙二醇的环氧化物水解酶的黑曲霉SQ－6。对其产酶发酵条件进行了研究,最佳碳,氮源分别为2．0％蔗糖和2．0％玉米浆,最适初始pH为4．0,该酶不需诱导,同时还研究了其他发酵条件对产酶的影响,使用含酶细胞进行底物苯基环氧乙烷转化。产物（R）－苯基乙二醇转化率为41％,ee值为99％。     

临床技能考核纳入卫生系列职称评聘的探讨

随着人事制度的改革,职称评聘制度也在不断改进和完善,但作为卫生专业,其实践操作性较强,单纯依靠学术成果来评价其专业能力是远远不够的,探索一套能较全面、准确地评定临床卫生专业技术人员水平的体系是医院人力资源管理部门迫在眉睫的问题。为进一步深化职称制度的改革,介绍将临床技能考核纳入临床卫生专业技术人员的职称评聘当中的过程及取得的成果,并介绍了建立完整的临床考核研究体系,同时也提出了将临床技能考核纳入职称评聘过程中存在的问题。     

同源盒基因和肿瘤

同源盒基因是一族含有共同的183个核苷酸序列的调节基因,在生物的发育分化中起重要的作用,具有高度保守性,是转录过程的主控基因,本文结合有关文献,探讨同源盒基因在各种恶性肿瘤中的表达与肿瘤发生,发展相关的分子机制及其常用的分子生物学研究方法。     

55例自身血回收的临床应用探讨

总结和分析在心脏手术中进行自身血回收的经验。1999年1月－2000年3月,上海市胸科医院共进行自身血回收55例,其中男性27例,女性25例。年龄范围19－71岁,体表面积1．3－2．2m^2。本院应用的是意大利dideco公司生产的自身血回收机及其管道,不仅回收手术野血,而且回收体外循环管道内的残余血液。结果：55例患者均康复。自身血回收组患者的术后用血量和ICU时间与对照组相比,均显著降低（P＜0．05）。讨论：自身血回收技术除可减少患者术后用血量和ICU时间与对照组相比,均显著降低（P＜0．05）。讨论：自身回收技术除要减少患者术后用血、缓解血源紧张、避免血源性疾病外,还可提供以下有利条件：①为稀有血型患者提供手术保障;②可提供手术中发生意义大出血时的应急处理手段;③为外地患者就医和手术提供方便,并能减轻经济负担。     

轮状病毒新敏感细胞的筛选

轮状病毒（RV）的细胞培养问题的尚未完全解决,其原因之一可能与敏感细胞较少有关。为此,我们进行了RV新敏感细胞的筛选,发现恒河猴胚肾传代细胞Frhk-4感染不同血清型的人和动物RV标准株Wa、DS－1、YO、ST－3、SA－11和UK,37℃旋转或静止培养均能产生明显CPE。培养物经ELISA测定含RV抗原,用PAGE检测有特征性RV核酸图型,电镜超萍切片检查感染细胞可见RV颗粒,证实Rrhk-4是RV的敏感细胞,这在国内外尚未见报道。同时与MA104－CV－1细胞的比较研究证明,三种细胞对Wa和DS－1的敏感性及增殖滴度,以CV－1最高,Frhk-4次之,MA－104最低。