非损伤微测技术在细胞生物学研究中的应用系列讲座(一)——技术简介

非损伤微测技术是一种选择性微电极技术,可以不损伤样品而获得进出样品的离子和分子信息,具有非损伤性,长时间、多电极、多角度测量等优势.本文介绍非损伤微测技术原理和技术特点及其在细胞生物学不同领域中的应用.     

DCD-1L在毕赤酵母中的克隆和表达

由于细菌对抗生素耐药性的产生 ,迫切需要寻求一种新的抗菌剂来代替它。DCD是最近从人汗腺中发现的具有广谱抗菌活性的抗菌肽。与抗生素不同 ,它不会在生物体内富集 ,也不会诱导产生耐药菌株。为了能快速并低成本地获得该肽 ,DCD 1L基因 ,第一次被克隆到毕赤酵母载体pPIC9中 ,并在毕赤酵母GS1 1 5中进行表达。实验结果显示毕赤酵母GS1 1 5系统所表达的DCD 1L在pH5 5～ 7 4范围内具有抗大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的活性。这个结果说明在毕赤酵母中表达的DCD 1L能够抗部分革兰氏阴性和阳性细菌。     

复合酶生物技术制-剂的功用

复合酶制剂是继酵母和乳酶生制剂之后由华中农业大学科研人员用生物技术方法,研制和开发的多酶复合物。其酶的种类较多,以非淀粉多糖水解酶为主,包括蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、半纤维素酶、β-葡萄糖酶、果胶酶、甘露聚糖酶等多种水解酶类;其有益微生物如乳酸杆菌、酵母菌和少量双歧杆菌等。 目前华中农业大学发酵工程制得的复合酶制剂富含单细胞蛋白、多种水解酶、粘多糖、游离氨基酸及其衍生物、各脂溶性及水溶性维生素、常量及微量元素,具有营养、促进消化吸收、增强免疫功能、降低料肉比、消除肠道臭气、减少对环境的污染和防治疾病的作用。 复合酶制剂对当前养殖业生产有极其重要的意义,它不仅在饲养业中作饲料添加剂,提高营养水平,促进动物生长和繁殖,还能在饲料工业中作为防腐剂、诱食剂和抗菌剂。 据测算,若筹建年产250吨复合酶制剂生产厂,总投资120万元,流动资金1000万元,年增产值可达750万元,利税450万元,2～4年可回收投资,投资收益率为516％,而抗风险系数仅为18％。秦春圃     

TACE 联合其他介入手段治疗肝癌伴门静脉癌栓

肝癌是世界范围内恶性程度最高的恶性肿瘤之一。门静脉癌栓的出现加速了肝功衰竭以及门静脉高压的发生概率,严重影响了肝癌患者的预后,临床上对于肝癌合并门静脉癌栓的诊疗尤为棘手。传统的治疗手段对于肝癌合并门静脉癌栓的疗效欠佳,且创伤大、住院时间长、并发症多。介入治疗因其创伤小、住院时间短、并发症少,疗效确切等优势逐渐被人们认可。以往单独应用经导管肝动脉化疗栓塞术(Transcatheter Arterial Chemoembolization,TACE)治疗肝癌取得了可喜的成果,随着介入治疗的发展,TACE联合其他介入手段治疗肝癌伴门静脉癌栓引起了越来越多的学者重视。本文回顾了近几年来国内外的相关文献,对TACE联合其他介入手段治疗肝癌合并门静脉癌栓的方式及疗效做一综述,以期对肝癌的临床诊疗工作提供一些帮助。     

金双歧治疗小儿厌食症的临床研究

目的观察金双歧对小儿厌食的治疗效果。方法将54例有厌食症患儿随机分成治疗组和对照组各27例,分别用金双歧和醒脾养儿颗粒治疗,观察两组治疗后食欲提高的显效时间及总有效率。结果治疗组较对照组在平均显效时间及总有效率方面优于对照组,差异有统计学意义（P〈0．001,P〈0．05）。结论金双歧对小儿厌食症治疗有效。     

Ca~(2+)转运通路对金雀异黄酮舒张大鼠脑血管作用的影响

目的:研究Ca2+转运通路对金雀异黄酮舒张大鼠脑血管作用的影响。方法:75只大鼠被随机分为3组,分别经由二甲亚砜、金雀异黄酮和酪氨酸磷酸化抑制剂A47处理基底动脉及Willis环血管。每组大鼠进一步划分成5个亚组,每个亚组用不同浓度的细胞外Ca2+处理,分为:0、0.6、1.2、1.8和3.6 m M Ca2+组。5-羟色胺诱导血管收缩。测定大鼠基底动脉管壁厚度与官腔周长的比值;荧光成像分析法测定血管平滑肌细胞细胞内Ca2+浓度;免疫印迹分析检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK),蛋白质磷酸酶催化亚基1(PP1),肌凝蛋白磷酸酶目标亚基1(MYPT1)的表达来测定血管平滑肌细胞Ca2+敏感性。结果:金雀异黄酮和酪氨酸磷酸化抑制剂A47显著降低大鼠基底动脉管壁厚度与官腔周长的比值(P0.01),Ca2+内流(P0.01,P0.05)及MLCK的表达(P0.01);增加PP1和MYPT1的表达(P0.01)。细胞外Ca2+与金雀异黄酮及酪氨酸磷酸化抑制剂A47有协同效应。硝苯地平和毒胡萝卜素可废除该效应。结论:低细胞外Ca2+水平增强了金雀异黄酮和酪氨酸磷酸化抑制剂A47的血管舒张作用。L型电压门控Ca2+通道(L-VGCC)和肌浆网Ca2+库(SR)参与交互效应。     

二尖瓣返流患者PCI术后的短期随访研究

目的:研究PCI治疗缺血性二尖瓣返流患者的临床疗效。方法:入选2015年3月至2016年8月在第二军医大学附属长海医院心血管内科确诊为冠状动脉粥样硬化性心脏病并植入支架(不包括急诊PCI、风湿性心脏病、心梗病史)的患者100例,将其分为无返流、轻度返流及中重度返流三组,对行PCI患者的术前与术后三月复查心脏彩超结果进行对比。结果:三组之间LVEF差异明显(62.57±2.76%vs 60.47±6.75%vs 48.54±9.96,p0.001);但各组之间的病变血管分布及支架植入个数比较差异并无明显统计学意义(P0.05);PCI术后二尖瓣返流改善值为(-0.43±0.51 mL vs 0.58±1.65 mL vs 4.27±5.12 mL,p0.001);LVEF变化值分别为(-0.13±3.05%vs 1.52±4.13%vs 6.23±6.87%,p0.001)。中重度返流患者PCI血运重建后返流量相对于轻度返流和无返流的患者明显减少(4.27±5.12 mL vs 0.58±1.65 mL,p0.001;4.27±5.12 mL vs-0.43±0.51 mL,p0.001),轻度返流组术后二尖瓣返流及LVEF较无返流组无明显改变(p0.05)。结论:LVEF和二尖瓣返流程度密切相关,而PCI对于重度缺血性二尖瓣返流疗效较好,但并未发现冠脉病变分布上及支架植入个数的差异。     

Cr6+、Cr3+胁迫对黑藻生理生化影响的比较研究

以沉水植物黑藻 (Hydrillaverticillata(L .f.)Royle)为实验材料 ,通过模拟水体Cr6+ 、Cr3 + 污染环境 ,比较研究了两种价态铬对黑藻叶的毒害影响。结果表明 :随着Cr6+ 、Cr3 + 浓度的加大 ,超氧阴离子 (O 2)产生速率、丙二醛 (MDA)、可溶性蛋白含量皆呈先升后降趋势。Cr6+ 、Cr3 + 浓度过高时 ,三种抗氧化酶 (SOD、POD、CAT)活性比例失衡 ,且Cr6+ 处理组的O 2 产生速率、MDA含量高于Cr3 + 处理组 ,叶绿素、可溶性蛋白含量、叶绿素a/b值低于Cr3 + 处理组 ,显示出Cr6+ 的毒性远大于Cr3 + 。     

西藏禾本科植物新分类群与新记录种

西藏禾本科植物新分类群与新记录种赵南先,李名非（安徽省生物研究所,合肥２３００３１）ＮＥＷＴＡＸＡＡＮＤＮＥＷＲＥＣＯＲＤＩＮＧＳＰＥＣＩＥＳＯＦＧＲＡＭＩＮＥＡＥＦＲＯＭＴＩＢＥＴ￥ＺＨＡＯＮａｎ－Ｘｉａｎ;ＬＩＭｉｎｇ－Ｆｅｉ（ＡｎｈｕｉＩｎｓｔ...