基于宏基因组学方法挖掘新型α-L-鼠李糖苷酶资源北大核心CSCD

α-L-鼠李糖苷酶是特异性切割末端含α-L-鼠李糖的天然化合物的一类糖苷水解酶,该酶在食品、医药、化学等行业都有广泛的应用。本研究旨在利用保守氨基酸基序结合PCR驱动的宏基因组学方法,从提取的健康人体粪便宏基因组DNA中获得新型细菌源α-L-鼠李糖苷酶基因。通过对CAZy数据库GH78家族中193条细菌源α-L-鼠李糖苷酶氨基酸序列进行多重序列比对,首次将α-L-鼠李糖苷酶家族分为3个亚家族,并确定了其中两个亚家族的两对保守氨基酸基序。基于保守基序氨基酸序列设计简并引物,PCR扩增保守基序间基因片段,对PCR产物克隆测序,结果获得12条α-L-鼠李糖苷酶基因片段,对其编码的氨基酸序列在Gen Bank数据库进行Blast序列比对,其中两条基因片段的氨基酸序列一致性仅为52%,一条为73%,其余9条在94%以上。根据Gen Bank数据库中序列一致性94%以上片段对应全长基因序列设计上下游引物,以人体粪便宏基因组DNA为模板,扩增获得3条α-L-鼠李糖苷酶全长基因,并将其克隆于载体p ET-28a,在E.coli BL21(DE3)内进行异源表达,目的蛋白多以包涵体形式存在于沉淀中,少量以可溶性形式存在于上清中。人体肠道细菌宏基因组为新型α-L-鼠李糖苷酶基因发现提供了潜在的基因资源库,基于保守氨基酸基序驱动的宏基因组学方法,从人体肠道以及环境宏基因组中直接获取新酶基因是可行的。     

原生质体电融合再生柑橘属间体细胞杂种

Leaf derived protoplasts of Sour orange (Citrus aurantium L.) were fused electrically with embryogenic protoplasts of Microcitrus papuana Swingle. Plants were regenerated from the fusion products, which were characteristic with three types of leaf morphology. Most of the plants were identical to Sour orange (namely, Leaf-parent-type plant) and two plants had large and thick leaves whereas one plant had bifoliate and trifoliate leaves. Chromosome examination showed that these plants were diploid with 18 chromosomes (2n = 2x = 18). RAPD analysis was employed to verify the hybrid characteristics of the plants in the first two types. Four 10-mer arbitrary primers with polymorphism were chosen. Band pattern of the plants was similar with the leaf parent (Sour orange) for the primer OPAA-17. Band pattern of the plants was similar with either Sour orange or M. papuana for OPA-08. As for OPA-07 and OPA-04 three kinds of band profiles were detected. Results of RAPD marker, together with chromosome determination, indicated that all of the analyzed plants were intergeneric diploid somatic hybrids between Sour orange and M. papuana.     

王晓东：科研路上的朝圣者

2007年10月的一个周末,北京大学新生物楼邓佑才报告厅传出此起彼伏的笑声。此时的这里有一场讲座,主题为"展望事业,探讨人生"主讲人王晓东。     

苯并［a］芘在土壤－水－水稻系统中传输动力学研究

建立了ＢａＰ在土壤水稻系统中传输模型,并对其在系统各组分中的含量变化做了定量分析。实验求得了ＢａＰ在系统各相间传输速度常数和分配系数。揭示了水中ＢａＰ向水稻体传输路径和它们的速度大小。水稻从水中吸收ＢａＰ的速度比其从土壤中吸收的速度高４倍,水中ＢａＰ向土壤沉积速度比水稻从水中吸收ＢａＰ的速度高７倍。水中ＢａＰ在迁移到达水稻体之前,绝大部分被土壤牢牢吸附而很难被水稻吸收。     

诱导子的作用方式及其在植物组织培养中的应用

介绍诱导子的概念,作用方式以及在植物组织培养中应用的研究进展。     

X射线对植物细胞有丝分裂的作用

(1)用不同剂量X射线照射向日葵萌发种子,研究了照射后3—4日期间根端细胞有丝分裂频率的变化。结果证明50—1,000r的X射线这时对有丝分裂的活跃性仍有抑制作用,并且抑制的程度与照射剂量的大小成比例关系。 (2)用不同剂量X射线照射蚕豆萌发种子,研究了照射后12—13日期间根端细胞有丝分裂频率的变化。结果发现10r、50r、100r和300r照射各粗的有丝分裂频率都超出对照组,其差别均达到统计学上可以置信的程度。通过对有丝分裂各期出现频率的比例的分析,说明10—300r各照射组有丝分裂指数的升高并不是由于中期或后期时间拖长的结果,而是有丝分裂频率的真正提高。另外通过分析照射后12—13日一昼夜间六个不同时间有丝分裂频率的变化情况,说明10—300r各照射组有丝分裂频率的升高并不是由于补偿效应,而是有丝分裂活跃性真正得到促进。 700r照射组的蚕豆细胞有丝分裂频率显著低于对照组。 (3)根据上述实验结果可以看出,一定剂量范围的X射线对细胞有丝分裂的活跃性有促进作用。这种促进作用是照射后比较远期的效应。在蚕豆被照射后12—13日期间我们看到了这种促进作用。     

适于青蒿芽生长和青蒿素积累的光,温和培养方式探讨

探讨了光照,温度和培养方式对青蒿芽生长和青蒿素合成的影响。适宜芽生长和青蒿素积累的光照强度约为３０００ｌｘ,照光时间为２０ｈ／ｄ,芽生长和青蒿素积累的最适温度为２５℃和３０℃,通过先２５℃（２５ｄ）后３０℃（５ｄ）的温度转变二步培养法可以提高青蒿素的产量;青蒿芽生长和青蒿素积累的最佳培养方式为非浸没代转速摇瓶培养。     

村落与农田及土地利用关系的生态学探讨

村落与农田在农村生态系统中既对应又统一；村落与土地利用关系密切。在农村的一切生态经济活动中，都是围绕着村落的建设和土地的耕作进行的。从史前时代直到当今信息社会，村落和土地一直是人类社会生存与发展的基石，因而从生态学角度探讨村落与农田及土地利用关系具有...     

σ^32（sigma—32）及其对热应激蛋白的调控

σ＾３２是由Ｅ．ｃｏｌｉ ｒｐｏＨ基因编码的一为３２ＫＤ的热应激蛋白转录调控因子。当热应激或其它应激反应发生时,它迅速激活热应激基因的启动子,大量转录其ｍＲＮＡ,合成热应激蛋白。本综述了σ＾３２在细胞内的表达及其对热应激基因转录的调控。