拟康氏木霉和微紫青霉纤维二糖水解酶基因I(Cbh1)启动子的初步分析

应用PCR技术,分别扩增拟康氏木霉(T.pseudokoningii S38)和微紫青霉(P.janthinellumAs3.510)Cbh1启动子的284 bp和215 bp两个片段,并通过凝胶阻滞试验,初步分析了在槐糖和葡萄糖两种培养条件下Cbh1启动子上参与Cbh1基因表达的调控信息.凝胶阻滞试验结果表明,S38 Cbh1启动子片段与葡萄糖和槐糖培养/诱导条件下的无细胞提取物,均形成了蛋白质-DNA复合物,而As3.510,只有葡萄糖培养条件下的无细胞提取物与其启动子片段,形成了蛋白质-DNA复合物.表明在S38 Cbh1启动子的一302/一18 bp处,可能存在与槐糖和葡萄糖介导的调控蛋白相互作用的特定核酸基元,而在As3.510 Cbh1启动子上的一280/一65 bp处有与葡萄糖介导的阻遏蛋白相互作用的特定核酸基元.竞争性阻滞试验结果表明,S38和As3.510 Cbh1启动子片段与胞内调控蛋白的相互作用是特异性的.     

胸腺素a1／干扰素a-2b融合基因表达载体的构建与表达

通过PCR人工合成模板的方法获得牛m1基因,与含,IFNa-2b基因的pAG-IFN重组质粒,构建％1／IFNar-2b融合基因重组质粒pUCl8-Ta1／IFN,经序列分析证实,融合基因m1和,INFa-2b与GenBank登录基因的序列一致性分别为100％和98．5％,仅IFNa-2b有两处碱基发生无义突变．再将融合基因亚克隆入pBV220,构建融合表达载体pBV220-Ta1／IFN,转化到EcoliM15经IPTG诱导,实现了Ta1-1FNa-2b融合蛋白的高表达,约占菌体总蛋白的24．5％,为包涵体形式．这为研制Ta1—IFNa-2b双重活性的融合蛋白奠定了基础．     

相思豆毒素研究及应用

相思豆毒素类似于蓖麻毒素,是一种植物蛋白毒素,具有极强的细胞毒性作用,特别是对某些恶性肿瘤细胞的毒性更强,这使它成为用于杀伤肿瘤细胞的候选毒素之一。本就其性质、基因克隆、结构与功能,以及在肿瘤导向治疗方面的应用作一简要的综述。     

寡核苷酸探针悬浮芯片在病原体检测中的应用

悬浮芯片与固体芯片、荧光定量PCR并列成为核酸序列鉴定中的重要的分子生物学工具,并在病原菌检测方面显示出不同的应用领域.悬浮芯片能同时检测多种病原菌,具有处理多样本能力、使用灵活、低成本等特点,适合对未知样本检测及环境监控.能够在生物安全、公共卫生、工农业生产中发挥重要作用;而固体芯片能耦联成千上百个探针,但由于在多样本处理、成本方面欠缺,因此适合于对重要的未知病原体的鉴定;荧光定量PCR具较好特异性、灵敏度,以及多样本处理能力,但在高通量方面欠缺.适合有目的地检测已知病原体.目前已建立三种基于悬浮芯片的检测方法:多重PCR扩增、通用引物扩增16S/23S rDNA、直接对实际样本杂交检测.多重PCR具较好特异性,但其多重能力还难以满足悬浮芯片的高通量的需要;通用引物具较好灵敏度及扩增多靶分子能力,但也存在交叉反应等缺陷.同时,采用PCR扩增方法,悬浮芯片检测的是PCR产物,不能客观反应实际样本中存在病原菌数量及是否具生命力.直接杂交环境样本尽管避免了PCR的缺陷,但在灵敏度方面非常欠缺.目前,在环境样本处理上,仍然缺乏有效的、高通量、自动化的方法,不能满足PCR与悬浮芯片多样本检测的需要.     

白羊草无融合生殖现象的研究初报

白羊草无融合生殖现象的研究初报肖辅珍,王景林（首都师范大学,北京１０００３７）白羊草（Ｂｏｔｈｒｉｏｃｈｌｏａｉｓｃｈａｅｍｕｍ）,禾本科孔颖草属。本属我国３种,２变种,北京１种即白羊草。本属中的小花孔颖草国外已有报道其无融合生殖情况,无融合生殖产生...     

无细胞系统的基因表达与蛋白质合成

无细胞翻译——利用细胞提取液在体外合成蛋白质,已是国外分子生物学实验室的一项常规技术,但在国内此项技术的利用却几乎是空白.对体外无细胞系统的特性、功能、优缺点及其进展等进行了全面的介绍,以期使国内学者了解和利用这一方便而有效的表达系统,进行应用生物化学与分子生物学的实验研究.     

康氏木霉B—7纤维素酶的产生条件及酶学性质研究

野生型康氏木霉８５４－Ｂ２经多种理化诱变因子及空间微重力辐射等因素的处理,选育到１株高活力纤维素酶变异株Ｂ－７。其固体培养物的纤维素酶,以滤纸为底物酶活力为３４μ／ｇ,以羧甲基纤维素（ＣＭＣ）为底物酶力为１４７２μ／ｇ。与野生菌８５４－Ｂ２相比,产酶活力水平分别提高５倍和７倍多。酶在滤纸上作用的最适条件为ｐＨ４．５－５．０,温度５５－６０℃;２５℃,保温２４ｈ,ｐＨ稳定范围为ｐＨ４．０－６．５;７     

纤维素酶固定化的研究进展

纤维素酶成本过高是纤维糖化工艺中的主要障碍,因此,各国学者都在研究和探索降低纤维素酶成本及提高其酶解效率的有效方法,酶的固定化技术便有很有希望的方法之一。本文综述了近２０年国内外应用不同性质的载体研究纤维素酶固定化的若干结果和进展。     

莜麦与玉米的远缘杂交

莜麦（Ａｖｅｎａ ｎｕｄａ Ｌ．）和玉米（Ｚｅａ ｍ ａｙｓＬ．）杂交有一定的受精率和成胚率。人工传粉后玉米花粉能很快在莜麦柱头上萌发并长入莜麦花柱中,在６８％ 的莜麦花柱中可观察到不只一条玉米花粉管。对授粉后的１６３ 个莜麦子房进行制片观察,发现受精率可达１１．０４％ ,其中只形成胚而无胚乳的卵细胞单受精占３．０７％ ,只形成胚乳而无胚的中央细胞单受精占１．８４％ ,既形成胚又形成胚乳的双受精占６．１３％ 。从授过玉米花粉的大约２２００ 朵莜麦小花中收获１８ 粒种子,对１２ 株实生苗根尖染色体计数表明,其中９ 株为单倍体（２ｎ＝ ２１）,３ 株为二倍体（２ｎ＝ ４２）。结果证明,通过莜麦和玉米杂交后玉米染色体的消除可以获得莜麦单倍体