真鲷野生群体和人工繁殖群体的同工酶遗传差异

采用水平淀粉凝胶电泳技术对采集于黄海海州湾海域的真鲷野生群体和经过2代人工繁育的养殖群体进行了同工酶遗传变异研究。分析检测了2个群体各50个样本肌肉和肝脏组织的13种同工酶共20个基因位点,其中MDH_a、GPI、PGM等10个位点为多态位点,ME和EST-b为变异程度比较高的位点。野生群体和人工繁殖群体的多态位点比例分别为45%和25%（P _0.95）;群体平均观察杂合度分别为0.141±0.044和0.095±0.043。结果表明,真鲷的野生群体和养殖群体拥有较高程度的遗传变异水平,但是养殖群体的遗传变异水平比野生群体有一定程度的降低。养殖群体遗传变异水平的降低在一定程度上是由于亲鱼数量少所致。比较了同工酶分析和RAPD分析的结果。将此两种技术相结合在鱼类群体遗传多样性分析中具有比较实际的意义。     

三得利公司获准在普通试验场栽培“Roundup Ready”水稻

《日经生物技术》2000年3月27日号第13页报道：日本三得利公司在茨城县该公司隔离圃场内试验的耐除草剂基因重组水稻(Roundup Ready)已获准在普通圃场栽培。于3月10日农林水产省宣布其符合“农林水产领域利用基因重组体的方针”。 继“Roundup Ready”水稻之后,在日本国内还进行耐除草剂“Liberty Link”水稻的隔离圃场试验,并逐渐开始该重组水稻的商品化。日本企业也正在进行日本烟草产业公司的低谷蛋白水稻的开发。但是,日本三得利公司对此仍采取慎重的态度,认为“今后必须进行更多的栽培试验(包括国内的适应性试验)。向厚生省申请确认食品安全性的具体时间等还没有决定”。 这次被批准确认的有6个品系(730、1107、1316、1702、1708、1763品系)。由于这些品系对食用、加工用以及饲料用都很适合,因此决定在日本国内进行栽培。孙国凤     

转基因动物鉴定技术的研究进展

转基因动物的建立,是一项复杂的系统工程,所涉及的环节众多,工作量大,而其中重要的一步,转基因动物的鉴定,则是对在此之前所进行的工作进行检验的关键。选用有效的方法,则能迅速、准确鉴定出转基因。近年来,这方面技术发展迅速,许多新思路、新方法不断出现,本文对此进行了综述。     

萤光素酶表达质粒pEE14.1-luc的构建及表达

目的:为研究10 kb以上DNA疫苗质粒的体内电穿孔递送,构建萤光素酶报告基因表达质粒p EE14.1-luc,并验证其表达。方法:从质粒p GL3-CMV中通过酶切、补平和纯化的方法获得萤光素酶基因luc,克隆入p EE14.1载体,构建重组表达质粒p EE14.1-luc,瞬时转染293T细胞,采用Western印迹、流式细胞术和免疫荧光等方法对萤光素酶基因在体外的表达情况进行验证,并运用活体成像仪检测萤光素酶基因在小鼠活体内的表达。结果:经菌液PCR鉴定和测序验证,p EE14.1-luc与预期设计完全一致;流式细胞术检测luc阳性表达率为22.41%,免疫荧光检测可见绿色荧光表达,Western印迹检测在相对分子质量为62×103处显现目的蛋白条带;同时,利用活体成像技术也检测到萤光素酶基因在小鼠活体内的表达。结论:p EE14.1-luc表达质粒构建成功,为研究DNA疫苗体内表达机制和体内电穿孔递送条件优化奠定了基础。     

突触可塑性与脑疾病的神经发育基础

大脑神经回路高度有序的神经元活动是高级脑功能的基础,神经元之间的突触联结是神经回路的关键功能节点。神经突触根据神经元活动调整其传递效能的能力,亦即突触可塑性,被认为是神经回路发育和学习与记忆功能的基础。其异常则可能导致如抑郁症和阿尔茨海默病等精神、神经疾病。将介绍这两种疾病与突触可塑性的关系,聚焦于相关分子和细胞机制以及新的研究、治疗手段等进展。     

青霉素酰化酶基因的克隆与表达Ⅲ、温度在转录水平调控青霉素酰化酶基因表达

高表达的基因工程菌大肠杆菌A56(pPA22)青霉素化酶基因表达对温度敏感。在37℃几乎不产生青霉素酰化酶,在28℃以下积累青霉素酰化酶,合成酶的最适温度为20—22℃,产量可达250u,100ml。当用DNA—RNA点滴杂交法定量分析RNA时,发现在37℃培养的细胞中不积累青霉素化酶mRNA,而22℃培养的细胞中相应mRNA的量是28℃培养的细胞中的5倍。同一质粒pPA22上的氯霉素乙酰转移酶的mRNA在三种温度培养的细胞中的。浓度相同。将37℃培养的细胞转移到22℃继续培养,当菌体不继续增殖时,细胞内仍无青霉素酰化酶及其mRNA的积累。上述结果表明温度在转录水平上专一地调控了青霉素酰化酶基因的表达,在37℃长时期培养的细胞中青霉素酰化酶基因被永久地关闭。     

南京地区戊型肝炎病毒基因型鉴定和变异分析

为了解南京地区戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)基因型的分布以及变异状况,本研究采用逆转录套式聚合酶反应(RT-nPCR)的方法检测南京地区40份急性散发性戊型肝炎患者的粪便标本,对PCR产物进行测序,利用生物信息学软件比较核苷酸的同源性、遗传距离,进行基因分型和变异分析。40份粪便标本中检测到14份阳性HEV、RNA,检出率为35%,基因分型均为HEV IV型,且分属2个不同的亚型;利用生物信息学软件对国内I型和IV型毒株加以比较,发现HEV IV型毒株比I型变异程度高,不同年份的HEV IV型毒株变异更大,有新的亚型出现,且变异有随时间推移而增大的趋势。     

诺卡氏菌形放线菌的化学分类

通过对28株分别代表12个属的诺卡氏菌形放线菌及有关分类单位的胞壁组分、枝菌酸、甲基萘醒、磷酸类脂等化学特性的分析,结合数值分类,在相似值(s.m)80％水平上将这类菌分成了两个大的化学类群,在90％水平上再分成四个小的类群。除拟诺卡氏菌属是显著的化学异源类群外,其余均与传统分类的属一致,形成独立的化学分类单位。讨论了化学分类在诺卡氏菌形放线菌分类研究中的应用及对出现的化学异源类群的认识。     

妊娠期贫血患者血常规、网织红细胞多参数及贫血类型与孕期的关系研究

摘要 目的：探讨妊娠期贫血患者血常规、网织红细胞多参数、贫血类型与孕期的关系。方法：纳入我院2018年9月～2019年9月收治的妊娠期贫血患者110例,按孕期分成孕早期组（n=32）、孕中期组（n=35）、孕晚期组（n=43）,均检测血常规[血红蛋白（Hb）、红细胞平均体积（MCV）、外周血红细胞计数（RBC）、红细胞比容（HCT）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）]、网织红细胞参数[网织红细胞绝对值（RET#）、低荧光强度网织红细胞百分率（LFR%）、网织红细胞百分率（RET%）、中荧光强度网织红细胞百分率（MFR%）、高荧光强度网织红细胞百分率（HFR%）]。分析各参数与孕期相关性,比较三组贫血类型。结果：孕早期组Hb、RBC、HCT、MCHC、LFR%较孕中期组、孕晚期组增高,其中孕中期组较孕晚期组增高（P＜0.05）,孕早期组RET#、RET%、MFR%、HFR%较孕中期组、孕晚期组降低,且孕中期组较孕晚期组降低（P＜0.05）,孕晚期组MCV高于孕早期组、孕中期组（P＜0.05）。Pearson线性相关分析提示,Hb、RBC、HCT、MCHC、LFR%与孕期呈负相关（P＜0.05）,RET#、RET%、MFR%、HFR%与孕期呈正相关（P＜0.05）。孕早期组、孕中期组小细胞贫血占比高于孕晚期组,大细胞贫血占比低于孕晚期组（P＜0.05）。结论：妊娠期贫血患者随着孕周的延长,Hb、RBC、HCT、MCHC、LFR%下降,而RET#、RET%、MFR%、HFR%增高,孕晚期以大细胞贫血为主,早、中期以小细胞贫血为主,加强上述指标的检测对妊娠期贫血患者诊断和治疗具有一定的临床意义。     

长柄炭角菌子实体化学成分研究

从长柄炭角菌(Xylaria longipes)的子实体中分离得到7个化合物,经波谱分析鉴定为3β-羟基-麦角甾-5,7,22-三烯(1)、麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(2)、integric acid(3)、1-羟基-6,8-二甲氧基-3-甲基-蒽醌(4)、3,9-二羟基-6,8-二甲氧基-3-甲基-3,4-二氢-1(2H)-蒽酮(5)、3β-羟基-5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯(6)和D-阿洛醇(7).