大鼠Bdnf基因慢病毒载体的构建及其在骨髓间质干细胞中的表达

骨髓间质干细胞(MSCs)是目前基因工程正在探讨应用的靶细胞,为构建带有脑源性神经营养因子(Bdnf)基因慢病毒载体并使其在大鼠骨髓间质干细胞中表达,采用RT-PCR技术获得大鼠Bdnf基因编码区(CDS)片段,限制性内切酶酶切和基因重组构建慢病毒载体质粒PNL-BDNF-IRES2-EGFP,在脂质体介导下与包装质粒HELPER,包膜质粒VSVG共转染293T细胞包装生产慢病毒。所获慢病毒感染大鼠MSCs(rMSCs)后,PCR和免疫细胞化学法检测在rMSCs中Bdnf基因的插入和表达。结果显示所获的Bdnf基因经测序后与GenBank报道序列完全一致。重组慢病毒载体质粒PNL-BDNF-IRES2-EGFP经鉴定正确。三质粒共转染293T细胞成功,收集、浓缩病毒后测定其滴度为6.7×10~7TU/mL,PCR证实Bdnf基因插入病毒基因组。感染rMSCs后RT-PCR、免疫细胞化学染色及Western检测各组细胞均有BDNF蛋白表达,其中试验组BDNF-rMSCs更大量表达BDNF,与其余2组(Mock-rMSCs、rMSCs)比较差异具有统计学意义。构建带有Bdnf基因慢病毒载体并在大鼠骨髓间质干细胞中成功表达,为今后基因修饰干细胞的移植后长期观察研究奠定了基础。     

一株红假单胞菌的分离及生理特性研究

光合细菌在水处理和水生态修复领域应用前景广阔,对其生理特性研究具有重要价值。从武汉东湖分离得到一株不产氧光合细菌PUF1,通过对菌落形态、细胞超微结构、特征吸收光谱以及系统发育等分析,初步确定为红假单胞菌属(Rhodopseudomonas sp.)紫色非硫光合细菌。PUF1细胞呈直的或稍弯曲的杆状,长3.05—10.06μm,直径0.32—0.68μm,具有片层膜结构。PUF1培养物呈深紫红色,主要色素为细菌叶绿素a(Bchl. a)和类胡萝卜素。初始pH 6.0—8.0,光照强度500—3000 lx,稳定期细菌生物量无显著差异,但培养液pH>8.0会显著抑制PUF1最大光量子产量(Fv/Fm)。试验进一步研究了细菌不同生长阶段粗蛋白含量、ATP酶(ATPase)活性及Fv/Fm的变化规律。结果表明, PUF1不同生长阶段其蛋白含量有所差异,以稳定期为最高(>60%),而ATPase活性随培养时间的延长而逐渐降低。此外, PUF1光合作用与其生长状态也有一定的关系,具体表现为细菌生长周期内Fv/Fm变化规律适用单峰高斯模型,且以对数期Fv/Fm为最高。研究结果可为光合细...     

LRP16基因启动子克隆及特征分析

克隆LRP16基因启动子分子,并对启动子特征进行分析,预测启动子区调控元件,为深入研究LRP16基因的表达调控机制奠定基础。在NCBI的人类基因组数据库中截取并下载LRP16基因转录起始位点5′侧翼区2.7kb的基因组序列,设计PCR引物,从健康外周血单个核细胞中扩增,利用Genomatix程序对5′侧翼区近1000bp进行启动子特征分析,获得了与GenBank序列一致,长度为2.7kb的LRP16基因启动子DNA序列,该序列具有典型的真核生物RNA聚合酶Ⅱ启动子特征及多个核受体结合位点,如α视黄酸受体及RAR相关孤生受体。     

大鼠Bdnf基因慢病毒载体的构建及其在骨髓间质干细胞中的表达

骨髓间质干细胞（MSCs）是目前基因工程正在探讨应用的靶细胞,为构建带有脑源性神经营养因子（Bdnf）基因慢病毒载体并使其在大鼠骨髓间质干细胞中表达,采用RT-PCR技术获得大鼠Bdnf基因编码区（CDS）片段,限制性内切酶酶切和基因重组构建慢病毒载体质粒PNL-BDNF-IRES₂-EGFP,在脂质体介导下与包装质粒HELPER,包膜质粒VSVG共转染293T细胞包装生产慢病毒。所获慢病毒感染大鼠MSCs（rMSCs）后,PCR和免疫细胞化学法检测在rMSCs中Bdnf基因的插入和表达。结果显示所获的Bdnf基因经测序后与GenBank报道序列完全一致。重组慢病毒载体质粒PNL-BDNF-IRES2-EGFP经鉴定正确。三质粒共转染293T细胞成功,收集、浓缩病毒后测定其滴度为6.7×10⁷TU/mL, PCR证实Bdnf基因插入病毒基因组。感染rMSCs后RT-PCR、免疫细胞化学染色及Western检测各组细胞均有BDNF蛋白表达,其中试验组BDNF-rMSCs更大量表达BDNF,与其余2组(Mock-rMSCs、rMSCs)比较差异具有统计学意义。构建带有Bdnf基因慢病毒载体并在大鼠骨髓间质干细胞中成功表达,为今后基因修饰干细胞的移植后长期观察研究奠定了基础。     

囊萼花属─—中国玄参科新记录属及—新种

报道了我国玄参科的一个新记录属──囊萼花属ＣｙｒｔａｎｄｒｏｍｏｅａＺｏｌｌ，该属为印度－马来西亚分布，它经过泰国北部，缅甸与我国发生连系，到达我国云南贡山、屏边、金平。全世界有１１—１２种，我国（云南）首次记录两种，其中一种为新种。     

非离子表面活性剂在模拟人工湿地处理系统中的净化

非离子表面活性剂(NodriomcsurfaCtant,NIS)是近十余年来发展十分迅速的表面活性剂,1992年世界NIS产量为281万t,占表面活性剂总量的36%.1990年我国NIS产量仅4.2万动至1995年已达25万t1,2.NIS已成为环境中量大面广的一类有机污染物。本文利用模拟人工湿地处理系统对NIS的净化效果进行研究,以期找到一条有效调控NIS对环境污染的途径,为城市污水人工湿地处理系统的设计和运行管理提供科学依据。       

自制宽量程配液器

使用吸量管度量液体样品,尤其在大量重复取样或溶液分装,或处理腐蚀性、有毒样品时,效率低,而且不安全。使用吸球较安全,但效率仍无法提高。用配液器高工效,但价格较贵,且量程局限,配套性较差。我们用实验室常规器具制成一种宽量程配液器,仍使用各规格吸量管,提高了工效。现将制作方法介绍如下:     

闽东白背飞虱发生情况的观察

<正> 白背飞虱Sogatella furcifera(Horvath)是闽东山区水稻主要害虫之一。1961—1965年笔者曾作过一些调查研究,1970年以后又作了补充观察,现将所得资料整理如下。 一、垂直分布与田间消长 闽东地处亚热带,背山面海,地形复杂。海拔500米以上山区年平均气温约15.5℃,以种植单季稻为主。随着海拔高度和耕作制度的不同,白背飞虱的发生差异很大。经多年调查,并参考有关县病虫测报站资料,其垂直分布和田间消长情况,如表1、2。 从表1、2看出: 1.白背飞虱虫口密度随着海拔高度增高而加大,以海拔500米以上的山间盆地稻田分布较多。     

光强和单色光对长春花愈伤组织培养的影响

长春花(Catharanthus roseus)细胞系(CL-89~#)由本研究室从长春花叶子诱导而来。培养基是改进的SH培养基,含有2,4-D 0.5mg/L(单位下同),KT 5,Biotin 0.1,VB_1 10,VB_6 5,蔗糖30 g/L,起始pH值为5.8,培养温度26±1 C。以450 W自振荧光灯为光源,接种后的三角瓶排成5排,各排的光强依序为。5 000、3 000、2 000、1 200、300 lx左右。另外分别用白、红、黄、蓝、绿滤光膜将15 W白炽灯变为白光、红光、黄光、蓝光、绿光。培养细胞的三角瓶均布于光源周围。不同时间取样,     

马松蒿属(玄参科)的名实问题

发现马松蒿Xizangia serrata Hong与齿叶翅茎草Pterygiella serrata Hand．—Mazz．属于同一种,因此马松蒿及其代表的单型属——马松蒿属Xizangia Hong均应处理为异名。