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351.
以绵羊β-乳球蛋白基因(B—Lactoglobulin,β-LG)为转基因表达框架,将人G-CSF,(Human Granulocyte Colony Stimulating Factor,4G-CSF)基因与报告基因一增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescenct Protein,EGFP)基因作为双表达单元拼接到口β-LG基因的第一外显子处,并在G-GSF基因两侧引入同源重组位点loxP、fox2272,将打靶基因表达构件β-LG-hG-GSF-IRES-EGFP(总长9.3kb)分为两段进行构建,片段Ⅰ(长5.9kb)与片段Ⅱ(长5.6kb)两段重叠部分为2.2kb。向小鼠受精卵细胞质共注射构件片段Ⅰ、Ⅱ和NLS(核定位信号)3个基因片段。对仔鼠进行整合与表达的检测。PCR-Southem杂交检测结果表明,片段I的整合率为62.3%(86/138),片段Ⅱ的整合率为54.3%(75/138),片段Ⅰ、Ⅱ共整合(包括两片段分别整合和染色体外同源重组两种情况)的小鼠为62只,整合率为44.9%(62/138),其中在双阳性转基因小鼠中发生染色体外同源重组的几率为80.6%(50/62)。RT-PCR-Southem检测了10只发生染色体外同源重组的转基因雌性小鼠,hG-GSF基因的表达率为90%(9/10),EGFP基因的表达率为100%(10/10),通过对其乳汁紫外吸收光谱的检测,EGFP基因的表达率为50%(5/10)。上述结果表明,染色体外同源重组结合细胞质注射技术研制转基因动物是简便实用的转基因途径。 相似文献
352.
杜氏盐藻两种碳酸酐酶基因启动子的克隆和功能研究 总被引:12,自引:0,他引:12
将克隆得到的杜氏盐藻DCA7和CA基因的启动子区与bar基因和NOS polyA终止子片段融合,分别构建成pMDDC-B和pMDC-B转基因杜氏盐藻表达载体。用基因枪法将两种表达载体转化人杜氏盐藻细胞,通过除草剂草丁膦筛选培养获得转化藻株,对转化藻株进行分析。对转化杜氏盐藻藻株的筛选培养结果表明:pMDDC-B和pMDC-B载体中的外源bar基因能在杜氏盐藻细胞中稳定或瞬时表达。同时在氦气压力为690kPa条件下,微弹轰击2次比微弹轰击1次或3次的效果更好。对pMDDC-B转化杜氏盐藻得到的稳定表达的转化藻株进行的PCR和Southern印迹分析的结果表明:外源的bar基因确已整合到杜氏盐藻基因组中。Northern印迹分析表明:DCA7基因启动子驱动bar基因在杜氏盐藻细胞中的表达效率受氯化钠浓度梯度调控。推测首次克隆得到的DCA7基因启动子可能是一种活性高、安全性好的高渗诱导性启动子;杜氏盐藻DCA7和CA基因启动子区的GT高度重复序列,可能与杜氏盐藻高度耐盐的分子机制有关。 相似文献
353.
沿淮地区土壤有效硫状况及对硫的需求 总被引:5,自引:0,他引:5
分析了由黄土性古河流冲积物、近代黄泛沉积物、下蜀黄土等3种成土母质发育的黄褐土、潮土、砂姜黑土、水稻土等4个土类共44个土样的有效S含量,并结合土地利用方式和施肥,研究了土壤有效S的丰缺及输入与输出状况,预测了对S的需求.结果表明,土壤有效S含量高低顺序为水稻土>砂姜黑土>黄褐土>潮土,不同土地利用方式为水田>旱地.土壤有效S缺乏频率,按成土母质排序是黄土性古河流冲积物>下蜀黄土>近代黄泛沉积物,潜在缺S频率高低依次是黄土性古河流冲积物>近代黄泛沉积物>下蜀黄土;从土壤类型看,是砂姜黑土>黄褐土>潮土>水稻土,潜在缺S是水稻土>潮土>砂姜黑土>黄褐土.土壤有效S缺乏面积,以砂姜黑土最大,达7.0×10 相似文献
354.
黑嘴鸥种群的遗传分化与迁徙模式 总被引:1,自引:0,他引:1
用分子生物学方法研究了黑嘴鸥(Larus saundersi)种群的遗传结构和分化.对我国黑嘴鸥现存的3个地方种群50个样本的线粒体DNA控制区部分片段进行了序列测定,结合已公布的的两个韩国样本的序列,比对后所获得的550 bp的序列中,共发现49个变异位点,定义了37种线粒体单元型,其中仅1种为我国3个地方种群间共享单元型,多数为各地方种群内特有.我国3个地方种群内的单元型多样性和核苷酸多态性都很高;4个地方种群合并成一个大种群时, 其线粒体单元型多样性与核苷酸多样性仍很高,分别为0.974%±0.012%和0.510%±0.042%.进一步分析表明,4个地方种群间核苷酸歧异度在0.433%-0.585%之间,种群分化程度FST在-0.03176-0.48063之间,基因流Nm在1.03-33.79之间,平均遗传距离为0.0051±0.0011.UPGMA系统发生树及最大简约网络图表明, 黑嘴鸥的演化关系呈现星状辐射,单元型之间呈现一种混杂的分布格局,地方种群没有形成明显的系统地理结构.同时运用彩色旗标技术,初步掌握了4个地方种群迁徙规律.对比分子研究结果,验证了不同地方种群间的遗传分化与其迁徙模式基本一致,同时认为黑嘴鸥不同地方繁殖种群从越冬地返回繁殖地的过程中会发生交叉.最后,鉴于黑嘴鸥不同地方种群间的遗传分化不显著,其迁徙行为具有差异性,建议在保护和遗传管理中应分别对待. 相似文献
355.
调查青海省0~14岁健康儿童百日咳、白喉、破伤风抗体水平,抽样评价预防接种质量。在全省六州一地一市各选择1个县,对0~14岁健康儿童进行抗体检测。结果显示,百日咳、白喉、破伤风抗体阳性率分别为93.42%、94.96%和92.93%。不同地区0~14岁健康儿童百日咳、白喉和破伤风抗体阳性率虽有差别,但都达到较高的抗体水平;个别地区抗体水平低,说明青海省儿童计划免疫工作存在薄弱环节。 相似文献
356.
圆盘菌科Orbiliaceae真菌是小型盘菌,由于不清楚其经济价值,人们一直认为它是个不重要的类群,很少有人进行过研究(Alexopoulos et al.,1996)。Pfister(1994)报道粪生圆盘菌Orbilia fimicola Jeng & Krug是捕食线虫丝孢菌节丛孢属Arthrobotrys的有性型,从而引起真菌学家们的关注。捕食线虫丝孢菌以其巧妙的菌丝变态器官捕食线虫,长期以来一直吸引着众多真菌学家的注意,进行了广泛的研究。在分类学方面,捕食线虫丝孢菌分类的主要依据靠分生孢子的形态,没有真正体现出其自然发育的亲缘关系(Hagedorn & Scholler, 1999)。圆盘菌属Orbilia F… 相似文献
357.
358.
王秀秀王芳王忠超王颜刚赵文娟 《现代生物医学进展》2012,12(21):4108-4112
目的:探讨术前血清促甲状腺激素(TSH)水平与甲状腺结节良恶性的关系。方法:回顾性分析了1499例甲状腺结节手术切除患者术前血清TSH、甲状腺B超,手术记录、术后病理诊断报告。根据术后病理报告判定甲状腺结节良恶性,分析术前血清TSH水平在甲状腺良恶性结节中的不同分布。结果:分化型甲状腺癌(DTC)患者术前血清TSH水平明显高于甲状腺良性结节组(2.179±2.017vs1.259±0.884μIU/mL),P<0.001;在DTC患者中,有淋巴结转移较无淋巴结转移、TNM分期III、IV期较I、II期以及肿瘤直径≥1cm较<1cm的患者术前血清TSH明显升高(均P<0.001)。结论:术前血清TSH水平是预测甲状腺结节良恶性的重要指标。 相似文献
359.
目的:通过病历中发生的不良事件及其风险度来评价病历质量,目的为加强病历环节和细节的质控,减少或杜绝病历中不良事件的发生,提高病历书写质量,保证医疗安全,减少医疗纠纷。方法:随机抽查2007-2010年某二级医院住院病历4837份,对其进行不良事件风险评估,对病历的终末质量和环节质量进行综合评价分析,找出影响医疗质量的相关联因素。结果:通过对某二级医院2007-2010年随机抽查的终末病历和病房中运行病历的不良事件风险评估,数据经过统计学处理后P值<0.01,说明总的病历中不良事件发生率年度间逐年减少,有极为显著的差别,证明此种病历评价方法切实可行。结论:病历中不良事件风险评估,是减少病历中不良事件发生的有效办法,可以消除病历书写中存在的医患矛盾和医疗纠纷隐患。 相似文献
360.