海马中特异性敲除Dicer1蛋白的小鼠的构建和表型

目的：在小鼠海马中特异性敲除RNA酶Ⅲ酶（RNAase Ⅲenzyme）Dicer1,并初步观察Dicer1在小鼠海马的生长发育中起到的基本作用。方法：用在海马中特异性表达Cre酶的Frizzled9-CreERTM小鼠和Dicer1（flox/flox）小鼠交配,得到Dicer1（flox/＋）;Frizzled9-CreERTM小鼠,并再次与Dicer1（flox/flox）交配,得到Dicer1（flox/flox）;Frizzled9-CreERTM小鼠,用他莫昔芬（TM）诱导Cre酶的表达,使Dicer1在海马中特异性敲除,观察小鼠的表型。结果：TM诱导的Dicer1全敲的小鼠出生率低,大部分在出生后40天左右死亡,海马中CA3区域变薄,猜测与海马中缺乏Dicer1酶有关。结论：Dicer1是miRNA产生过程中的重要因素,在海马中敲除Dicer1后影响小鼠发育,小鼠易猝死。     

云南省扶桑绵粉蚧的分布和危害

【背景】扶桑绵粉蚧是一种危险的外来入侵害虫,自2008年在我国首次发现以来,其发生范围急剧扩大。但有关云南省扶桑绵粉蚧的发生情况缺乏系统的调查报道。【方法】2010年3月~2013年3月,对云南省16个州（市）72个区（市、县）的扶桑绵粉蚧的分布与危害情况进行了系统的调查,并对其天敌情况进行了初步调查。【结果】扶桑绵粉蚧在云南文山州富宁县,西双版纳州景洪市、勐海县,德宏州芒市,红河州元阳县、蒙自市,保山市隆阳区,丽江市华坪县,楚雄州永仁县,怒江州泸水县8个州（市）共10个市（县）有零星分布。其寄主植物共14科18属19种,包括园林观赏植物3种、经济作物1种、蔬菜作物2种、粮食作物1种、杂草11种,其中有12种植物在我国其他疫区未见报道;调查过程中发现其天敌3种。【结论与意义】扶桑绵粉蚧在云南省呈零星点状分布、疫区间受害情况有差异,未对经济作物造成严重损害。本研究可为云南省开展扶桑绵粉蚧的检疫防控提供参考。     

女性泌尿生殖道支原体感染及耐药性观察

目的了解女性泌尿生殖道感染患者解脲支原体(Uu)和人支原体(Mh)感染及耐药情况,指导临床合理应用抗菌药物。方法采用法国梅里埃公司生产的IST2支原体培养及药敏试剂盒,对932例女性泌尿生殖道感染患者进行培养及药敏试验。结果 932例患者中支原体阳性426例,总检出率45.7%,其中Uu阳性354例(37.9%),Mh阳性14例(1.5%),Uu+Mh阳性58例(6.2%);药敏结果表明,Uu与Mh对多西环素、交沙霉素、四环素较为敏感,Uu对环丙沙星、氧氟沙星耐药率较高,而Mh对克拉霉素、红霉素、阿奇霉素耐药率较高。结论女性泌尿生殖道支原体检出率较高,主要以Uu为主,Uu和Mh对多种抗菌药物耐药,应引起临床重视。     

双歧杆菌四联活菌片联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎患者肠黏膜氧化应激损伤的修复作用

目的探讨双歧杆菌四联活菌片联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜氧化应激损伤的修复作用。方法选取2016年10月至2018年12月我院内科门诊就诊的活动期轻、中度UC患者92例,随机分为观察组和对照组各46例。两组患者均给予美沙拉嗪肠溶片1.0 g/次,4次/d,口服。观察组在此基础上加用双歧杆菌四联活菌片1.5 g/次,3次/d,口服。两组均连用8周。观察两组患者治疗前后血清氧化应激指标[氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)和过氧化脂质(LPO)]、肠黏膜屏障受损情况指标[血清降钙素原(PCT)和二胺氧化酶(DAO)]及肠镜下肠黏膜评分变化,并比较临床效果。结果治疗8周后,两组患者血清ox-LDL、LPO、PCT和DAO水平及肠黏膜评分均较治疗前显著下降(均P<0.05),且治疗后观察组患者上述指标水平下降幅度大于对照组(均P<0.05)。观察组患者临床总有效率(95.65%)高于对照组(82.61%),差异有统计学意义(χ^2=4.04,P<0.05)。结论双歧杆菌四联活菌片联合美沙拉嗪对轻中度活动性UC患者的疗效显著,能降低患者血清ox-LDL、LPO、PCT和DAO水平,对肠黏膜氧化应激损伤具有良好的修复作用。     

靶向E2F1的shRNA抑制眼内视网膜母细胞瘤生长

视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)中由于Rb基因缺失或失活,转录调控因子E2F1始终处于活化状态,细胞不断增殖,E2F1活性增加是恶性肿瘤的普遍现象．根据人E2F1基因设计了3段shRNA,构建RNA干扰表达载体pSilencer-shE2F1,瞬时转染人视网膜母细胞瘤细胞株HXO-Rb-44和人肝癌细胞株SMMC-7721,通过荧光定量PCR检测E2F1表达水平的变化,PI (碘化丙锭)染色检测细胞周期各时相细胞数量以检测其对细胞周期的影响．根据筛选出的有效shRNA序列构建腺病毒载体并包装出腺病毒Ad-shE2F1,在裸鼠前房模型中,体外按50 moi的感染系数感染稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的人视网膜母细胞瘤细胞株48 h后,收集细胞,将2×10⁵细胞注射到裸鼠眼前房内,连续观察眼内肿瘤细胞生长情况并拍照记录．通过转染肿瘤细胞株检测E2F1转录水平,筛选到1个能明显抑制肿瘤细胞内E2F1表达的shRNA序列,并使细胞周期中S期细胞数减少．经Ad-shE2F1感染的RB肿瘤细胞与对照相比较,其在裸鼠眼前房内肿瘤生长减缓．结果说明,有效抑制hE2F1表达的shRNA具有抑制体内外人视网膜母细胞瘤生长的作用．     

2003～2007年中国风疹病毒基因特征分析

本研究用Vero细胞或Vero/SLAM细胞从我国10个省(直辖市、自治区,下同)2003～2007年风疹暴发和散发病例的咽拭子标本中分离到57株风疹病毒,用RT-PCR方法扩增了57株风疹病毒E1基因1 107个核苷酸的片段,并对该PCR产物进行序列测定和分析.结果提示,在基于WHO基因定型靶序列739个核苷酸片段构建的基因亲缘关系树上,其中55株风疹病毒株属于1E基因型,相对于其他国家的1E基因型,形成一个独立分支;另外2株风疹病毒属于2B基因型.57株风疹病毒大部分核苷酸的突变为无义突变,氨基酸序列高度保守,除了2株风疹病毒在E1蛋白血凝抑制和中和位点区域第212位氨基酸由Thr变为Ser,其他病毒株均无重要抗原位点的改变;所有我国已分离到的1E基因型风疹病毒在E1蛋白第338位氨基酸共享突变位点(Leu338→Phe338),而其他基因型以及其他国家的1E基因型风疹病毒在该位点均未发生突变,提示该氨基酸(Phe338)可能是我国1E基因型风疹病毒所特有.2003～2007年在我国10个省均分离到1E基因型,而2B基因型只在2006年从四川省的越南输入病例中分离到,提示1E为绝对优势基因型,2B基因型为输入基因型.与1979～1984年和1999～2002年我国流行的风疹基因型不同,发生了基因型的更替,近年我国风疹的流行是由1E基因型为主的风疹野病毒的多个传播链引起.     

山楂叶螨对胡瓜钝绥螨的吸引作用研究

采用两侧吸引作用试验测定天敌胡瓜钝绥螨Amblyseius cucumeris Oudemans在田间对山楂叶螨的搜索和控制能力。结果表明：山楂叶螨不同螨态对胡瓜钝绥螨均有显著的吸引作用,排泄物对胡瓜钝绥螨没有明显的吸引作用。山楂叶螨对胡瓜钝绥螨的这种吸引作用说明胡瓜钝绥螨在田间具有自动搜索山楂叶螨的能力,可用于山楂叶螨的生物防治。     

小鼠锌指蛋白基因ZF-12的克隆与基因结构以及5′端启动子活性的分析

人类锌指蛋白ZNF191为类krueppel转录因子,其可能与神经精神病、心血管疾病和肝癌等疾病的发生或发展有关,为了采用基因敲除模型来探讨它的生理功能,克隆和定位其在模式生物（小鼠）中的同源基因,并阐明其结构特征是必需的。通过筛选小鼠λ噬菌体基因组文库,获得了它在小鼠中的同源基因ZF－12基因组全长片段。序列分析表明：该基因含有4个外显子和3个内含子,内含子都遵循GT／AG的剪接模式;第91密码子处存在单核苷酸多态性;可能存在2种大小不同的3′端的非翻译区（3′－UTR）;与锌指蛋白基因Zfp-35相连锁,可将其定位于18号染色体的B3－C带上或附近;5′端上游存在1个约250bp高度富含GC的启动子序列。ZF－12基因的5′端系列缺失荧光素酶基因报告载体的瞬时转染实验表明:其上游序列（-762～ 70bp）具有启动子转录活性,在更上游的序列（－824～-762bp)上可能存在负调控元件。这项研究结果为进一步的基因敲除研究奠定了基础。     

秦岭油松针叶挥发性物质的成分分析

采用水蒸（蒸馏法和GC／MS方法对秦岭林区油松针叶挥发成分进行分析测定,鉴定出油松针叶中65种挥发性成分,其化学成分以萜烯类(79．39%)、酯类(9．16％)、醇类(10．36％)、醛类(0．25%)等为主,化合物则以α-蒎烯(5．92％)、β-蒎烯(6．09％)、乙酸龙脯酯(8．69%)、β-石竹烯(28．62%)、α-石竹烯(5．97%)、α-杜松醇(3．27％)、异杜松醇(3．44％)、萜烯醇(2．2j％)、杜松二烯(11．33%)为主。     

小儿推拿联合小儿消积止咳口服液和阿奇霉素治疗MPP患儿的临床疗效及对免疫功能和炎性因子的影响

摘要 目的：探讨小儿推拿联合小儿消积止咳口服液和阿奇霉素治疗肺炎支原体肺炎（MPP）患儿的临床疗效及对免疫功能和炎性因子的影响。方法：选取2018年3月-2019年6月期间在我院接受治疗的80例MPP患儿。按照治疗方法的不同分为对照组（阿奇霉素和小儿消积止咳口服液治疗,n=40）和研究组（小儿推拿、小儿消积止咳口服液、阿奇霉素治疗,n=40）。观察两组临床疗效以及治疗期间患儿症状改善情况,对比两组外周血T淋巴细胞亚群、不良反应和血清炎性因子。结果：与对照组比较,研究组的临床总有效率更高（P<0.05）。与对照组比较,研究组肺部啰音、咳嗽和X线片肺部病灶消失时间、退热时间均较短（P<0.05）。与对照组比较,研究组治疗14 d后CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺更高,CD8⁺更低（P<0.05）。与对照组比较,研究组治疗14 d后白介素-1β（IL-1β）、C反应蛋白（CRP）、白介素-6（IL-6）更低（P<0.05）。两组不良反应发生率对比无统计学差异（P>0.05）。结论：小儿推拿联合小儿消积止咳口服液和阿奇霉素治疗MPP患儿,可促进症状改善,优化临床治疗效果,可有效调节患儿免疫功能和炎性因子水平。