球孢白僵菌种群野生菌株异核现象的分子验证

球孢白僵菌28S rRNA基因D11域由于一内含子的存在与否,引起这一区域的扩增产物有两种片段类型（约520bp及120bp),将此作为分子标记分析了球孢白僵菌的117个菌株,发现17％菌株的扩增产物为双片段类型,即为异核体,异核体在不同种群中的分布频率因地理生态条件而异,单孢分离分析表明,异核体的分离频率约为35％,RAPD检测结果说明异核体在准性循环中发生了不同程度的遗传交换及遗传重组,球孢白僵菌异核体在继代培养中极不稳定。     

粉拟青霉种内RAPD多态性分析*

对来自不同地理来源和不同寄主的 １３株粉拟青霉Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｆａｎｉｎｏｓｕｓ和其他３种拟青霉及１株球孢白僵菌进行ＲＡＰＤ分析,从ＲＡＰＤ扩增结果可知粉拟青霉种内具丰富的遗传多样型。ＲＡＰＤ扩增指纹图谱能有效地分辨不同菌株的基因型,可用于监测生防效果的菌株示踪。聚类分析结果表明种间的遗传差异要明显大于种内的差异。菌株间差异是和地理来源相关,而和寄主不相关。     

被毛孢属一新种——长座虫草的无性型

报道长座虫草Cordyceps longissima Kobayasi的无性型为长座被毛孢新种Hirsutella longissima sp.nov.。用子囊孢子分离得到的无性型与子座柄部粘片所见的被毛孢相同;用分离菌在米饭培养基上人工诱发出的子座与天然子座相似,这表明长座被毛孢为长座虫草的无性型。     

枝顶孢属一新记录种

从采自安徽祁门枯牛降自然保护区的一种虫草［Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ．ｓｐ．］的内菌核上分离出一株产生孢梗束的丝孢菌,鉴定为地生枝顶孢,在中国属首次报道。地生枝顶孢Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ　ｔｅｒｒｉｃｏｌａ（Ｍｉｌｌｅｒ　ｅｔ　ａｌ）Ｇａｍｓ,Ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｕｍ－ａｒｔｉｇｅ　Ｓｃｈｉｍｍｅｌｐｉｌｚｅ（Ｈｙｐｈｏｍｙｃｅｔｅｓ）,ＧｕｓｔａｖＦｉｓｈｅｒＶｅｒｌａｇ,Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ,ｐ．６７,１９７１．Ｆｕｓｉｄｉｕｍ　ｔｅｒｒｉｃｏｌａ　Ｍｉｌｌｅｒ,Ｇｉｄｄｅｎｓ　＆　Ｆｏｓｔｅｒ,Ｍ…     

黄山地区红豆杉中产紫杉醇内生真菌的分离和筛选

从黄山地区红豆杉中分离得到107株内生真菌,利用薄层层析(TLC)方法对107株内生真菌的发酵代谢物进行了初筛,首次筛出8株可产紫杉醇或其类似物的菌株。再通过高效液相色谱(HPLC)对其作了进一步分析,发现有1株内生真菌菌株发酵代谢物的吸收峰与紫杉醇标准品吸收峰保留时间一致。同时结合以中国仓鼠卵巢CHO细胞株作为肿瘤细胞模型,用Resazurin法检测生长抑制率,对经筛选出的1株内生真菌次生代谢产物进行体外抗肿瘤活性试验,该菌株的代谢物对CHO细胞的抑制率高达71.28%。通过对该菌株的显微形态观察,从菌丝、孢子的形态和产孢子的特征等初步判定HQ-24是曲霉(Aspergillus sp.)。     

蜂头层束梗孢原生质体制备及再生条件研究

从蜂头虫草(Cordyceps Sphecocephala)上分离的无性型蜂头层束梗孢(Hym enostilbe sphecophala)为出发菌株,进行原生质体制备及再生条件的研究。将培养48h的菌丝体用3%溶壁酶于28℃酶解3.5h,原生质体产量可达2.5×107个/mL。原生质体在0.6mol/L硫酸镁的黄豆粉培养基上再生率最高,为0.46%。在50℃热灭活30分钟,原生质体再生率为零。     

柱形虫草及其紫色野村菌无性型

报道安徽省滁州市琅琊山林场引起蜘蛛流行病的虫草真菌,经鉴定为柱形虫草Cordycepscylindrica,属中国首次报道。在子座柄部可见一小块灰紫色的分生孢子层,镜检表明:由此组织分离菌株的形态学特征与后来通过子囊孢子分离获得的菌株是一致的。柱形虫草无性型为紫色野村菌Nomuraeaatypicola,其培养特征也为国内首次描述。另外,在同一生境的地上叶背面,可见许多蜘蛛被紫色野村菌感染致死,虫尸被覆淡紫色菌膜,但未见孢梗束或子座。     

一种白僵菌代谢产物中生物活性物质的研究 Ⅰ.具有清除自由基的活性物质的分离和制备

通过对白僵菌Beauveriasp.的液体培养及生物活性测定,发现该菌代谢产物具有较强的清除自由基的活性,我们用甲醇成功地提取出该活性成分,同时用色谱等方法对该活性成分进行了分离和制备,并用高压液相色谱法和DPPH薄层试验对其纯度及活性进行了检验,得到了具消除自由基活性的纯化合物P-24-3。     

中国北方球孢白僵菌的遗传多样性和种群遗传结构

将在中国北方13省采集分离的622株球孢白僵菌按省份划分成13个亚种群,其中寄主可以鉴定到目的8目昆虫和蜘蛛目的568株按目划分成9个亚种群,用ISSR(简单重复序列区间)分子标记技术进行遗传多样性和种群遗传结构分析.结果表明:各多样性指数皆显示我国北方地区球孢白僵菌的遗传多样性水平较高,种群的异质性较强.其中内蒙古亚种群的遗传多样性和种群异质性最高,河南亚种群最低;鳞翅目亚种群的遗传多样性和种群异质性最高,蜘蛛目亚种群最低.河南与辽宁亚种群间以及蜘蛛目与螳螂目亚种群间的遗传分化系数以及遗传距离最大,宁夏与陕西亚种群间以及鞘翅目与膜翅目亚种群间最小.按寄主目划分的亚种群间的平均遗传分化系数和平均遗传距离均低于按省份划分的亚种群.这些结果以及基于遗传距离的亚种群聚类分析都证明我国北方球孢白僵菌的遗传谱系与寄主来源和地理来源均无关系.我国北方球孢白僵菌的变异主要是由各不同寄主目内科间及属间的变异造成的,也是由各省不同采集地以及采集地内部不同微生境间的差异造成的.