我国虫草产业发展现状、问题及展望——虫草产业发展金湖宣言

虫草是寄生于昆虫、少数真菌和植物体上的一类真菌,是广义虫草属Cordyceps s.l.真菌的总称,是具有营养、保健和医疗功效的宝贵生物资源。目前我国的虫草产业涉及了冬虫夏草Ophiocordyceps sinensis、蛹虫草Cordyceps militaris、蝉花Isaria cicadae及其相关真菌,已经形成了一个巨大的产业,实现了较高的经济价值和社会效益。本文从产业发展历史、产品研发、功效及市场等方面对我国虫草产业发展现状进行了总结,结合最新科学研究进展,分析了虫草产业中存在的一些问题,提出了促进产业健康发展的建议,并对产业前景进行了展望。     

球孢白僵菌野生及转基因菌株的退化

球孢白僵菌在人工培养基上继代培养容易发生退化变异,表现为菌丝徒长以及产孢量减少和毒力的逐渐下降,给真菌杀虫剂的生产和使用造成较大的损失.没有丢失被插入的外源毒力基因的工程株同样出现退化.培养基成分和含水量以及培养温度和光照等环境因子皆可不同程度地诱发退化的发生,但退化主要由其遗传机制决定,包括线粒体基因突变、异核现象、准性生殖、核基因突变以及有性重组等;菌落局变实质上也是菌种老化的征兆.真菌杀虫剂生产中防止退化的对策除减少传代次数外,还要根据具体菌株确定适宜的环境控制细则.     

球孢白僵菌线粒体序列分析及系统进化树构建

线粒体是真核细胞的重要的细胞器,在细胞能量代谢和细胞衰老方面扮演了重要角色,同时也是研究物种进化关系的重要资源。本文应用球孢白僵菌的线粒体序列分析了白僵菌与粪壳菌纲其他11属的13种真菌间的进化关系,为阐明球孢白僵菌的进化地位提供了新的论据。线粒体编码的rnl,rns,25个tRNAs和14个蛋白质基因均由同一条链编码,大部分的tRNA分布为三个tRNA簇,这与粪壳菌纲的其他物种相似。与NCBI上公布的序列比对发现球孢白僵菌线粒体序列与蝇蚧霉线粒体序列最相似,相似率达73%,用14个蛋白编码基因通过邻接法(Neighbor-joint)和最大简约法(Maximum parsimony)构建的系统进化树也得到相同结论,其支持率均为100%。     

细脚拟青霉不同菌株清除DPPH自由基活性研究

在初筛基础上选择不同地理来源的10株细脚拟青霉,用二苯基苦基苯肼自由基酶标仪法比较了不同提取部位的DPPH自由基清除率。结果表明在所有供试菌株中细脚拟青霉的两个菌株清除自由基活性均较高。10株细脚拟青霉间的清除自由基活性少数相似,多数差异显著;发酵液和菌丝体提取物清除自由基活性不同;菌丝体不同溶剂先后提取所得物清除率也不同,其中氯仿提后甲醇提取物无论提取量,还是活性均较高,5分钟时的清除率最少也有66.0%(Pt02菌株),最高是Pt69菌株达到93.5%,Pt57菌株的清除率为92.8%;氯仿提取量极少,活性也不高;经氯仿和甲醇提取后的水提物,得率只有甲醇的一半左右,而活性与氯仿提取物相当,在14.11%~45.3%之间。     

粉拟青霉种内nrDNA ITS分析

通过对20株粉拟青霉(Paecilomyces farinosus)ITS1-5．8S-ITS2(rDNA)区域序列测定,确定了粉拟青霉ITS序列,而韩国学者测定的粉拟青霉ITS序列应为细脚拟青霉(P．tenuipes)的序列。序列比较发现,韩国2株未定名的拟青霉(Paecilomyces spp．)菌株(KACC40219、KACC40221)应为粉拟青霉。基于本研究构建的邻接树推断,粉拟青霉的有性型可能是一种虫草。粉拟青霉的起源应为单源的。不同的粉拟青霉菌株的ITS序列具有多态性,源于同一地区的菌株的ITS变异也较大。ITS序列的证据表明,粉拟青霉菌株间的差异与地理来源及寄主均无相关性。     

台湾虫草及其无性型关系的分子确证

采用PCR技术,以rDNA-ITS区为分子指标,对台湾虫草Cordyceps formosana及其无性型黄山被毛孢Hirsutella huangshanensis进行测序和比较分析,以进一步确定两者的对应关系。结果表明：两者的序列完全相同,从而在分子水平上证明了黄山被毛孢是台湾虫草的无性阶段。系统进化树显示台湾虫草的无性型归为被毛孢属较为合理。     

β-蜕皮激素对蛹虫草液体培养菌丝体生长及代谢产物的促进作用

The effects of β-ecdysone on mycelial dry weight (MDW) and the yield of extracellular polysaccharide (EPS), intracellular polysaccharide (IPS) and cordycepin of Codyceps militaris in submerged cultivation was investigated. Adding 12mg/L of β-ecdysone to the culture medium, the MDW, the secretion volume of EPS per unit of MDW and total yield of EPS were increased by 18.5%, 181.7% and 63.2%, respectively. The yield of IPS was enhanced by 29.2%, when 1.2mg/L of β-ecdysone was added. When 4mg/L of β-ecdysone was provided, the amount of cordycepin per unit of MDW and the total yield of cordycepin were increased by 65.4% and 84.7%, respectively. These results demonstrated that β-ecdysone promoted the yield of MDW, EPS, IPS and cordycepin of Codyceps militaris mycelia, though this effect varied among different components. Significantly, β-ecdysone showed a more positive role in secondary metabolite (cordycepin) accumulation than in primary metabolite (IPS) production and growth of mycelia. Furthermore, β-ecdysone stimulated the secretion of EPS.     

虫草属一新纪录种——拟细虫草

A Cordyceps specimen collected on a coleopteran from National Natural Conservation of Guniujiang, Shitai County, Anhui Province in September 2000, was identified as Cordyceps gracilioides Kobayasi, which is a new record to China.Cordyceps gracilioides Kob. Science Reports of Tokyo Bunrika Daigaku, 140～143, 1941. Plate ⅠSingle stroma, 31.4mm long, germinates from the head of host. Stipes cylindrical, 26.9mm long and 2.1mm in diameter, pale yellowish brown to pale reddish brown. Fertil…     

两种虫生真菌酯酶同工酶酶谱多样性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对不同来源的22株球孢白僵菌和21株粉拟青霉酯酶同工酶的酶谱多样性进行了研究,由酯酶图谱可知同种不同菌株间具有丰富的遗传多样性,可作为菌株亲缘关系的可靠的遗传标记。遗传距离进行聚类分析,结果表明球孢白僵菌、粉拟青霉不同菌株间亲缘关系的远近与寄主范围无任何相关性,与菌株来源地在某些菌株间存在一定的相关性。     

安徽的虫草及其相关真菌I.

报道疣孢虫草Cordyceps phymatospora为新种;球孢虫草C. bassiana 及其无性型Beauveria bassiana, 长座虫草C. longissima 及其无性型 Hirsutella longissima, 台湾虫草C. formosana 及其无性型 Hirsutella sp., 拟细虫草C. gracilioides和丝虫草C. filiformis 等19种虫草及其部分相关真菌。模式标本保存在安徽农业大学虫生菌研究中心(RCEFAAU)。