人类博卡病毒(HBoV)非结构蛋白NS1基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备

目的:克隆、表达、纯化人类博卡病毒(HBoV)非结构蛋白NS1,制备抗NS1多克隆抗体。方法:利用PCR扩增HBoV非结构蛋白NS1基因,将其克隆至pMAL-c2X表达载体上,重组质粒转化大肠杆菌DH10B,IPTG诱导表达。表达的融合蛋白经Amylose Resin亲和层析柱纯化后,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。用间接ELISA法检测抗体效价。结果:原核表达融合蛋白MBP-NS1,并获得了其多克隆抗体,抗体效价达到1∶32000。结论:在原核表达系统中表达、纯化了融合蛋白,制备抗NS1多克隆抗体,为进一步研究该病毒非结构蛋白基因的转录和翻译机制提供可靠的工具。     

艾比湖大白鹭的繁殖及雏鸟生长发育模式

2009年3—10月对新疆艾比湖大白鹭(Egretta alba alba)的巢、卵及雏鸟的生长发育模式进行了研究。结果表明,大白鹭的巢基厚度大于巢深(t=6.06,P0.01),巢外径远大于巢内径(t=21.53,P0.01),其目的是增加巢的稳定性和减少幼鸟跌出巢外的概率;窝卵数3～5枚(3.86±0.69),卵重44.00～60.00g(53.94±3.96),卵体积47.18～62.00cm3(55.19±4.09);双亲孵卵(26～28d),共同育雏(55～60d)。测量了4巢13雏26日龄以内的生长发育数据,并利用Gompertz方程对雏鸟的主要生长指标进行拟合,拟合结果将雏鸟生长发育划分为3个阶段:1)器官形成,生长速度准备加快的时期;2)物质积累,生长速度加快并逐渐过渡到中速时期;3)由物质积累逐渐过渡到物质消耗大于积累,生长速度较慢,雏鸟准备出飞。     

基于结构方程模型的兴安落叶松天然林更新影响因素

以大兴安岭新林林业局翠岗林场49块兴安落叶松不同蓄积占比的固定样地调查数据为基础,分别从林分非空间结构、林分空间结构、林木多样性、土壤条件和立地条件5个方面37项观测指标,在相关性分析的基础上,构建林分尺度更新密度和更新多样性(包括树高和地径)的结构方程模型,并计算各路径的直接、间接和总影响系数,量化和提取影响大兴安岭地区兴安落叶松天然林更新密度和更新多样性的关键可控因素,为该地区森林的可持续经营提供理论基础和技术依据。结果表明: 对林分更新密度影响最大的潜变量依次为:林分非空间结构(-0.410)>林木多样性(0.380)>土壤条件(0.250)>立地条件(0.249)>林分空间结构(0.197);对林分更新多样性影响最大的潜变量依次为:土壤条件(0.778)>立地条件(0.748)>林分空间结构(0.684)>林分非空间结构(0.287)>林木多样性(0.105)。综合来看,影响更新密度和多样性的共性观测变量主要为:pH值、全钾、树种多样性、树高多样性、角尺度和单位蓄积。在后续经营中,可通过采伐或补植阔叶树种的方式来优化和调整林分的树种组成、多样性、土壤pH值和养分等特征,最终达到促进天然更新的目的。     

人类博卡病毒HBoV1基因组克隆及启动子活性分析

人类博卡病毒 (Human bocavirus,HBoV) 是继细小病毒B19之后,第2个被发现可引起人类疾病的细小病毒。通过PCR扩增方法从患有下呼吸道感染的患儿痰液中鉴定HBoV,以鉴定的阳性样本为模板,利用分子生物学方法构建病毒基因组克隆并进行序列分析。2007年10月?2009年3月从湖北省妇幼保健院共收集941例下呼吸道感染患儿的痰液标本,检测到33份HBoV阳性样品,阳性率为3.51％ (33/941);其中1岁以下婴幼儿患者占阳性样72.7％;构建了含有HBoV中间大片段基因克隆WHL-1,     

罗布泊野骆驼自然保护区的鸟类记录

摘要：2010～2011年考察队分3个阶段调查罗布泊野骆驼国家级自然保护区的鸟类,采用直接计数法,结合路线调查法,记录野鸟123种。汇集以往资料,共统计到鸟类197种。涉及到19目46科109属,约占新疆鸟类种数的43％。其中的北鹨（Anthus gustavi）、红胸鸲（Erithacus rubecula）、黄雀（...     

超声辐射力成像评估食管静脉曲张程度及出血风险的价值

摘要 目的：探究超声辐射力成像（acoustic radiation force impulse,ARFI）在评估食管静脉曲张（esophageal varices,EV）程度以及出血风险中的应用价值。方法：选择2018年1月至2020年1月于我院接受治疗的82例肝硬化患者,均对其开展ARFI、胃镜与血清学实验室检测,记录患者的肝、脾剪切波速度值（SWV _L 、SWV _S ）,参考胃镜检测结果将患者区分为EV组（61例）和无EV组（21例）,再根据胃镜结果将EV组区分为轻度（EV-G1,20例）、中度（EV-G2,21例）和重度（EV-G3,20例）,比较分析EV组与无EV组、不同EV病变程度组间的SWV _L 、SWV _S 差异;将患者根据食管静脉曲张出血（esophageal variceal bleeding,EVB）风险区分为低风险组（27例）和高风险组（34例）,对比低风险和高风险患者SWV _L 、SWV _S 差异;最后探究ARFI在评估EVB中的临床价值。结果：（1）比较显示EV组的SWV _L 、SWV _S 、血清总胆红素、白蛋白、凝血酶原时间等与无EV组差异明显（P<0.05）;（2）组间比较不同EV病变程度患者SWV _S 、血清总胆红素、白蛋白、凝血酶原时间差异明显（P<0.05）;（3）低风险组与高风险组患者间SWV _S 、血清总胆红素、白蛋白、凝血酶原时间差异明显（P<0.05）;（4）相关性分析SWV _S 与EV分级呈正相关（P<0.05）,SWV _S 对EVB诊断AUC为0.9622,95 % CI为0.9141-1.000（P<0.001）;结论：超声辐射弹力成像在评估食管静脉曲张程度以及出血风险中应用价值较高,其中SWV _S 诊断出血风险较为敏感,可将其应用于指导患者临床治疗和预后评估中。     

小鼠中血清因子结合位点位置分布及保守性的生物信息学分析

目的：血清反应因子在与心血管相关的疾病基因调控方面的作用越来越重要。血清反应因子识别的结合位点CArG元件因其重要的基因调控作用近年来随之备受关。本研究目的是揭示血清因子结合位点的位置分布与功能的关系及CArG元件内部各个住点的保守性。方法：本研究应用生物信息学方法结合遗传学方法对小鼠中CArG元件的位置分布、位点替换率及G0分类进行深入研究。结果：结果表明,71％的功能CArG元件分布在转录起始位点上游,且距离转录起始位点越近,CArG元件的数量越多。保守性分析发掘出元件内部的替换冷点、热点及替换规律。GO分类结果显示,CArG依赖性基因多为信号转导和细胞骨架蛋白。结论：上述研究结果将为准确预测候选CArG元件提供重要理论基础,同时也将为更为深入阐述SRF的调控模式奠定基础。     

荧光定量PCR测定端粒长度

目的应用实时荧光定量聚合酶链式反应（Q—PCR）方法测定端粒长度。方法选取9种人类细胞株,提取基因组DNA,采用Q—PCR方法测定相对T／S比率,DNA印迹法测定末端限制性片段（TRF）长度,进行二者之间的相关性分析。结果定量PCR测定端粒长度相对T／S比率为0．68±0．57,DNA印迹法测量平均TRF值为8．57±2．34,两种方法测定结果的相关性分析R2=0．7807（P〈0．01）。结论采用荧光定量PCR方法测量端粒长度具有重复性好、省时、简便、可靠的特点,可高通量处理大量样品。     

MPTP慢性帕金森病小鼠纹状体差异蛋白质的研究

目的分离、鉴定MPTP诱导慢性帕金森病模型小鼠纹状体差异表达的蛋白质,对MPTP慢性PD动物模型的特异性蛋白质组进行初步探讨,为PD的发病机制提供一定的蛋白质组学依据。方法成功建立MPTP诱导慢性帕金森病小鼠模型,提取模型组和对照组小鼠脑纹状体蛋白质,分别以固相pH梯度等电聚焦为第一向,SDS-PAGE垂直电泳为第二向进行2-DE。图像分析软件PDQUEST8.0分析电泳图谱找出差异表达蛋白,运用MALDI-TOF MS质谱鉴定;其肽质量指纹图（PMF）经MS Fit检索。结果比较MPTP诱导慢性PD模型小鼠和正常对照小鼠纹状体二向电泳图,发现12个蛋白表达异常,最终鉴定出其中4个蛋白质：线粒体裂殖调节因子1（mitochondrial fission regulator 1）、类泛素样蛋白3前体（ubiquitin-like protein 3 precursor）表达下调;S100蛋白A10（proteinS100-A10）、Lin-7 homolog B为新出现点。结论初步鉴定出MPTP慢性PD模型小鼠纹状体部分差异表达蛋白,所发现4个表达异常的蛋白质与帕金森病线粒体的损伤和兴奋性神经毒性密切相关,与PD的发病机制相符,为深入研究帕金森病病理机制奠定了基础。     

天山雪豹何以开始偷袭家畜？

经过广泛调查后,国际雪豹基金会判定造成雪豹濒危的首要原因是牧民对雪豹的报复性猎杀,而促使牧民报复性猎杀雪豹是因为它们一反常态地频繁偷袭牧民的家畜。这背后的原因又是什么呢？