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991.
微生物法生产丙烯酰胺的研究(Ⅱ)——腈水合酶催化反应动力学与失活动力学 总被引:1,自引:0,他引:1
以丙烯腈为原料,微生物转化生产丙烯酰胺的过程中,酶催化反应是过程的关键。为了了解酶催化的动力学,本研究以自由细胞的酶为催化剂,进行了腈水合酶的反应动力学和失活动力学的研究。首先研究了菌体浓度、温度、pH值、丙烯腈浓度、丙烯酰胺浓度等对腈水合酶催化反应速度的影响。结果表明,在这些因素中,温度和丙烯酰胺浓度是最主要的影响因素。28℃时酶活为5659u/mL(菌液),在5℃时的反应速率仅为28℃时的11.72%,相应的表观酶活为663u/mL(菌液)。而在丙烯酰胺45%浓度条件下的酶活大约只有丙烯酰胺5%浓度下的酶活的1/2。经过对不同温度下的反应速度的研究,得到腈水合酶水合反应的活化能为65.57kJ·mol-1。本文进一步研究了自由细胞状态下,菌体浓度、pH值、温度、丙烯腈浓度、丙烯酰胺浓度对腈水合酶失活的影响,得到了失活动力学。结果表明,在这些因素中,对酶失活影响的最主要因素还是温度和丙烯酰胺浓度。尤其当丙烯酰胺浓度到达35%时,酶活下降得很快,在55 h后,酶活几乎为零。而在丙烯酰胺浓度为10%的情况下,55 h的酶活仍然还存在约50%。试验结果还表明,丙烯腈对酶的稳定性的影响很小。经过数据处理,得到的28℃的酶失活速率常数为5℃下的2177倍。经过对温度与失活速率常数的拟合,得到腈水合酶失活反应的活化能为9228kJ·mol-1。 相似文献
992.
小鼠细胞因子相关基因表达检测寡核苷酸芯片的制备及分析 总被引:12,自引:0,他引:12
生物芯片技术用于基因表达谱研究是近年来发展起来的一项新技术 ,该方法本质上是基于对一玻璃片或膜表面上固定的cDNA或寡核苷酸的分子杂交 ,这一新技术可同时测定成千上万个基因的作用方式 ,几周获得的信息用其它方法可能要几年才能得到 ,是以定量方式同时监测大量基因相对表达的强有力的新方法[1 ,2 ] 。国内外目前主要采用cDNA芯片进行基因表达的检测 ,芯片制备所用的DNA探针一般为已知基因cDNA克隆的PCR扩增产物或EST的扩增产物[3~ 8] 。对基因的表达检测来说 ,cDNA芯片技术是一条非常适用的检测方法 ,但在有… 相似文献
993.
P5 3基因的突变 ,失活及缺失与 5 0 %的人类肿瘤发生有关 .最近 ,又发现一新“P5 3样”抑癌基因P73,定位于1p36 2 1p36 3,由 13个外显子及 12个内含子组成 ,该基因编码的蛋白质在结构和功能上均与 p5 3蛋白相似 .P73基因转录剪切可产生多种同种型 p73蛋白α ,β,γ及δ .p73α,β低水平表达具广泛性 ;在外周血淋巴细胞、原始角质细胞及不同肿瘤细胞株和白血病中可检测到 p73γ及δ .正常人类组织中 p73低表达 ,很多肿瘤细胞却高表达 p73,研究表明对于癌变细胞最普遍的是 p73的过表达而不是丢失 :p73蛋白过表达发生在胸腺癌… 相似文献
994.
采收时间对百里香芳香油产量和化学成分的影响研究 总被引:3,自引:0,他引:3
利用水蒸汽蒸馏方法研究了生长于中国西北部不同采收时期百里香花,叶,茎和全草芳香油含量和化学成分的变化,结果表明:不同采收时期对花和叶芳香油含量却很大,而对茎中芳香油含量的影响较小,最佳采收时期在盛花期,此时不仅芳香油含量高,而且油中百里香酚和香酚的含量也高。气-质色谱图上出现了53中化合物,鉴定了其中的41中,占总成分的94.419%,芳香油中以百里香酚,香芹酚,对聚伞花素和松油烯为主,它们的含量在整个生长时期从43.953%,增加47.810%。 相似文献
995.
The effects of EM and OL on the color,pHvalue,stink and the various kinds of harmful microbes of pig manure were analyzed.The results show that EM and OL could significantly reduce the stink and restrain the number of harmful microbes.At the same time,the rotting process of pig manure was accelerated,and the number of flies around pig manure reduced. 相似文献
996.
三叶因子 3 (trefoilfactor 3 ,TFF3 )是一种胃肠道粘膜修复因子 ,1 991年在大鼠cDNA文库中第一次被克隆 ,它由 60个氨基酸组成 ,分子中含有 7个Cys ,其中有 6个Cys以Cys1 Cys5 、Cys2 Cys4、Cys3 Cys6 的形式构成二硫键 ,形成一个状似叶片的紧凑结构 ,因而最初命名为小肠三叶因子 (intestinaltrefoilfac tor,ITF) [1] 。哺乳动物中有 3种三叶因子 ,分别为含有一个三叶结构域的乳腺癌相关肽(TFF1或pS2 ) ,含有两个三叶结构域的解痉挛多肽 (TFF2或SP)以及… 相似文献
997.
998.
人修饰型降钙素和鼠酰胺化酶基因在昆虫细胞中的偶联表达 总被引:2,自引:0,他引:2
人降钙素 (hCT)是 32氨基酸的多肽激素 ,C-端为α脯氨酰胺结构 ,具有调节体内钙、磷代谢等许多重要生理功能。用重组昆虫杆状病毒表达系统 ,偶联表达合成的人修饰型降钙素 (hmCT)基因与GST融合基因和大鼠酰胺化酶 (PAM)基因 ,再用抗hmCT或抗PAM抗体 ,既检测到由昆虫细胞表达的GSThmCT产物也检测到PAM产物。经GSH 琼脂糖凝胶亲和层析 ,分离纯化GSThmCT融合蛋白。这种蛋白修饰酶与底物在真核细胞偶联表达也将适用于其他生物活性肽的体外表达 相似文献
999.
1000.
三氟氯氰菊酯对棉铃虫神经细胞钠及钙通道作用机理研究 总被引:13,自引:0,他引:13
用膜片钳技术对比分析了棉铃虫三氟氯氰菊脂抗性品系(R)及其同源对照品系(S)幼虫了体培养中枢神经细胞Na^2 通道的门控特性及杀虫剂对R和S神经细胞Na^ 、Ca^ 通道门控过程的影响。结果表明,S神经细胞Na^ 通道电流(S-INa)在-50-40mV激活,-20mV左右达峰值,R神经细胞Na^2 通道电流(R-INa)在-40mV左右激活,-10-0mV达峰值,即R-INa激活电压与峰值电压均向正电位方向移动约10mV,提示二者Na^ 通道控特性不同,R神经细胞Na^ 通道功能发生了变异。三氟氯氰菊酯作用后,S-INgn R-ISs的I-V曲线均向负电位方向移动的10mV,S-INa在20min后基本消失,而R-INa被阻断需时约90min,延长近5倍,其幅值有减小再增大的现象。对Ca^2 通道分析表明,杀虫剂作用后,R及S神经细胞Ca^2 通道电流的I-V曲线均向负电位移动10-20mV,提示三氟氯氰菊酯对Ca^2 通道的门控过程也有影响。与R-INa幅值起伏变化相联系,可推知杀虫剂对神经细胞的毒性作用中,Na^2 、Ca^2 通道均受影响。 相似文献