乙型肝炎病毒基因亚型检测意义

乙型肝炎病毒基因亚型检测意义曹洪林张显忠陈禹保乙型肝炎是危害我国人民身体健康的重要疾病,患者和病毒携带者约占人群的１０％～１５％,感染人群约５０％～７０％。乙型肝炎病毒有四种重要的血清学亚型（ａｄｒ、ａｄｗ、ａｙｒ、ａｙｗ）,血清学亚型检测方法为蛋白质水平的检测技术,所观察的亚型属蛋白质水平的表型结果,不能反映决定其亚型的基因和其变异情况。乙型肝炎病毒血清学亚型的决定基因位于Ｓ基因区,该基因...     

应用捕获ELISA法检测人巨细胞病毒特异性IgM抗体的研究

应用捕获ＥＬＩＳＡ法检测人巨细胞病毒感染者血清特异性ＩｇＭ抗体。通过与间接ＥＬＩＳ地４７例临床标体的检测比较,该法灵敏度及特异笥均高于间妆法,且不受ＲＦ的影响。试验表明,ＣＭＶＩｇＭ捕获法特异敏感、简便、快速、重复性好。ＣＭＶＩｇＭ捕攻法试剂的研制成功,将为血清学的检测、流行病学的调查及临床诊断等提供可靠的科学诊断依据,有助于优生及伏育。     

四种常用高通量测序拼接软件的应用比较

新一代测序平台的诞生推动了对全基因组鸟枪法测序数据的拼接算法和软件的研究,自2005年以来多种用于高通量测序的序列拼接软件已经被开发出来,并且在不断地进行改进以提高拼接效果.本文利用目前广泛使用的高通量测序拼接软件Velvet、AbySS、SOAPdenovo和CLC Genomic Workbench分别对本试验室分离的一株噬菌体IME08的高通量测序结果进行拼接,介绍这几种拼接软件的安装使用及参数优化,并对不同软件的拼接结果进行比较,针对不同的拼接软件得到优化的拼接参数,可为其他研究人员使用上述软件提供参考借鉴.     

ELISA法和PCR技术检测孕妇风疹病毒感染的研究

对８７２例孕妇风疹病毒ＩｇＭ检测,结果阳性４１例,阳性率为４．７％,对ＩｇＭ阳性者进一步用ＰＣＲ检测风疹病毒ＲＮＡ,其中１９例阳性,占ＩｇＭ阳怀的４６．３４％,风疹病毒感染与孕龄,职业无关,与孕次有关,与不良孕产史有密切关系。     

Primer Spanner:一个高效的定点突变PCR引物设计在线工具

基于PCR的实验策略在生物工程研究中具有广泛应用,如定点突变(site-directed mutagenesis,SDM),DNA拼接和载体构建。引物设计是这类实验技术中的关键一环,因其直接影响扩增效率和PCR产物的拼合。在嵌合式引物设计方法(一对突变引物在5'端具有互补序列)的基础上,开发了一个在线工具Primer Spanner(PS),可简单高效获得设计定点突变引物。PS可应用于单碱基或连续多碱基替换、插入、敲除等突变形式。通过大量突变实验与测序验证,结果表明该工具设计的引物进行的定点突变效果良好1)。     

ELISA法和PCR技术检测孕妇风疹病毒感染的研究

对８７２例孕妇风疹病毒ＩｇＭ检测,结果阳性４１例,阳性率为４．７％;对ＩｇＭ阳性者进一步用ＰＣＲ检测风疹病毒ＲＮＡ,其中１９例阳性,占ＩｇＭ阳性的４６．３４％。风疹病毒感染与孕龄、职业无关,与孕次有关（χ２＝８．９４,Ｐ＜０．０５）,与不良孕产史有密切关系（χ２＝４．７４,Ｐ＜０．０５）。     

烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白在大肠杆菌中的表达

目的:克隆烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白基因(glycine-rich RNA-binding protein,GRRBPs)并进行原核表达,为制备抗体和研究烟草抗逆性分子机理打下基础。方法:从总RNA中反转录扩增并克隆烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白NtRGP-1a和NtRGP-3全长cDNA,将cDNA序列克隆到表达载体pGEX4T-1上,构建了重组表达质粒pGEX4T-1/NtRGP-1a、pGEX4T-1/NtRGP-3,转化大肠杆菌rosetta,IPTG诱导表达,GSTrap 4B亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果:重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,蛋白纯度占总蛋白的95%以上。结论:成功克隆和表达了烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白NtRGP-1a和NtRGP-3基因序列,为制备抗体和烟草抗逆性分子机理等进一步的研究奠定了基础。     

基于宏基因组技术的聚磷菌研究进展

聚磷菌是一类非常重要的工程菌,广泛应用于污水处理厂生物除磷过程。聚磷菌可以吸收超过自身所能利用的数倍的磷,在体内合成聚磷化合物从而达到生物除磷的目的。在过去的几年里,宏基因组学以及测序技术的发展大大推动了对聚磷菌物种组成及其磷代谢过程的认识。本文主要对宏基因组技术进行介绍并对近几年基于宏基因组技术深入研究聚磷菌的文章进行综述,以期对这类重要的微生物的生理功能、代谢途径和物种多样性进行全面的了解。     

染色体高层结构研究

真核细胞染色体的构筑和功能可以说是生物学中一系列没有解决的最重要的问题之一.诸如染色体中DNA序列组织,非活性染色质结构,基因活化表达时染色体结构的变化;在分化组织中活化基因的决定、维持和调控,细胞周期运行过程中染色体结构的调节,DNA复制过程中染色质的去组装和重组装机理,中期染色体结构等问题,都待于探讨研究.近年来由于分子生物学技术、生物化学技术和染色体制备技术的进展,染色体显带技术和染色体电镜技术及各物理、化学手段的应用,使得染色体的生物学研究取得了一定的进展.