RNAi沉默CXCR7对人结肠癌细胞SW620特异性靶向抑制的实验研究

目的:探讨慢病毒介导的CXCR7-shRNA转染人结肠癌细胞株SW620后对CXCR7蛋白表达的影响。方法:(1)设计并合成CXCR7的3对shRNA序列及1对阴性对照序列,与pSilencerTM4.1系统合成构建重组慢病毒载体,转染HEK293T细胞包装病毒并检测滴度;(2)将3种重组慢病毒载体及阴性对照分别感染人结肠癌细胞SW620,RT-PCR检测CXCR7 mRNA的表达情况,测定沉默效率,筛选沉默效率最高的一组CXCR7-shRNA作为后续实验表达载体;(3)MTT法检测转染CXCR7-shRNA对SW620细胞生长增殖的影响;(4)通过细胞划痕实验检测转染CXCR7-shRNA对SW620细胞侵袭迁移能力的影响;(5)Western blot检测转染CXCR7-shRNA对SW620细胞蛋白表达情况。结果:(1)测序证实3对慢病毒载体及1对阴性对照载体均包装成功,滴度分别为3.16×108TU/ml、4.27×108TU/ml、3.93×108TU/ml和2.95×108TU/ml;(2)3组慢病毒载体转染SW620细胞后,CXCR7 mRNA的表达量均较阴性对照组明显降低(P0.05),其中CXCR7-shRNA-1对CXCR7的抑制率明显高于其他两组(P0.05);(3)CXCR7-shRNA-1转染SW620后,肿瘤细胞的增殖程度显著减少,与空白组相比有显著性差异(P0.05);(4)SW620细胞在划痕24h后,空白对照组和实验组的细胞迁移指数(MI)分别为(49.92±6.41)%和(29.13±5.38)%,有统计学意义(P0.05),划痕48h后,对照组与实验组的MI分别为(96.52±7.44)%和(72.03±8.29)%,有统计学意义(P0.05);(5)CXCR7-shRNA-1转染SW620细胞后,与空病毒载体组、空白组相比,CXCR7蛋白表达量明显降低,具有统计学意义(P0.05)。结论:CXCR7-shRNA慢病毒表达载体转染SW620细胞后可有效下调CXCR7 mRNA和蛋白的表达水平并能够抑制肿瘤细胞的增殖与迁移,为下一步研究以CXCR7/CXCL12生物学轴为靶点的结直肠癌慢病毒基因沉默治疗打下了良好的基础,为结直肠癌的基因治疗提供了新方向。     

蛇油中脂肪酸成分的GC-MS分析

目的为充分利用蛇副产品资源,增加其附加值,探究其功用。方法取蛇内脏脂肪组织,用微波加热法得蛇油,将其甲酯化后低温保存,采用气相色谱-质谱（GC-MS）技术和标准图谱检索对照,分离和鉴定蛇油的组成成分,用离子流色谱峰面积归一化法计算各脂肪酸成分的相对含量,取峰值较高的15种脂肪酸成分进行分析。结果蛇油中含有大量不饱和脂肪酸,占总脂肪酸含量的52%以上。结论蛇油脂利用价值较高,且含有部分对人体具有十分重要生理功能的高度不饱和脂肪酸,特别是EPA、DHA。     

闽南地区5 869例儿童社区获得性肺炎患者病原学特点分析

目的 通过对闽南地区社区获得性肺炎（CAP）患儿病原特点进行分析,为CAP早期预警、预防和早期经验治疗提供指导和依据。方法 收集我院2015年1月至2017年5月5 869例CAP患儿静脉血、呼吸道分泌物及痰标本分别进行肺炎支原体（MP）、呼吸道病毒检测以及细菌培养和鉴定。结果 5 869例CAP患儿中明确病原体感染4 931例,其中单纯细菌感染3 054例,单纯病毒感染966例,单纯MP感染620例,混合感染291例,未检出病原体938例。细菌性病原主要以肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌为主,在各季节检出率不同且男性多于女性,主要在低龄儿童中检出。病毒感染者主要分布于低龄儿童,夏季检出率最高,病原以呼吸道合胞病毒（RSV）为主,占68.22%。该类患者在性别上比较差异无统计学意义。MP感染者中女性多于男性,主要分布于大龄儿童,冬季检出率最高。结论 本地区CAP患儿病原检出率由高到低分别为细菌、病毒和MP。细菌和MP检出率在患儿中具有性别差异,各种病原在不同年龄段儿童及季节中检出率不同。     

金双歧去除肠道产ESBLs大肠埃希菌定植效果的临床观察

目的 探索和研究金双歧对肠道产ESBLs大肠埃希菌的除菌作用,为临床利用金双歧辅助治疗多重耐药菌引起的感染性疾病提供依据.方法 在重症医学科患者采集肛拭子标本进行产ESBLs大肠埃希菌定菌筛查,选取40例产ESBLs大肠埃希菌患者随机分成试验组和对照组,试验组口服金双歧进行肠道内去定植.结果 试验组21例产ESBLs大肠埃希菌患者口服金双歧3～7d后,再次取肛拭子进行筛查,17例未再检出产ESBLs大肠埃希菌,4例再次检出,金双歧去除肠道产ESBLs大肠埃希菌定植有效率为87.5％;对照组19例,3～7d后,再次取肛拭子进行筛查,14例再次检出产ESBLs大肠埃希菌,5例未检出,肠道自行清除产ESBLs大肠埃希菌清除率为26.3％.结论 金双歧具有去除肠道产ESBLs大肠埃希菌定植的效果.     

经桡动脉行冠状动脉造影及支架植入术的护理

近年来,随着介入器械的不断完善,经桡动脉行冠状动脉造影及支架植入在我国逐步开展。经桡动脉穿刺路径较股动脉相比,具有创伤小,穿刺部位并发症少,无需中断肝素治疗及术后无体位限制,减轻术后排便困难,并可缩短住院时间,节省费用等优点。我院2010年1～6月经桡动脉穿刺行冠状动脉造影及支架植入术282例,现将护理体会报告如下。     

中国旱獭β2m基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备

目的克隆、原核表达中国旱獭β2m基因,并制备多克隆抗体。方法利用RT—PCR技术从中国旱獭脾细胞中扩增β2m基因,克隆至pET28a（＋）质粒,构建原核表达载体pET-28a（＋）-CWβ2m,再转化宿主菌Rosetta（DE3）pLacI诱导其表达。使用切胶回收纯化目的蛋白,将纯化蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并采用酶联免疫吸附实验检测抗体的灵敏度和特异性。结果克隆出的中国旱獭β2m基因,与GenBank已公布的土拨鼠的碱基序列一致;Western印迹结果显示克隆的β2m基因能在大肠埃希菌中高效表达,免疫家兔获得了高效价的多克隆抗体。结论成功克隆了中国旱獭β2m基因,在原核宿主中进行了高效表达,获得的多克隆抗体具有较高的效价。为人工制备MHC-Ⅰ类分子复合物,深入研究嗜肝病毒感染过程中特异性CTL应答和效应机制奠定了基础。     

两种温室气体排放方案下我国水稻产量变化模拟

利用最新的温室气体和SO₂排放方案,即政府间气候变化委员会(IPCC)排放情景特别报告(SRES)的A2和B2方案,通过区域气候模式PRECIS和作物模型CERES-Rcie相嵌套,在50 km×50 km网格尺度下,模拟了未来2080年我国水稻产量的变化.结果表明,两种温室气体排放方案下,我国水稻的年平均单产水平各地有增有减,增产地区主要集中在长江及长江流域以南地区,其中四川和湖北交界的山区增产幅度最大,减产地区主要集中在华北平原和东北平原;由于CO₂的肥效作用,A2温室气体排放方案对我国水稻单产的正面影响大于B2方案,A2排放方案下,我国水稻总产呈现一定程度的上升趋势,B2排放方案下,水稻总产表现为少量下降.     

云南野生稻抗褐飞虱评价及其抗性基因鉴定

褐飞虱是水稻生产中最严重的害虫之一,从野生稻中发掘抗虫基因,有利于培育具有抗虫能力强的水稻新品种。该研究通过对云南野生稻进行温室和大田抗虫鉴定以及9个已知抗褐飞虱基因的PCR鉴定,发现云南野生稻对褐飞虱表现出不同程度的抗性,尤其疣粒野生稻和药用野生稻对褐飞虱表现出高抗,可作为抗虫基因发掘的优良抗源材料;不同褐飞虱抗性的云南野生稻中含有的抗褐飞虱基因差异很大,3种野生稻中均不含Bph1和Bph18(t)抗病基因,景洪普通野生稻和元江普通野生稻可能含bph2基因,东乡普通野生稻可能含bph2、Bph15和Bph27(t)基因,疣粒野生稻中可能含bph2和bph19(t)基因,药用野生稻和药用野生稻(宽叶型)中可能含bph2和Bph6基因,药用野生稻F1中可能含bph2、Bph14和bph20(t)基因,药用野生稻F2中可能含bph2和Bph27(t)基因或者其同源基因。该研究为快速发掘利用云南野生稻中的抗虫基因奠定了理论基础。     

淀粉酶生产菌(Bacillus subtilis BF-7658)孢子形成突变体的分离和特性

从一个工业上生产α-淀粉酶的枯草杆菌(Baciltus subtilis)BF-7658菌株中分离出自发的依赖链霉素、抗红霉素孢子形成突变体。这些突变体能正常营养生长,但不能正常形成孢子;同时蛋白酶、抗菌素活性降低,转化分析说明这些性状的改变是单一突变的结果。     

城市污泥资源化利用研究

城市污水污泥产量巨大且成分复杂 ,如何对它进行合理利用已越来越受人们关注。文章系统地综述了我国城市污泥处置与利用的现状和趋势 ,并重点讨论了污泥土地利用的可行性以及我国近年来的研究进展。认为将污泥进行稳定化、无害化、资源化处理并作为有机肥料或土壤改良剂等进行资源化利用是符合我国国情的 ,并将成为我国污泥处置与利用的一种有效途径