家蚕母性基因的表达序列标签分析

为了研究家蚕Bombyx mori卵中储存的母性遗传信息,以未受精的肾脏型和正常型蚕卵为材料构建了cDNA文库,并对其随机测序,共获得391条表达序列标签(EST)序列,经拼接后得到374条非重复序列。生物信息学分析发现,172个非重复序列与国际数据库GenBank和silkbase中的已知基因具有较高的相似性。除3个已知母性基因外,其余主要与DNA复制、能量代谢、信号转导、转录、蛋白质结构以及胚胎发育中个体形成等相关。该结果可为进一步研究家蚕胚胎早期发育的调控提供基础数据。     

脊髓和脊神经节原代分离培养中GABA能神经元的形态观察

选用１２－１４天胚胎小鼠（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ）,取脊髓及脊神经节原代培养。观察神经元的发育并用ＧＡＢＡ抗血清、ＰＡＰ方法显示ＧＡＢＡ能神经元。脊髓神经元呈各种形态大小,随着培养的进行它们的起和胞体不断生长;脊神经细胞有不同大小,其体积在培养中保持恒定。随着神经元的逐渐成熟,它们的核质比不断增大。ＧＡＢＡ免疫细胞化学阳性脊髓神经元大小不等,可分为两类：１．突起和胞体阳性,核不着色而核仁着色;２．只在突     

干热河谷草本植物生物量分配及其对环境因子的响应

以干热河谷6种草本植物为对象,研究了水分、养分、刈割对生物量在根、茎、叶的分配及异速生长关系的影响.结果表明:刈割处理叶生物量质量分数从25.1%显著增加到31.2%,茎生物量质量分数从43.7%显著降低到34.2%;养分添加处理根生物量质量分数从34.0%显著降低到30.8%;水分处理对生物量分配没有显著影响.物种对根、茎、叶生物量分配有显著影响,适应贫瘠土壤的物种将更多生物量分配给叶和根,对茎生物量的分配相对较低.物种与环境因子存在显著的互作效应,表明环境因子对不同物种的生物量分配影响不同.适应贫瘠土壤的物种叶-茎标度指数和异速生长常数大于其他物种,而茎-根标度指数和异速生长常数小于其他物种.养分显著增加了叶-茎和叶-根的异速生长常数,刈割显著降低了茎-根的标度指数,水分处理则没有显著效应.环境因素对器官间异速生长关系的影响存在种间差异.生物量分配的种间差异及其对环境因素的响应特征可能对植物适应环境变化产生重要影响.     

盐节木同化枝的腋芽丛生与快速繁殖

本文通过同化枝腋芽丛生方式建立了盐生植物盐节木的快速繁殖体系。以在MS附加200 mmol·L-1 Na Cl的培养基上无菌种子萌发、生长共计4~5个月、高约3~4 cm的盐节木小苗为材料,从上截取0.5 cm长的同化枝小段为外植体,培养在MS附加不同浓度的6-BA与NAA的培养基中。结果表明:同化枝腋芽诱导与增殖最佳培养基均为MS+0.05 mg·L-1 6-BA+1mg·L-1 NAA或MS+1 mg·L-1 6-BA,初代培养30 d后,腋芽诱导率达97.5%,平均芽增殖系数为2.50;继代增殖培养时,将同化枝切成1 cm长的小段芽增殖系数提高到4.92;一次性芽苗伸长与生根培养基为MS+0.05 mg·L-1 IBA,生根率达99%;小苗经炼苗后移栽到沙子、营养土和蛭石体积比为1:1:1的基质中,成活率可达91%。     

反胶束法萃取核桃胰蛋白酶抑制剂及其抗虫研究

植物胰蛋白酶抑制因子对植物本身具有保护作用,能调节植物蛋白质的合成和分解,并具有抗虫作用。为明确核桃蛋白酶抑制剂对小菜蛾的抗虫效果,该研究采用AOT/异辛烷反胶束法和亲和层析法萃取及纯化核桃胰蛋白酶抑制剂,命名为WTI,并对其抑制活性和生物活性进行测试。迪克森作图法测得纯化的核桃胰蛋白酶抑制剂的抑制常数为2.1×10-9mol/L。抗虫试验表明,小菜蛾自1龄起至化蛹前的整个幼虫阶段中,核桃胰蛋白酶抑制剂均对其产生了较强的毒杀作用。尤其是在1-3龄期,效果最佳。与对照组相比,WTI能延迟小菜蛾的化蛹时间,降低其化蛹率。核桃胰蛋白酶抑制剂对小菜蛾有明显的毒杀作用,但不表现出明显的生长抑制作用,且一定浓度的核桃胰蛋白酶抑制剂能将小菜蛾扼杀在其化蛹之前,从而能够控制其繁殖。     

原子力显微镜研究粘附分子与细胞膜上整合素分子的相互作用

目的：研究肝癌细胞弹性变化对其表达的整合素分子与配体分子相互作用的影响。方法：以壳聚糖/ 聚丙烯酰胺水凝胶作为 可变基底材料,并将人肝肿瘤细胞（HepG2）接种到不同软硬度壳聚糖/ 聚丙烯酰胺水凝胶基底上,利用原子力显微镜力与距离模 式定量测定不同软硬基底上生长的HepG2 肝瘤细胞膜表面整合素分子与层粘连蛋白分子之间相互作用力。结果：功能化的原子 力显微镜探针与不同软硬基底上生长的细胞所产生的粘附情况不相同,细胞生长在培养皿的为对照组;细胞生长在硬度为1000 Pa 壳聚糖/聚丙烯酰胺水凝胶基底上的为实验组,表达在HepG2 肝瘤细胞膜上的alpha-6-beta-1 整合素与其配体层粘连蛋白相互作用力 的大小分别为19± 7 pN和38.85± 19.7 pN。结论：基底软硬度会影响细胞整合素与配体分子间的相互作用。     

磁修饰酵母对直接大红染料的生物吸附

本研究采用水相合成的纳米级铁磁流体对灭活酿酒酵母细胞进行磁修饰,获得了具有良好磁响应的酵母。傅立叶变换红外光谱分析表明,该修饰酵母在Fe-O特征峰581cm1处的吸收明显加强。透射电镜观察表明,纳米磁性颗粒单个或成团聚集在酵母细胞表面。在本实验条件下,160μL磁修饰酵母对1mL浓度为0.4mg/mL直接大红染料吸附率达100%;8min达到吸附平衡;在70%乙醇中,染料脱吸附率为99.18%。由于磁修饰酵母吸附力强,吸附速度快,易于磁分离,是一种有前景的水溶性染料生物吸附剂。     

枯草芽孢杆菌C-36内切葡聚糖酶基因的克隆及其在大肠杆菌中融合表达

以自行分离筛选出的天然枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）C-36的染色体DNA为模板,PCR扩增得到含有内切葡聚糖酶基因的DNA片段,将其克隆到pMD-18T载体中,序列分析表明,克隆得到的DNA片段全长1602bp,编码一个含有499个氨基酸的多肽。与其他芽孢杆菌内切葡聚糖酶基因序列比对,其核苷酸同源率为90％～93％,其编码的氨基酸序列的同源性在90％～98％,已将此基因注册GenBank（DQ782954）。将含内切葡聚糖酶基因的重组克隆质粒进行亚克隆,用Kpn I和EcoR I双酶切后,与相同酶切的表达载体pET-32a相连接,并导入大肠杆菌BL21中表达。蛋白质电泳实验结果表明在6．47×10^4处有表达蛋白带。经测定表达蛋白比酶活力达99．02U／mL,为出发菌C-36（63．78U／mL）的1．55倍。     

施氮对冬小麦旗叶RuBP羧化酶活性及叶绿素荧光参数的影响

以大穗型小麦品种'兰考矮早8'和多穗型品种'豫麦49-198'为材料,采用盆栽试验研究了不同施氮量对两种穗型冬小麦品种旗叶RuBP(1,5二磷酸核酮糖)羧化酶和PEPC(磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶)活性及叶绿素a荧光动力学参数的影响.结果表明,在本试验条件下,随着花后天数的增加,两小麦品种旗叶RuBP羧化酶和PEPC活性总体呈下降趋势;随着施氮量的增加,RuBP羧化酶和PEPC活性呈增加趋势,其中RuBP羧化酶活性多数以N4(N 4.8 g/盆)处理最高,PEPC活性多数以N3(N 3.6 g/盆)处理最高.随着施氮量的增加,两小麦品种旗叶Fv/F0、Fv/Fm和qP均呈增加趋势,且以N4 (N 4.8 g/盆)处理的值最高,并且处理之间的差异达显著水平(P<0.05).研究发现,本试验条件下,适量施用氮肥有利于小麦旗叶RuBP羧化酶和PEPC活性的增加及叶绿素a荧光动力学参数Fv/F0和Fv/Fm的提高,从而有助于光合同化物的积累和小麦穗粒重的提高.     

六种常见两栖类动物皮肤分泌物的生物活性比较

对6种常见两栖类动物皮肤水溶性分泌物的生物学尖性与酶学活性进行了研究,其中,红瘰疣螈（Tylototriton verrucosus),大蹼铃蟾（Bombina maxima),华西蟾蜍（Bufo andrewsi)皮肤分泌物对小白鼠具有致死毒性,对小白鼠腹腔注射的半数致死剂量分别为11．5,18．8和264mg/kg。而沼蛙（Rana nigromaculata),泽蛙（Rana guentheri),黑斑蛙（Rana limnocharis)的皮肤分泌物在小白鼠腹腔注射剂量达到500mg/kg时,仍不显示致死毒性。红瘰疣螈,大蹼铃蟾皮肤分泌物的毒性成分为3－60kDa的多态与蛋白质。6种两栖类动物皮肤分泌物都具有蛋白酶水解活性与胰蛋白酶抑制活性。红瘰疣螈,大蹼铃蟾和华西蟾蜍皮肤分泌物具有广谱抗菌活性,大蹼铃蟾,华西蟾蜍皮肤分泌的具有肿瘤细胞细胞毒活性。6种皮肤分泌物对哺乳类血液凝固系统无显著影响。仅发现红瘰疣螈皮肤分泌物具有磷脂酶A2活性。6种皮肤分泌的均无乙酰胆碱酯酶活性。