人源抗狂犬病毒中和性全抗体在昆明细胞中的表达

将来源于噬菌体抗体库的人源狂犬病毒糖蛋白特性异特单抗G10Fab基因的,克隆入杆状病毒人源IgG抗体表达载体,通过转染将重组质粒导入昆虫细胞,以全抗体的形式表达了一株人源抗狂犬病毒基因工程抗体R10。用亲和层析的方法纯化了表达产物,经过一株鼠源糖蛋白特异性单抗竞争证实,该单克隆抗体特异性识别狂犬病毒糖蛋白,亲和力约为10^-9M.体外中和实验证明,该单抗对狂犬病毒aG株具有体外中和活性。     

具有内含子的大鳞副泥鳅Sox8基因

鱼类在脊椎动物系统进化过程中起着承先启后的作用,其性别决定具有原始性、多样性和可塑性。深入研究鱼类的性别决定和分化具有重大的理论意义。Sox基因家族是九十年代发现的一个新的基因家族,其中的许多成员都与性别决定和分化具有直接的关系。大鳞副泥鳅是一种常见的小型鱼类,属于鲤形目鳅科,是少数具有异形性染色体中的一种。本文根据已发表的Sox蛋白质的序列资料,选择在不同物种中保守程度最高的区段设计兼板,在扩增产物中有三条主带,其大小分别为220bp550 bp和1500bp,另有一条相当弱的带,大小为700bp（Fig.1)。雌雄个体中扩增结果一致。经克隆和DNA序列分析,从550bp扩增带中得到一新的基因片段,长500bp,编码53个氨基酸;其余部分长340bp,可能为一内含子,且符合“GT…AG”规律（Fig．2)。其可能编码的蛋白质氨基酸序列与小鼠的Sox8,9,10,SRY基因的相似性分别为96％,94％,90％和47％;与人类SOX8,9,10,SRY基因的相似性分别为64％,94％,58％和40％（Fig.3)。根据这些特性将命名为PdSox8。Northern杂交结果表明PdSox8在成体脑及肝脏组织中有宏量表达（Fig.4）。     

烤烟伸根期的光合特性及其对土壤水分的研究

烤烟NC89、LJ851、LJ911伸根期的生长中心在地下部分。合理地控制土壤水分含量,协调地上部分和地下部分的生长是此期生产管理的重要环节。土壤相对含水量在75%～85%的光合速率提高,但水分利用效率最高的土壤相对含水量在65%～75%之间,且此土壤水分含量有利于烤烟烟苗的蹲苗、壮苗,是烤烟生长的最佳土壤水分条件。     

秦岭羚牛高度重复序列DNA片段的分子克隆和序列分析

羚牛（Budorcas taxicolor)属偶蹄目（Artiodactyla)、牛科（Bovidae),为我国一类大型珍贵保护动物。我们从其基因组中克隆得到若干约800bp的BamHI高度重复序列并对部分克隆进行了序列测定,发现它们显示了很高的同源性。利用其中一个单元为探针,对限制酶消化后的羚牛基因组DNA作杂交分析,发现其杂交谱带不具有个体及亚种间特异性,说明该重复序列在羚牛基因组中具有保守的分布和排列。在牛科动物中,羚牛BamHI片段与绵羊属和山羊属的相关序列具有高度同源性,而与水牛和家牛序列差异较大。这些结果为羚牛与羊亚科物种亲源关系较近的分类学观点提供了分子生物学证据。有证据表明,这些片段可能代表羚牛染色体着丝点的卫星DNA单体。     

几种乌桕桕脂甘油三酯的组成

采用胰脂酶分解的方法对几种乌桕[Sapium sebiferum(L.) Roxb.]种子桕脂甘油三酯组成进行了测定,桕脂的甘油三酯是由9－14种甘油三酯所组成,与可可脂相似之处是甘油三酯2－位上的脂肪酸,82－88％为油酸,二饱和酸甘油酯中81－88％,其中以POP为主（74－81％）;单饱和酸甘油酯占1．8－6．0％;而三饱和酸甘油酯占9．6－15．6％,主要是PPP（8．5－14．0％）。桕脂经过适当的加工处理,可以做可可脂的代用品,将湖南产的乌桕与广西栽培的4个品种（“大粒鸡爪”,“蜈蚣”,“铜锤”和“小粒鸡爪”）桕脂中的甘油三酯组成比较,以“大粒鸡爪”桕脂中二饱和酸甘油酯的比较最高（88．0％）,三饱和酸甘油酯的含量最低（9．6％）。     

γ—谷氨酸半胱氨酸合成酶（γ—GCS）与肿瘤耐药

谷胱甘肽（glutathione,GSH）及其相关酶类对化疗药物的解毒作用是恶性肿瘤化疗耐药形成的主要原因之一。γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）是GSH体内生物合成的限速酶,大量的体外及临床实验已证实γ-GCS与多种肿瘤细胞的耐药有关,抑制γ-GCS活性可降低细胞内GSH水平,同时使肿瘤细胞耐药得到不同程度的逆转。本文综述了γ-GCS的生物学特性、基因表达的调控及在肿瘤耐药形成中的作用。     

高寒草甸小嵩草种群繁殖生态学研究

研究从繁殖生态学的角度对高寒草甸小嵩草（Kobresia pygmaea)种群进行了初步研究。结果表明：小嵩草属寒冷中生密丛短根茎地下芽植物,在高寒生境中采用以营养繁殖为主、有性繁殖为辅的繁策略,具体体现在以下几个方面：虽然小嵩草种子产量达4553.8粒／m^2,但种子萌发率较低,室内和野外萌发率分别仅有4％和1％,经氢氧化钠溶液和赤霉素溶液处理后的种子萌发率分别为1％和2％,而削去种皮后种子萌发率达52．6％,种皮坚硬是造成种子萌发率低的主要原因;进入种子库、保留至返青期且具有活性的种子仅占种子总数的24．35％,其室内萌发率仅有3％,而在野外理论实生苗仅为11．09个／m^2,与此相反小嵩草营养繁殖所形成的新个体数为6256．25个／m^2,远远多于种子萌发所形成的实生苗数。此外,小嵩草营养繁殖效力也远高于有性繁殖效力,营养繁殖效力占总繁殖效力的90．92％。     

粘中着斑激酶在TNF—α和环己亚胺协同诱导人肝癌细胞SMMC—7721凋亡中的作用

探讨了粘着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK）在TNF－α和环己亚胺协同诱导SMMC－7721细胞凋亡中的作用,利用转染FAK反义质粒来特异性降低SMMC－7721细胞的FAK含量,用Western杂交的方法来检测蛋白激酶B（PKB）的蛋白含量,以及用流式细胞仪的方法来检测细胞的凋亡。研究发现TNF－α本身并不能诱导SMMC－7721细胞发生凋亡,而只有当用环己亚胺和TNF－α协同处理时才发生凋亡。在TNF－α和环己亚胺协同诱导的凋亡过程中,PKB蛋白含量的降低,提示PKB的蛋白水平与凋亡的发生密切相关。当用FAK反义质粒降低SMMC－7721细胞的FAK含量（约降低了60％）后,细胞对TNF－α和环己亚胺协同诱导的凋亡的敏感性在用低剂量TNF－α处理的情况下增加,而在高剂量TNF－α和处理的情况下降低,相应地,在低剂量TNF-α和环己亚胺处理的情况下,FAK反义质粒转染株细胞的PKB含量比对照的PKB含量低;而在高剂量TNF－α和环己亚胺处理的情况下,FAK反义质粒转染株细胞的PKB含量比对照的要高。结果提示,FAK对TNF－α和环己亚胺协同诱导SMMC－7721凋亡的过程有一双相作用,并且该过程可能与PKB有关。     

西藏各级医疗机构医生人力资源现状调查分析

了解西藏各级医疗机构医生的职称、工作量、有效工作时间、收入待遇等,分析医生工作面临的问题,为提高医生的工作效率提供建议,同时为自治区医疗卫生服务体系的资源测算提供参数依据。采用自填问卷法对西藏自治区省、市、县级共22家医院的医生进行问卷调查,回收有效问卷714份问卷,对医院医生的现状进行了较好的了解。 西藏医疗机构医生人力资源配备质量和医生的工作效率较低,而要解决这些问题需要多方面共同推动。

     

黄连木叶粗多酚的纯化及其抗氧化研究

采用硅胶柱层析法对黄连木叶粗多酚进行纯化,并且对纯化后的多酚、单宁、黄酮组分进行测定。结果表明,纯化产物中的多酚、单宁、黄酮含量分别为1．0125g当量没食子酸每克样品、0．8600g当量单宁酸每克样品和0．1453g当量芦丁每克样品。与粗多酚相比,多酚含量提高了20．54％,单宁含量提高了13．53％,黄酮含量提高了12．03％。采用DPPH自由基清除法、FRAP总抗氧化法对纯化产物进行体外抗氧化活性检测。同时,以秀丽隐杆线虫（Caenorhabditiselegans）为模式动物检测纯化产物对胡桃醌诱导线虫体内活性氧（ROS）的抑制效应和对线虫存活率的影响。结果表明,黄连木多酚纯化产物体外抗氧活性强于黄连木叶粗多酚,强于维生素C,但稍逊于纯茶多酚;且能显著提高线虫的存活率和降低线虫细胞内ROS浓度。以上结果说明黄连木叶多酚是很好的天然抗氧化剂,具有在食品、医药、化妆品等领域广泛应用的潜力。