全文获取类型
收费全文 | 4782篇 |
免费 | 115篇 |
国内免费 | 224篇 |
出版年
2022年 | 4篇 |
2021年 | 2篇 |
2018年 | 58篇 |
2017年 | 243篇 |
2016年 | 113篇 |
2015年 | 225篇 |
2014年 | 350篇 |
2013年 | 240篇 |
2012年 | 212篇 |
2011年 | 176篇 |
2010年 | 148篇 |
2008年 | 19篇 |
2003年 | 228篇 |
2002年 | 1050篇 |
2001年 | 1296篇 |
2000年 | 73篇 |
1999年 | 111篇 |
1998年 | 54篇 |
1997年 | 31篇 |
1996年 | 59篇 |
1995年 | 27篇 |
1994年 | 29篇 |
1993年 | 94篇 |
1992年 | 45篇 |
1991年 | 23篇 |
1990年 | 41篇 |
1989年 | 36篇 |
1988年 | 117篇 |
1987年 | 1篇 |
1986年 | 1篇 |
1985年 | 1篇 |
1983年 | 1篇 |
1981年 | 1篇 |
1978年 | 1篇 |
1965年 | 2篇 |
1963年 | 7篇 |
1960年 | 1篇 |
1958年 | 1篇 |
排序方式: 共有5121条查询结果,搜索用时 15 毫秒
101.
日本血吸虫中国大陆株抱雌沟蛋白编码基因的克隆和表达 总被引:7,自引:0,他引:7
根据曼氏血吸虫抱雌沟蛋白SmGcp序列和日本血吸虫编码抱雌沟蛋白保守区的基因片段jGcp1分别设计三对引物,以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板 ,用RT-PCR法扩增出大小为1949bp的基因片段。经序列分析推断该基因片段含编码日本血吸虫抱雌沟蛋白基因的阅读框,与SmGcp碱基一致性为85%,其理论推测氨基酸组成与曼氏血吸虫抱雌沟蛋白的一致性为83.7%。将上述扩增的基因片段克隆到表达载体pET28c( )中,在大肠杆菌BL21中获得表达,融合表达产物分子量约为80kD。利用日本血吸虫成虫抗原免疫血清对该表达产物进行Western印迹检测,在预测位置出现了明显的识别条带,说明该编码日本血吸虫中国大陆株抱雌沟蛋白基因的表达产物具有抗原性。 相似文献
102.
人松弛素原样蛋白H2在大肠杆菌中的表达、分离纯化及鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
利用聚合酶链式反应方法 ,从含有人前松弛素原cDNA基因的质粒 pMALp2X-hRLXH2上得到人松弛素原H2的编码基因 ,亚克隆到温度诱导型原核表达载体pBV2 2 0上 ,转化大肠杆菌DH5α细胞。经 4 2℃温度诱导 ,获得了目的基因的高效表达。目的蛋白质以包含体的形式存在于大肠杆菌细胞中。菌体经过超声波破碎 ,包含体裂解 ,蛋白质的体外变性还原 ,复性 ,SephadexG 75凝胶过滤层析 ,反相快速蛋白质液相层析等一系列分离纯化过程 ,得到了高纯度的重组Met 人松弛素原样蛋白H2 ,得率约为 2~ 3mg/L。对纯化的目的蛋白质进行了SDS PAGE电泳纯度分析 ,氨基酸组成分析 ,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法测得目的蛋白质的分子量为 183 90 .4 (理论计算值为 183 92 .3 )。 相似文献
103.
卵泡刺激素(FSH)对有腔卵泡和排卵前卵泡的促生命作用已被普遍接受,但关于其对腔前卵泡发育的作用报道结果不尽相同,关于表皮生长因子(EGF)对腔前卵泡的作用尚不确切,本研究目的在于探讨人重组卵泡刺激素(rechFSH)和EGF对早期卵泡发育的作用,利用胶原酶消化法从12日龄的小鼠卵巢中分离得到卵母细胞-颗粒细胞复合体(OGCs)(Fig.1)。体外每孔30-40个培养物并分别添加胎牛血清(FBS),rechFSH和EGF。培养物每4天测量卵母细胞和OGCs直径,并每天照相,结果显示,rechFSH显著促进小鼠OGCs 及其卵母细胞的体外发育,这一作用可被EGF进一步增强(P<0.05)(Fig.2),但到第八天培养结束时,培养后的OGCs卵母细胞要显著小于体内期生长对照组(P<0.05)(Fig.3),说明FSH和EGF在卵泡早期发育中起重要作用。 相似文献
104.
105.
水稻抗性转基因研究进展 总被引:13,自引:0,他引:13
随着水稻遗传转化技术的发展,通过基因工程手段获得抗病虫划害及逆境水稻品种成为可能。本文综述了近年来国内外水稻抗性转基因的技术、方法和策略等研究现状、发展趋势、存在的问题及解决方法,对水稻抗性转基因在水稻育种上的应用也作了评价。 相似文献
106.
采用免疫组织化学方法和地高辛-碱酸酶标记原位杂交组织化学方法观察PTA1在大鼠胸腺、脾脏和淋巴结等淋巴器官中的定位分布。首次证实PTA1和PTA1 mRNA散在分布于大鼠脾脏和胸腺中,但在淋巴结中未见分布。本研究结果为全面了解PTA1在体内的分布及功能提供重要的实验依据。 相似文献
107.
本项研究是通过动物实验和现场采样研究汉坦病毒气溶胶传播感染。用感染的黑线姬鼠排泄物自然形成的病毒气溶胶进行实验。黑红姬鼠感染后第5天放入离乳小鼠和乳小鼠,暴露10d,检测不到抗体,感染后第7天,放 乳小鼠和乳小鼠,暴露10d,可以检测出抗体;黑线姬鼠在暴露15d时,可以检测出抗体,可见黑线姬鼠感染后,第4天可能是它向体外排毒的一个时间标志,且形成的病毒气溶胶具有感染性。对现场采集的空气样品和收集的打谷者佩戴的口罩样品的研究发现,在稻田堆放的稻捆根部和鼠栖息的草窝的空气中每350L空气中和打谷场脱粒机附近每96L空气中,含有至少一个具有生物活性的汉坦病毒粒子,结合流行病学调查结果,可以判定,汉坦病毒经空气传播吸入感染可能是秋冬季节肾综合征出血热发病的主要传播途径。 相似文献
108.
Ca^2+预处理对热胁迫下辣椒叶肉细胞中Ca^2+—ATP酶活性的影响 总被引:10,自引:0,他引:10
在常温下生长的辣椒(Capsicum annuum L.)叶肉细胞中Ca^2 -ATP酶主要分布于质膜、液泡膜上,叶绿体的基质和基粒片层上也有少量分布;在40℃下热胁迫不同的时间,酶活性逐渐下降,直到叶绿体超微结构解体。同样条件下,经过Ca^2 预处理后,分布在上述细胞器膜或片层上的酶活性大大提高,表明Ca^2 预处理对该活性具有激活作用;Ca^2 预处理对热胁迫下的超微结构的完整性具有一定的保护作用,并且能使Ca^2 -ATP酶在热胁迫下维持较高活性。结果表明,Ca^2 预处理增强辣椒幼苗的抗热性,可能与其稳定细胞膜、从而使Ca^2 -ATP酶在热迫下保护较高活性有一定关系。 相似文献
109.
鲎的分布及生活习性 总被引:6,自引:1,他引:6
鲎是一种古老的节肢动物,现存的鲎分为二亚科三属四种,本文对鲎在世界上的分布及其生活习性做了概述。 相似文献
110.
姬松茸在两种培养基上生长期间九种胞外酶活性变化 总被引:18,自引:0,他引:18
栽培在棉籽壳和麦草培养基上的姬松茸具有完整的胞外纤维素酶系;胞外CMC酶、FP酶、HC酶和蛋白酶活性呈周期性变化,其活性高峰对应于子实体的成熟期:胞外淀粉酶、漆酶和过氧化物酶在菌丝生长阶段活性较高,以后逐渐下降;胞外界胶酶和β-葡萄糖苷酶活性在整个栽培过程中变化不大;棉籽壳和麦草两种培养基中的九种胞外酶的活性变化趋势差异不大。 相似文献