呼吸道合胞病毒重组蛋白候选疫苗的质粒构建、表达及免疫原性和保护性研究

PCR扩增呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）M2 蛋白的CD8＋T细胞表位F/M2:81-95和RSV-G蛋白的B细胞表位片段G:125～225（简称G1）,以一个Linker连接,插入质粒pET-DsbA中构建原核表达重组质粒, 转染E.coli BL21(DE3)后成功表达了融合蛋白DsbA-G1-Linker-F/M2:81-95（简称D-G1LF/M2）,Western-blot结果表明该融合蛋白是RSV特异性的,采用Ni+螯合亲和层析法纯化变性的包涵体溶液,经梯度透析法复性,用该蛋白免疫BALB/c小鼠,结果表明被免疫小鼠肺部及血清中产生了高滴度的抗D-G1LF/M2及抗RSV IgG抗体和中和抗体,同时还诱导产生了RSV特异性的CTL应答;IgG的亚型IgG1/IgG2a的比值为2.66;用RSV攻击免疫后的小鼠,病毒滴定法检测肺部RSV滴度,结果表明D-G1LF/M2对小鼠肺部具有保护作用。     

双钩球蛛生物学特性观察

1998~2003年,作者在日照沿海松林内,对双钩球蛛(Theridion pinastri)的生物学特性进行了观察,结果表明,双钩球蛛在日照市沿海地区一年发生一代,翌年4月上旬出蛰,幼蛛5月下旬发育至成蛛,6月上旬交配,6月中旬产卵。卵期平均7.8 d,幼蛛期362.3 d,成蛛期51.3 d,雌雄比为3∶2。成蛛日食刺槐蚜(Aphis robiniae)12.1头,是多种小型害虫的重要天敌。该蛛与农药关系密切。在林内禁止使用化学农药是保护成幼蛛的关键。     

不同浓度NaCl对离体培养的滨梅茎段增殖生长和几种生理指标的影响

在离体培养条件下,经0．1％NaCl处理的滨梅茎段的不定芽增殖数、茎高、鲜重、干重,可溶性蛋白含量和硝酸还原酶活性均有提高,0．1％-0．3％NaCl处理的脯氨酸和丙二醛（MDA）含量无明显变化,在盐梯度0-0.5％NaCl浓度范围内叶绿素含量变化不明显。     

云南重楼野生驯化及栽培技术研究初探

云南重楼是一种常用名贵中药,近年由于野生资源受到无节制的采挖,药源趋于枯竭,云南重楼多生长在海拔2000m以上的冷凉高山菁沟林荫下,人工驯化以无性繁殖为主,在林下、遮荫网下或用蔓生植物作上层遮荫种植为宜。     

肌萎缩侧索硬化脊髓器官型培养模型的建立

利用谷氨酸转运体抑制剂苏—羟天冬氨酸(THA)制备选择性运动神经元凋亡的肌萎缩侧索硬化(ALs)脊髓器官型培养模型。取出生后8天乳鼠腰段脊髓组织切成脊髓薄片,在培养液中分别加入不同浓度THA,用SMI—32免疫组化染色对脊髓腹角α运动神经元进行鉴定,calretinin免疫组化染色对背角中间神经元进行鉴定,测定培养液中谷氨酸(Glu)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量,并与对照组比较。结果显示对照组α运动神经元数目恒定;THA引起培养液中剂量依赖性Glu、LDH含量增高和SMI—32阳性的α运动神经元数目减少,脊髓背角的中间神经元损伤相对较轻;100μmol／L THA组在体外培养4周后,细胞外Glu含量增高,SMI—32阳性的α运动神经元数目较对照组明显减少,背角的中间神经元数目无显著变化,可以制成ALS脊髓器官型培养模型。     

混沌放电的可兴奋性细胞对外界刺激反应敏感的动力学机制

在大鼠损伤背根节神经元受到去甲肾上腺(NE)、四乙基胺(TEA)和高浓度钙等剌激的实验中,观察到非周期放电的神经元明显地比周期放电的神经元对外界刺激的反应敏感程度高。现有的结果表明许多非周期放电的神经元实际上表现为确定性的混沌运动,比如混沌尖峰放电、混沌簇放电以及整数倍放电等。以修正的胰腺B细胞Chay模型为例,通过对其分岔结构的分析和对构成混沌吸引子的基本骨架的不稳定周期轨道的计算,揭示了分岔、激变和混沌运动对参数敏感依赖性是该现象产生的动力学机制。同时指出以往使用平均发放率来刻划可兴奋性细胞放电活动存在的缺陷,提出了一种新的利用周期轨道信息的刻划方法。     

不同生境下喜旱莲子草营养器官中抗氧化物质含量的比较

以水陆两种生境下生长的喜旱莲子草为实验材料 ,分别测定并比较了根、茎、叶可溶性蛋白及SOD、POD、Vc、GSH及绿原酸和类黄酮等抗氧化物质活性和含量 ,结果表明可溶性蛋白在叶中含量最高 ,并且水生环境中叶的含量高于陆生环境。除Vc外生态环境对各抗氧化物质含量影响具有一致性。水生环境下喜旱莲子草营养器官的抗氧化物质含量高于陆生环境下喜旱莲子草相应营养器官的含量。这是植物体内一种生理生化的生态适应     

海水胁迫对两种乌桕叶片保护系统的影响

利用盆栽试验研究了不同浓度海水（CK,9%,15%）胁迫在不同处理时间（4 h、8 h、12 h、24 h）下对两年生海滨晚霞乌桕（晚霞）和海滨紫晶乌桕（紫晶）幼苗叶片保护系统的影响。结果表明,晚霞乌桕脯氨酸（Pro）含量随着处理时间延长先降低后升高,紫晶乌桕Pro积累量则随时间延长先升高后降低。晚霞乌桕超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）活性均随时间延长先增加后降低,15%海水处理的过氧化氢酶（CAT）活性随着时间延长持续下降;海水处理抑制了紫晶乌桕SOD和POD活性,只有POD活性在处理24 h时显著高于对照。海水胁迫下晚霞乌桕丙二醛（MDA）含量随时间延长先降低后升高,紫晶乌桕MDA含量只有在15%海水处理24 h后显著高于其他处理。相关性分析表明,MDA含量与Pro含量、SOD活性呈显著负相关关系（P<0.05）,而与POD活性则呈极显著负相关关系（P<0.01）,而CAT活性与其他指标都不存在显著相关性（P>0.05）。本研究表明,晚霞乌桕在受到海水胁迫时主要通过提高POD活性清除ROS,紫晶乌桕则可能主要依靠提高CAT活性以抵御海水胁迫;相较晚霞...     

赤霉素诱导甘蔗节间伸长的cDNA-AFLP差异显示

以‘新台糖22号’甘蔗为材料,在其伸长初期以200mg/L的赤霉素进行叶面喷施处理,对照喷清水,分别提取对照和处理(0、6、12、24h)的总RNA进行等量混合,获得2种不同处理的样品池,采用cDNA-AFLP技术对赤霉素诱导下甘蔗节间伸长的差异表达进行分析。结果显示:(1)通过169对引物组合的选择性扩增,共得到了约11 000条大小在50～700bp的cDNA片段,获得186条差异条带。(2)经反向Northern杂交,于结果显示阳性的TDFs中选取56个片段进行克隆和序列分析,获得56条大小在80～500bp的差异条带。(3)经BLAST分析,按功能可将获得的56条TDFs分为7类,分别为能量与代谢相关基因、未知功能蛋白、未知基因、植物抗性相关基因、细胞壁生物合成与修饰相关基因、信号传导相关基因和转录因子相关基因。该研究获得了一些与甘蔗节间伸长相关的差异基因片段,为进一步研究甘蔗节间伸长的分子机理奠定了基础。     

用酵母双杂交系统筛选影响apo-AI和SR-BI相互作用的苦豆子活性成分

本文通过将苦豆子总提取物及其分离得到的10个组分加入含有AH109菌株(携带大鼠apo-AI及其受体SR-BI全基因)的培养基中,利用报告基因半乳糖苷酶活力有无变化来寻找能够促进大鼠载脂蛋白apo-AI及其受体SR-BI相互作用的激动剂.经测试,我们观察到苦豆子总提取物(K-1),在上述系统中能显著增强这两种蛋白的相互作用.继续用硅胶柱层析方法从k-1中分出10个组分后,利用酵母双杂交系统再次筛选,发现有五个组分能增强两种蛋白的相互作用,(与空白对照组相比其中有两个组分有极显著差异)另外三个组分显著地抑制上述两种蛋白的相互作用,剩下的两个组分则没有差异.该实验还提示该酵母双杂交系统可能成为一种跟踪具有调脂功能的先导化合物的有效方法.