Bacillus sp. fmbJ224发酵产新型抗菌肽培养基的优化研究

采用Plackett-Burman设计(Plackett_Burman Design,PB) 法,对影响Bacillussp.fmbJ224产新型抗菌肽的17个因素进行了筛选。结果表明：影响该菌发酵产新型抗菌肽的主要培养基成分为葡萄糖、NH₄NO₃、谷氨酸、CaCl₂、MnSO₄。在此基础上,再采用响应曲面法(Response Surface Methodology RSM)对其5个显著因子的最佳水平范围进行研究。通过对二次多项回归方程求解得知,在上述自变量分别为葡萄糖8.13g/L、NH₄NO₃6.14g/L、谷氨酸4.2g/L、CaCl₂ 3.98mg/L、MnSO₄4.87mg/L时,新型抗菌肽的产量从1304.21μg/mL提高到了1487.58μg/mL。     

自制的人尿红细胞生成素活力测定 Ⅰ、多血小鼠红细胞~(59)Fe掺入法

红细胞生成素(Erythropoietin,以下简称EPO)是高等动物及人类造血活动中一个十分重要的生理调节因子。在临床研究中,EPO活力测定有助于对各种原因引起的贫血或多血症的鉴别诊断;在红系造血祖细胞体外培养研究中,EPO是一个不可缺少的刺激因子。因此EPO活力测试在临床血液病和实验血液学研究中都是一个重要的、有应用价值的研究课题。     

高纯度T4DNA连接酶的简便快速纯化

我们采用简便、快速、重复性好的肝素-琼脂糖和蓝色葡聚糖-琼脂糖柱两次亲和层析方法,纯化得到了高纯度的T4-DNA连接酶。纯化了近690倍,比活高达5900单位/毫克蛋白。没有检测到脱氧核糖核酸酶的污染。聚丙烯酰胺-S.D.S.电泳显示清晰的一条蛋白带。     

嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的化学修饰

 蛋白酶是嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)的重要致病因子 .为研究其结构与功能之间的关系 ,用DEPC、EDC、PMSF、N AI等 9种化学修饰剂处理嗜水气单胞菌J 1株胞外蛋白酶ECPase54,然后检测残余酶活力 ,借以研究酶分子中氨基酸侧链基团与酶活性中心的关系 .结果表明 ,羧基、丝氨酸、ε 氨基、胍基等残基与酶活性无关 ;半胱氨酸残基与酶活性也无直接关系 ;而色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基侧链以及二硫键的化学修饰引起酶活性的大幅度的下降 ,说明色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基以及二硫键是酶活力所必需的基团     

大肠杆菌T4噬菌体DNA连接酶基因(G30)在无性繁殖系细胞中的表达

从T₄基因30的无性繁殖系细胞中,用一般提取T4 DNA连接酶的方法,分离纯化得到与T₄ DNA连接酶相同的酶。无论从它在DEAE-纤维素和磷酸纤维素柱上的层析行为,或从用T₄ DNA连接酶酶活标准测定法测定结果,都说明它与T₄ DNA连接酶是相同的,这就表明T4DNA连接酶基因(即基因30)在无性繁殖系的大肠杆菌细胞中已被表达。     

入侵植物欧洲千里光内生固氮菌和溶磷菌多样性

【背景】菊科(Asteraceae)外来入侵植物欧洲千里光(Senecio vulgaris L.)来源于欧洲,广泛分布于我国西南和东北地区,在湖北高海拔山区也有分布。在入侵过程中,内生细菌可能在其获取氮磷营养方面起到了一些关键性作用。【目的】探究欧洲千里光内生固氮菌和溶磷菌的多样性和功能,为理解其入侵机制及防治提供参考。【方法】选择来自6个不同种群的种子,萌发后转移到花盆生长6-8周,并从每个种群中各挑选9株生长情况良好的植株,对其叶片和根组织表面进行消毒处理。使用基于nifH基因(固氮功能基因)的高通量测序方法对植物的固氮微生物群落结构和多样性进行研究。通过涂布平板法和平板划线法,在固体无氮培养基(Ashby)和无机磷培养基(inorganic phosphate, NBRIP)上对植物内生菌进行分离、纯化,对纯化的固氮菌株和溶磷菌株进行16S rRNA基因测序。采用钼锑抗比色法分析纯化溶磷菌株的溶磷能力。【结果】基于nifH基因的内生菌高通量测序结果表明,欧洲千里光叶样本中固氮菌多样性显著高于根样本;固氮菌群落中丰度最高的属是慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium,30.9%...     

土拨鼠肝炎病毒感染模型在乙型肝炎研究中的应用

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)是嗜肝DNA病毒的原型,HBV感染所致的乙型肝炎是严重危害我国人民身体健康的公共卫生问题。现有的抗乙肝药物包括核苷类似物和干扰素均难以达到临床治愈,研究新的抗乙肝药物、评价新的联合治疗策略均离不开合适的动物模型。土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus, WHV)于1978年美国费城动物园患肝癌的土拨鼠中首次被发现,因其基因组结构、复制周期与HBV高度近似,被归类为嗜肝DNA病毒。WHV感染土拨鼠后的自然史与HBV感染人高度近似,因此土拨鼠模型很早就被用于乙肝DNA疫苗、抗HBV药物的评价。近年来土拨鼠多种细胞因子及其受体、免疫细胞表面标志先后被克隆和鉴定,T细胞应答的检测方法包括淋巴细胞增殖实验、CD107a脱颗粒实验逐步被建立,大大促进了土拨鼠模型在HBV发病机制及免疫调节治疗中的应用。本文主要综述了WHV感染土拨鼠模型的免疫学特征,以及该模型在抗乙肝病毒药物评价和免疫调节治疗中的应用。     

益生素对祖代伊沙蛋鸡性能的影响

２５６９羽祖代伊沙蛋鸡（ＩＳＡＢｒｏｗｍ）,随机分成２组。试验组１１５３羽,在基础日粮中添加０１５％的益生素,对照组１４１５羽饲喂基础日粮,不添加益生素,试验期３０天。试验结果表明,试验组和对照组的平均产蛋率分别为７２３２±４１４％和６６７３％±６６１％,试验组较对照组高８３８％,差异极显著（Ｐ＜００１）;试验组和对照组的种蛋合格率分别为６２９１％±５９０％和５４５２％±７７８％,试验组比对照组高１５３９％,差异极显著（Ｐ＜００１）;试验组的种鸡成活率较对照组高０３９％,差异不显著;试验组和对照组的鸡舍温度分别为３５８７℃±１６７℃和３４９７℃±１７０℃,试验组较对照组高０９℃,差异显著（Ｐ＜００５）。该试验结果提示,在高温季节使用益生素,具有延缓蛋鸡产蛋率及种蛋合格率下降作用;通过分析产蛋率及种蛋合格率相关性和回归模型表明,益生素能显著地影响产蛋率和种蛋合格率的相关性,提高种蛋合格率。     

松针的利用价值分析

松针的利用价值分析胡丰林,陆瑞利（安徽农业大学森林利用学院,合肥,２３００３６）松针是指松科树木的针叶,松科树木为世界上分布最广、资源量最大的树种之一。全世界共有１０属２３０种,我国有１０属１２０余种,其中大部分为重要的用材树种和经济树种。对于松材、...