烟碱型乙酰胆碱受体在面神经支配的口轮匝肌和躯体神经支配的腓肠肌中的表达差异研究

目的:研究烟碱型乙酰胆碱受体在在面神经支配的口轮匝肌和躯体神经支配的腓肠肌运动终板处的表达差异及可能的原因。方法:分离SD大鼠的口轮匝肌和腓肠肌,通过免疫共沉淀技术计算口轮匝肌和腓肠肌肌肉特异性激酶(Muscle Specific Kinase,MuSK)的表达以及MuSK磷酸化水平。对MuSK的上游信号通路中能使其发生磷酸化的集聚蛋白Agrin、低密度脂蛋白受体相关蛋白4(low-density lipoprotein receptor-related protein 4,Lrp4)以及表皮生长因子家族受体ErbB2、ErbB3和ErbB4(epidermal growth factor receptor)免疫荧光染色,计算这两条不同通路中的蛋白在运动终板处的表达水平。结果:口轮匝肌中MuSK磷酸化水平显著高于腓肠肌(P<0.05)。口轮匝肌与腓肠肌的运动终板处的Agrin和Lrp4表达没有显著差异(P>0.05)。口轮匝肌ErbB2、ErbB3、ErbB4的表达显著高于其在腓肠肌运动终板处的表达(P<0.01)。结论:口轮匝肌和腓肠肌运动终板ErbB、ErbB3、ErbB4的差异表达造成MuSK磷酸化水平不同,可能是两种肌肉运动终板处烟碱型乙酰胆碱亚基表达量不同的原因。     

香蕉束顶病毒海口分离物核穿梭蛋白(NSP)的纯化及抗血清制备

本研究以本实验室保存的含重组载体pDEST17-NSP的原核表达菌株E.coli BL21(DE3)为材料,于25℃、0.1 mmol/L IPTG条件下诱导4 h,集菌后超声波破碎,获得以包涵体形式表达的约20 kD的融合蛋白.实验结果表明,将沉淀的融合蛋白溶于含6 mol/L尿素的Binding Buffer中,再经Ni2+-NTA亲和层析纯化后,可获得高纯度的融合蛋白.将纯化融合蛋白经12%SDS-PAGE电泳,切胶回收目的带,液氮研磨并按1:1(W/V)混合佐剂,4次免疫家兔,获得BBTV病毒核穿梭蛋白的特异性抗血清.以融合蛋白作抗原,间接ELISA法测定其抗血清效价为1:5 000.田间检测样品的最佳抗血清工作浓度为1:500.Western Blot鉴定结果表明抗血清能与目的蛋白特异性结合.本研究的结果将为下一步NSP基因转录调控和蛋白功能研究奠定一定基础.     

MSG-肝再生-大鼠下丘脑神经细胞凋亡及相关基因TGF-β1的表达

目的：探讨MSG－肝再生－大鼠下丘脑神经细胞凋亡的机理。方法：光镜、电镜及原位末端标记技术观察MSG－肝再生－大鼠下丘脑弓状核神经细胞凋亡;免疫组织化学方法观察ARN的TGF－β1的表达。结果：随着ARN神经细胞凋亡指数（AI）增高,其TGF－β1表达亦相应增强。结论：神经元胞浆钙离子过度负荷和TGF－β1蛋白共同参与了MSG－肝再生－大鼠ARN神经细胞凋亡的调控。     

凤尾菇和裂褶菌原生质体非对称融合研究

具有双重营养缺陷型的裂褶菌单核体突变菌株的原生质体经过灭活处理后作为供体与同样带有营养缺陷型标记的风尾菇单核体原生质体融合,得到大量生长速度和菌落形态差异较大的多核体和双核体融合子．这些融合子主要显示了供体菌株的特性,数次转接后,有的融合子从多核体转变成双核体,有的融合子完全恢复了供体亲本双核体的遗传特性,同时获得了一些有意义值得继续探讨的新的生理特性,如菌丝体在木屑 皮以及废棉培养料上生长速度较快,在平板培养基和木屑培养料上均较早较快地形成原基和子实体等．结果表明原生质体非对称融合是一种效率较高的融合方式,可以作为食用菌育种的一种有效途经．     

福建顺昌县药用两栖动物资源及其保护

报道了顺昌县10种药用两栖动物种类及其药用价值,并就该县药用两栖动物资源保护进行了探讨。     

游蛇

~~游蛇@李其斌 @鸟羽通久     

用神经网络和遗传算法优化怀槐悬浮细胞合成异黄酮

为了获得怀槐悬浮细胞合成异黄酮的最适培养条件 ,采用ANNs(人工神经网络 )结合RAGA(实数编码加速遗传算法 )对培养基组成进行全局寻优。培养基中影响异黄酮染料木素产率的主要组成是KNO3、(NH₄)₂SO₄ 、2 ,4 D和 6 BA。在它们的有效作用浓度范围内 ,用随机10组培养基组合及细胞染料木素产率为输入和输出由ANNs对数据建模 ,由RAGA优化模型参数。建立的优化模型准确性高 ,依赖模型由RAGA全局寻优获得的最佳培养基组合是149.68mg L (NH₄)₂SO₄ 、2.936 1.0mg LKNO3、0.01mg L 2 ,4 D和 0.19mg L6-BA ,染料木素产率达14.13mg L ,与模型预测值的误差为 7.38%。结果表明 ,运用神经网络结合遗传算法优化怀槐细胞合成异黄酮的培养条件是可行的 ,优化后的培养基使怀槐细胞异黄酮合成能力比优化前有很大的提高.     

四爪陆龟的活动节律

本文报道了四爪陆龟（Ｔｅｓｔｕｄｏ ｈｏｓｆｉｅｌｄｉ）自出蛰到入蛰过程的活动节律。四爪陆龟于３月末４月初出蛰，出蛰后的早期活动为单峰型，高峰期在１３－１５点钟时，活动性不强。之后直至入蛰的活动为双峰型，两峰约在上午１０－１２点钟和下午１８－２０点钟。日活动可分为转身期、日光浴期、前活动期、避暑期、后活动期和夜息期。６月末７月初开始入蛰，有的可持续到８月。自４月到８月，平均昼夜活动时间为６．７小时     

慢生型大豆根瘤菌的结瘤基因转入快生型大豆根瘤菌中

通过三亲本杂交把慢生型大豆根瘤菌USDAllO的基因文库转移至Tn5诱变的不结瘤的快生型大豆根瘤菌321,338中,用链霉素和四环素平板选择大量接合子,接种大豆,通过结瘤基因功能互补,获得7个根瘤,从中分离出的每个菌株都仍具有链霉素和四环素抗性。分离其质粒,发现每个菌株都多了一条较载体质粒pLAFRl分子量大的质粒。将这些质粒转移至大肠杆菌HBl01中,分离其质粒,用32P标记的ncd探针进行DNA—DNA分子杂交,除载体质粒pLAFRl为阴性反应外,其他重组质粒均为阳性反应,即所获得pLAFRl克隆的DNA片段上确有nod结构基因。回收重组质粒pLAFRl：：nod,用限制性内切酶EcoR I进行酶切,从其琼脂糖凝胶电泳图上估计pLAFRl上克隆的DNA片段分子量为32kb。