参与植物膜泡运输的蛋白质家族及功能研究进展

真核细胞的内吞和分泌途径中蛋白质和脂类的运输主要由膜泡运输介导。参与膜泡运输的蛋白质家族包括SNARE蛋白家族、RAB蛋白家族、被膜蛋白复合体、Sec1蛋白家族、Arf蛋白家族。这些蛋白质家族在进化中高度保守,并且在植物中已经鉴定了许多哺乳动物和酵母蛋白的同源物。近年来一些研究发现这些蛋白质不仅仅调节植物细胞的膜泡运输,还影响植物的许多生理活动和功能,例如向重性生长、胞质分裂、激素极性运输、气孔运动以及抗病性等。现主要阐述迄今在植物中研究这五类蛋白质家族功能的最新进展。     

湖北省兴山县黏菌的物种组成与生态特征

湖北省宜昌市兴山县地处北亚热带,位于秦巴山区向江汉平原的东延区域,属“三峡库区”,气候湿润,植被主要为常绿阔叶与落叶阔叶混交林,适宜黏菌生长。为全面掌握该县黏菌的物种资源组成,从而加强对“三峡库区”生物多样性的认识,在2016年10月至2018年8月,于不同季节在该县进行了10次黏菌多样性调查和标本采集,同时收集基物进行湿室培养,共获得黏菌标本215份,根据形态特征鉴定为6目9科25属56种。黄褐筛菌Cribraria aurantiaca Schrad.、多变无丝菌Licea variabilis Schrad.和盖碗菌Perichaena corticalis (Batsch) Rostaf.等25种为湖北省首次记录,宽肋筛菌Cribraria martini Nann.-Bremek.为中国亚热带地区首次报道的物种。对不同生境中黏菌分布状况的分析表明,该地黏菌物种发生最多的月份为6月,发生最多的基物为腐木,在不同海拔高度中黏菌的分布存在差异。     

新冠病毒主蛋白酶特异性荧光底物ddRFP-M的制备与鉴定

传统的新冠病毒主蛋白酶(main protease, Mpro)多肽底物具有制备成本高、稳定性差和合成工艺复杂等缺点,积极开发廉价稳定的新型底物具有重要意义。本研究基于二聚化红色荧光蛋白(dimerization-dependent red fluorescent protein, ddRFP)原理,以AVLQS为连接肽,利用基因工程技术制备Mpro特异性荧光底物ddRFP-M,用于Mpro抑制剂的药理活性评价。将连接肽基因插入到密码子优化的RFP-A₁与RFP-B₁基因之间,构建ddRFP-M基因,再将其克隆到pET-28a载体中构建重组质粒。将重组质粒转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,以卡那霉素抗性法筛选重组子。重组子经低温诱导后,在大肠杆菌中进行荧光底物ddRFP-M的可溶表达,并以HisTrap^TM层析柱进行分离纯化。以荧光动力学检测法和电泳法测定ddRFP-M的底物特异性,并利用荧光底物ddRFP-M评价恩赛特韦和黄芩素的药理活性。结果显示,荧光底物ddRFP-M在大肠杆菌中呈可溶表达并成功进行了分离纯化,其具有良好的底物特异性、灵敏性和可靠性。新冠病毒Mpro特异性荧光底物ddRFP-M的制备,为新冠病毒Mpro抑制剂的药理活性评价奠定了基础。     

薏苡仁多菌发酵液的菌种优选及其抑制黑色素生成的作用研究

以薏苡仁作为发酵基质,确定利于提高发酵液体外活性的较优乳酸菌种,并分析优势乳酸菌种薏苡仁发酵液对斑马鱼胚体黑色素生成的抑制作用。通过比较分析乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）、嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）和保加利亚乳杆菌（Lactobacillus bulgaricus）3种单一乳酸菌和三者复合乳酸菌的薏苡仁发酵液的还原糖、总酚、游离氨基酸、蛋白、总酸和乳酸含量等理化指标及体外羟自由基清除能力和酪氨酸酶活抑制率确定较优发酵菌种,采用高通量测序测定发酵过程中微生物菌群结构;利用斑马鱼模型研究发酵液对黑色素生成的抑制作用。研究结果表明,采用乳酸乳球菌、嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌3种乳酸菌复合发酵比单一乳酸菌发酵更具优势。使用以上菌种复合发酵薏苡仁过程中,乳酸乳球菌和嗜热链球菌为发酵前期优势菌群,发酵中后期则以保加利亚乳杆菌为优势菌群。经复合乳酸菌发酵后,薏苡仁发酵液的羟自由基清除率和酪氨酸酶活抑制率分别提高了20.82%和87.26%;斑马鱼模型实验结果表明,薏苡仁发酵液可以显著减少斑马鱼体表黑色素分布,当使用含量为2.0%时,对黑色素...     

祁连山国家公园牧民对雪豹(Panthera Unica)保护的态度认知及其影响因素

祁连山地区是中国乃至全球雪豹(Panthera Unica)分布最集中、种群密度最高的地区之一，该地区的雪豹科学保护对于全球雪豹种群具有重要意义。了解祁连山国家公园牧民对雪豹保护的态度认知、探究影响牧民对雪豹保护态度的主要因素，对于保护国家公园生态系统的原真性、促进人与野生动物和谐共处具有重要意义。基于半结构式访谈对祁连山国家公园牧民进行了随机抽样调查，结果表明：(1)受访者认为狼(n=34, 91.89%)和雪豹(n=16, 43.24%)是最重要的两种致害野生动物；(2)所有受访者对雪豹保护均持积极态度；(3)受访者认为野生动物捕杀(n=14, 50.00%)和草场退化(n=9, 32.14%)是家畜面临的两大威胁因素；(4)“雪豹捕杀家畜”和“为家畜购买商业保险”是影响牧民对雪豹保护态度的关键因素(P<0.05)。为促进人与野生动物长期共存，需要各级政府以国家公园体制建设为契机，进一步加强科学研究，制定更加科学合理的野生动物保护与管理措施。     

肺结核患者治愈后复发危险因素分析及耐药状况调查

目的:研究肺结核患者治愈后复发危险因素以及耐药状况。方法:回顾性分析我院于2015年5月～2017年12月期间收治的1000例肺结核患者的临床资料。对所有患者均进行为期2年的随访观察,统计复发情况。将所有患者按照治愈后复发与否分成复发组58例以及无复发组942例,比较两组患者基线资料情况,包括年龄、性别、耐药、吸烟、职业类型、居住情况以及空洞,并对影响肺结核患者治愈后复发的因素作多因素Logistic回归分析,对所有治愈后复发患者的耐药情况进行检验,分析其耐单药、耐2药、耐3药、耐4药人数的占比情况。结果:1000例肺结核患者治愈后复发58例,复发率为5.80%。肺结核患者治愈后是否复发与性别、年龄、吸烟无关(P0.05),复发组耐药、体力型工作、流动人口、空洞患者的比例高于未复发组(P0.05)。经多因素Logistic回归分析可得:耐药、体力型工作、流动人口、空洞均是肺结核患者治愈后复发的独立危险因素。58例患者中发生耐药例数27例,耐药率为46.55%;其中耐单药、耐2药、耐3药、耐4药人数分别为8、10、7、2例,相应占比为13.79%、17.24%、12.07%、3.45%。结论:肺结核患者治愈后复发的风险较高,尤其应注意耐药、体力型工作、流动人口、空洞的患者,以降低疾病复发,且肺结核复发患者的耐药情况不容乐观。     

天津滨海湿地不同生境芦苇种群生长动态变化对比研究

目的：探究不同生境条件下芦苇种群生长动态变化规律。方法：对天津滨海湿地三个不同生境条件（S1、S2、S3）的芦苇分株密度、分株生物量、土壤的理化指标进行监测，并对芦苇分株密度、分株生物量与土壤理化性质之间相关性进行分析。结果：（1）各月份土壤含水率、土壤pH和土壤可溶性盐含量的变化规律一致：S1S2>S3。（2）各月份芦苇分株密度和分株生物量变化规律一致：S1>S2>S3；并且三个不同生境下芦苇分株密度和分株生物量的变化规律表现为在生长初期的5月份最低，随着月份的增加而增加，9月份达到最大值，10月各指标开始呈现下降趋势。（3）不同月份影响芦苇分株密度和分株生物量的土壤因素不一致。结论：滨海地区土壤含盐量和pH以及养分是影响芦苇种群生长的关键因素。     

GCRV感染存活草鱼的血清蛋白表达特性

为挖掘草鱼关键抗性分子,研究利用4D label-free定量蛋白质组学技术系统分析了团队前期获得的GCRV感染存活草鱼(候选抗性草鱼)与对照草鱼的血清蛋白表达差异。共鉴定到858个草鱼血清蛋白, 329个蛋白在两类草鱼中差异表达,其中163个蛋白在候选抗性草鱼血清中显著高表达, 166个蛋白显著低表达。差异表达蛋白的功能主要注释为体液免疫反应调节相关蛋白,显著富集到补体凝血级联、细胞黏附和铁死亡等信号通路。对差异表达的免疫相关蛋白进行分析发现,候选抗性草鱼血清中体液免疫分子MASP2、C4a、C4b、C7b、C8b、C8g、C9、CFI、C3a.1、C3a.2、C3a.3和C3a.6等补体和抗原提呈相关免疫分子MHC1UBA和IGL4V8等蛋白表达水平显著高于对照草鱼,而T细胞免疫相关分子TRAV、IGHV1-1、IGHV2-1、IGHV6-1、IGHV3-2和IGHV11-2等蛋白表达水平显著低于对照草鱼。免疫印迹检测进一步证实,以C3和IgM为代表的体液免疫分子在候选抗性草鱼血清中显著高表达,可能与草鱼抗病能力关联。研究将为高抗性草鱼的选育提供可参考的分子资源。     

水稻生育期对稻水象甲成虫种群空间格局影响及抽样技术

[目的] 明确四川省西南浅丘稻区稻水象甲成虫种群在水稻不同生育期的空间格局及抽样技术，为获取准确稻水象甲虫情调查资料和制定有效的综合防控措施提供理论依据。[方法] 调整水稻播栽时间，错开2组试验田水稻的生育期，用聚集度指标法、回归模型法和频次卡方检验法分析稻水象甲成虫种群的空间格局及水稻生育期对空间聚集特性的影响，并对田间序贯抽样技术和抽样方法进行研究。[结果] 不同田块稻水象甲成虫平均密度为0.48~5.83头·丛^-1，分蘖期水稻田虫口密度显著高于抽穗期。稻水象甲成虫在不同水稻生育期稻田间呈负二项聚集分布，基本成分为个体群，个体间相互吸引，聚集强度随种群密度的升高而增加。当种群密度较低时，其聚集由环境因素引起；种群密度较高时，其聚集为其自身的聚集习性与环境因素共同引起。双对角线抽样法是稻水象甲成虫田间抽样的最佳方法，当稻水象甲成虫防治指标为1头·丛^-1时，Iwao序贯抽样模型为T_1（n），T_0（n）=n±1.96√2.286n，结合Kuno序贯抽样模型建立了用于田间抽样的复序贯抽样图。[结论] 稻水象甲成虫在不同水稻生育期稻田间呈负二项聚集分布，分蘖期水稻田虫口密度显著高于抽穗期，双对角线抽样法是稻水象甲成虫田间抽样的最佳方法。     

长江口南汇边滩不同植被类型营养盐削减效果

湿地具有良好的吸收净化能力，能够有效去除水体中的氮、磷等污染物。为探究潮滩湿地削减营养盐的效果，本研究于2020年8月、11月和2021年1月、4月，对长江口南汇边滩光滩、海三棱藨草(Scirpus mariqueter)和互花米草(Spartina alterniflora)3种生境不同深度沉积物孔隙水溶解态无机氮(DIN)和溶解态无机磷(DIP)浓度进行观测，并分析其与沉积物环境因子的相关性。结果表明：植物生境沉积物孔隙水中DIN和DIP浓度显著低于光滩(P<0.05),其中互花米草生境(82.5%～97.3%)DIN相对削减率高于海三棱藨草生境(25.5%～75.8%),互花米草生境(54.1%～83.9%)DIP相对削减率高于海三棱表藨草生境(55.7%～76.4%);深层沉积物孔隙水NH₄⁺-N和PO₄^3--P浓度显著高于表层(P<0.05),而NO₃^--N呈相反趋势。季节上，3种生境孔隙水DIN浓度均表现出夏季低、冬季高的特点，而D...