生物异源物质对小球藻基因转录研究体系的建立(英文)

藻类是水生生态系统中的敏感物种。在环境生物学研究中,基因转录水平通常作为衡量基因表达水平变化的指标。研究建立了定量PCR技术(Real-time PCR)检测小球藻基因转录变化的研究体系。以3个主要光合作用基因(psaB、psbC、rbcL)为靶标基因,研究了除草剂草丁瞵(Glufosinate)、阿特拉津(Atrazine)和禾草灵(Diclofop-methyl)对基因转录的影响,结果表明3种供试药物对小球藻光合作用基因psbC和rbcL相对表达量有显著地抑制作用。这表明Real-time PCR可以作为评定水生环境中异源化合物毒性的有效方法。     

D-泛解酸内酯水解酶的定向进化

易错PCR结合DNA改组方法向D-泛解酸内酯水解酶基因中引入突变,并构建突变体库。利用酶的催化特点和产物特性建立了基于平板初筛和高效液相复筛的两步法D-泛解酸内酯水解酶活性筛选系统。用该筛选系统以酶活力和pH稳定性为指标对突变体库进行筛选,最终获得一株酶活力高且在低pH条件下稳定性好的突变体Mut E-861。该突变体的酶活力是野生型酶的5.5倍。对突变体和野生型酶在pH 6.0和pH 5.0条件下的残余酶活进行对比,在这两种pH条件下,突变体酶的酶活残留分别为75%和50%,而野生型酶只能保持原来的40%和20%。通过软件对突变体Mut E-861酶基因和野生型酶基因进行分析对比,发现突变体Mut E-861酶基因发生了三处点突变,其中突变使两处氨基酸取代,另一处为沉默突变,未引起氨基酸的变化。     

球形红杆菌L2的生物学特性及其应用

从淀粉废水中分离获得一株光合细菌,经形态特征,培养特征,生理生化特征及Ｇ＋Ｃｍｏｌ％含量等生物学特性分析,确定为球形红杆菌（Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ）Ｌ２。该菌应用于淀粉废水处理,ＣＯＤ去除率达９５．７％发酵产类胡萝卜素,产量达２９５ｍｇ／Ｌ;作为饲料添加剂进行肉鸡饲喂,增重１６．４０％。     

栽培黄瓜与野黄瓜正反杂交的几种同工酶分析

运用天冬氨酸转氨酶(AAT)、苹果酸脱氢酶(MDH)以及酯酶(EST)3种同工酶对栽培黄瓜"长春密刺"Cucumis sativus cv. Changchunmici (2n=14)与野黄瓜C. hystrix (2n=24)的正反交种间杂种F1 (正交: 野黄瓜×栽培黄瓜"长春密刺", 反交: 栽培黄瓜"长春密刺"×野黄瓜)及其双亲进行鉴定和比较研究。结果表明: 正反交种间杂种F1主要表现为双亲酶带的互补, 同时还形成4个杂合带(Aat-1-94、Aat-2-104、Mdh-3-102和Est-5-102)。上述3种酶均能准确地鉴定种间杂种的真实性。研究还发现正反交杂种F1的AAT和MDH的酶谱分别在酶带数目和强弱上表现出一定的差异, 进一步证实了野黄瓜与栽培黄瓜杂交存在正反交差异。     

冬虫夏草MYB家族基因鉴定及其在生长发育中的表达分析

MYB蛋白是一类广泛存在于真核生物中的转录因子,在真菌的生长发育中发挥调控作用。本研究对冬虫夏草菌中的潜在MYB转录因子家族基因进行了全基因组鉴定和生物信息学分析,并研究了MYB家族成员在冬虫夏草生长发育不同阶段和不同部位的表达模式。结果表明,冬虫夏草MYB转录因子家族包含3个1R-MYB和3个2R-MYB;6个MYB转录因子蛋白均包含近50个保守氨基酸序列,形成螺旋-转角-螺旋的结构。通过分析MYB转录因子基因在不同发育阶段（MYB-1-6）和子实体不同部位（MYB-1、3、6）的相对表达量,发现MYB-1在冬虫夏草整个发育阶段表达较为稳定,MYB-3在子实体成熟阶段（MF）表达量最高,远高于其他阶段,且在MF的顶部可育部分MF-3高表达,表明其可能参与冬虫夏草子实体的有性发育;MYB-6在子座发育初期（YF）的中部YF-2表达量最高,为菌丝阶段（HY）的5倍,表明MYB-6可能参与子座柄部的伸长。     

鼻内镜下鼻中隔软骨、筛骨垂直板或耳屏软骨修补鼻中隔穿孔

目的:探讨鼻内镜下应用颞肌筋膜包裹自体鼻中隔软骨、筛骨垂直板或耳屏软骨修补鼻中隔穿孔的临床疗效。方法:回顾性分析2007年8月至2014年8月我院17例行鼻内镜下鼻中隔穿孔修补术患者的临床资料,所有患者术前均行鼻内镜及副鼻窦CT检查,术中分别采用颞肌筋膜包裹自体鼻中隔软骨、筛骨垂直板或带软骨膜的自体耳屏软骨,形成骨性支架,修补鼻中隔穿孔。术后均予抗生素抗感染,并用碱性成纤维细胞生长因子凝胶涂抹创面,促进周边黏膜向穿孔处生长。结果:17例患者均一次修复成功,术后1~2月穿孔处被黏膜完全覆盖,鼻中隔正常解剖结构得以恢复,随访1~3年无再次穿孔,鼻中隔穿孔产生的临床症状术后改善明显。结论:鼻内镜下应用鼻中隔软骨、筛骨垂直板或耳屏软骨修补鼻中隔穿孔安全、有效、简便,值得推广。     

PLD途径合成的PA增强高表达转玉米C4型pepc水稻悬浮细胞中PEPC酶活性

为了研究外源信号分子对高表达玉米C₄型pepc酶活性的调节机制,本实验以高表达玉米C₄型pepc水稻（PC）和原种水稻Kitaake（WT）的悬浮细胞系为材料,研究葡萄糖、胡蜂蜂毒肽（mastoparan,Mas）及其磷脂酸（phosphatidicacid,PA）的两个合成途径的专一性抑制剂（磷脂酶D（phospholipaseD,PLD）的专一性抑制剂正丁醇和磷脂酶C（phospholipaseC,PLC）的专一性抑制剂新霉素）对供试材料PEPC活性的影响。结果表明,3%葡萄糖处理0.5h对WT的PEPC酶活性抑制最明显;相对于PC,则5%的葡萄糖处理5h时,对其PEPC酶活性抑制的最明显。5mmol/L的Mas对WT和PC悬浮细胞的PEPC酶活性分别抑制了约60%和40%。0.01mmol/L、0.1mmol/L和1mmol/L新霉素处理对WT的PEPC酶活性影响不明显,且无时间效应;与WT相比较,不同浓度的新霉素均增强了PC的PEPC酶活性,其中0.1mmol/L新霉素处理增加为对照的约7倍。正丁醇处理明显抑制了WT的PEPC酶活性,但不同浓度处理之间却没有显著差异;而对于PC,0.02%、0.04%正丁醇处理使得PEPC酶活性显著下降,且比WT的更显著。同时0.04%的正丁醇的抑制效应具有明显的时间效应。以上结果表明,对PC的PEPC酶活性的调节主要依赖于由PLD途径产生的PA的参与。     

京津冀城市群能源供需与城市化的关系模式

城镇化发展加剧了城市对能源的消耗,进而加剧了能源供需不平衡,这种不平衡已经成为限制城镇化发展的重要因素。目前,城市群作为我国城镇化发展的重要形式,充分发挥城市群的协同效应以减缓能源供需矛盾,对实现区域可持续发展具有重要意义。研究以京津冀城市群为例,从地级市尺度系统地核算了2001—2015年能源供应和需求量,并采用ward聚类方法划分3种不同类型的能源供求特征,并分析了每种类型的能源供需特征差异。同时,以能源供需比值表示供需差异并进行了比较。在此基础上,采用多指标综合分析方法进一步探讨了能源供需与城市化的关系模式。结果表明:(1)京津冀城市群不同城市能源的供求特征及变化存在明显的时空差异。一方面,从能源供给特征来看,年平均能源生产量较高的城市(天津市)能源产量由上升转变为平缓变化趋势,而低产城市(石家庄市)呈不稳定的变化趋势,两类城市平均能源产量相差2497.66万t标准煤;另一方面,从能源需求特征来看,北京、天津市等能源高耗城市能源消费近年来趋于下降趋势,而低耗型城市(沧州市)近年来呈波动变化,二者平均差值为4752.49万t标准煤;(2)基于能源供需比值,京津冀城市群所有城市均表现为能源供不应求,且不同城市能源供需缺口差异明显。其中,天津市能源供给能力最强,但其生产量却不及自身消费量的65%,而供给能力相对最弱的城市保定市,其能源需求几乎完全依赖外部能源供给;(3)城市能源供需与城市化水平之间关系不完全一致。研究对能源供需模式与城市化模式不一致的城市,划分了先进型和滞后型两种关系模式。对于先进型的城市,主要有北京市、沧州市和廊坊市,它们的城市化水平相对较高,分析认为其能源开发利用相对集约;而属于滞后型的城市,包括唐山市、邯郸市和邢台市,其城市化水平偏低,分析认为这类城市能源开发利用效率低、发展方式相对粗放,是城市群能源效率提升的重点。本研究旨在为今后的城市群能源规划提供科学依据,建议北京市等能源相对集约型城市带动唐山市等发展方式粗放、落后的城市,以提高京津冀城市群整体的能源效率。     

两岐双岐杆菌菌株制剂的研究Ⅰ.两岐双岐杆菌的发酵条件

本文就两岐双岐杆菌以脱脂牛奶为培养基的厌氧发酵条件进行了探索。试验了导致双岐杆菌增殖的几种生长促进剂。并获得产菌量较高的发酵培养基,同时对双岐杆菌发酵条件作了讨论。     

两岐双岐杆菌菌株制剂的研究——Ⅱ.两岐双岐杆菌及其和嗜酸乳杆菌、粪链球菌干燥菌粉胶囊的制备

用两岐双岐杆菌发酵液和嗜酸乳杆菌、粪链球菌发酵液经离心沉淀、真空干燥等步骤制备成混合干燥菌粉,其每克活菌数含量达10^7-8。经室温存放3个月后,活菌数仍可在10^6-7/g以上,在冰箱中存放则时间更长。这种菌粉具有较好的稳定性和实用价值。