乙型肝炎病毒表面抗原基因在大肠杆菌中的表达

通过次级克隆我们组建了乳糖操纵子启动基因控制下的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因片段和乙型肝炎病毒(HBV)基因组两种表达质粒,能在大肠杆菌中合成β-半乳糖苷酶乙型肝炎病毒表面抗原杂合蛋白,可被放射免疫分析和蛋白凝胶电泳所检测。     

运用琼脂免疫电泳方法区别幼虫的初步探讨

<正> 目前在昆虫的调查和分类鉴定等工作中,对幼虫的研究,还大大落后于对成虫的研究。过去对幼虫的研究,主要是借助于解剖镜等对形态进行分类,这是常规的分类鉴别方法,但对于那些形态上不易区别的近似种,则有一定的困难。目前国内外应用扫描电镜和电子显微镜观察超微结构,对区别近似种形态的细微结构极为有效。此外,早在六十年代国外已开始应用血清反应和电泳方法来鉴别亲缘关系,但这在我国研究尚不普遍,其应用的原理是用供试昆虫的蛋白质作用抗原,注入家兔体中,使其产生抗体,经过一定时间,抽取兔的血液制成抗血清,试验时,滴入原来的抗原蛋白质时,经过电泳.就能产生沉淀弧,亲缘关系愈近,沉淀愈多,沉淀弧的圆形亦愈近似。     

omp25c基因对马耳他布鲁菌疫苗株M5的毒力及免疫保护性的影响

目的：初步评价马耳他布鲁菌M5疫苗株omp25c基因对其毒力及免疫保护性的影响。方法：利用同源重组的方法,用卡那霉素抗性基因替换M5的omp25c（BMEI1829）基因,得到缺失突变株M5Δomp25c;分别用M5Δomp25c和M5免疫小鼠,在免疫后不同时间点处死小鼠,通过脾脏细菌计数分析缺失突变株在小鼠体内的毒力,通过检测IgG和IFN-γ的水平分析缺失突变株在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答能力,通过攻毒实验评价突变株的免疫保护效果。结果：与M5株相比,M5Δomp25c在小鼠脾脏内的存活时间较短,在第4周时未能检出;M5Δomp25c免疫小鼠诱导产生的IgG水平在第4周达到最高,第6周开始下降;M5Δomp25c免疫小鼠诱导分泌的IFN-γ水平在第4周达到最高为790pg/mL,第6周时浓度降至530pg/mL,整体趋势显著低于阳性对照组;接种了M5Δomp25c的小鼠用布鲁菌强毒株16M攻毒后,免疫保护效果也下降。结论：缺失omp25c的突变株毒力减弱,诱导的体液和细胞免疫水平及免疫保护效果下降,说明omp25c基因是马耳他布鲁菌M5疫苗株的毒力相关基因,对疫苗株M5的免疫应答和免疫保护效果有一定的影响。     

产谷胱甘肽昆虫共生酵母菌的筛选、鉴定和培养条件优化

从水黾肠道中分离并筛选到1株产还原型谷胱甘肽(GSH)的酵母菌株SM3,经初步鉴定为Candida carpophila菌。通过正交实验优化菌株产GSH的最佳培养基成分:3%蔗糖为碳源,0.2%(NH4)2SO4为无机氮源,0.8%酵母浸粉为有机氮源,K2SO40.3%,KH2PO40.6%,MgSO40.15%。单因素实验表明其较佳培养条件为:接种量15%,培养时间36 h,摇床转速200 r/min,温度32℃,pH 6.0,装液量为20/250 mL。优化后GSH产量可达159.35 mg/L,较优化前提高了105.27%。     

蓝光照射结合中西药治疗新生儿高胆红素血症74例分析

１９８７～１９９７年我院收治新生儿高胆红素血症９２例,７４例采用蓝光照射结合中西药物治疗,效果满意,现报道如下。１临床资料１．１一般资料本组７４例,男４５例,女２９例,男∶女＝１．５∶１。第一胎５３例,非第一胎２１例,早产儿７例,新法接生５６例,旧法...     

台湾海峡鱼类物种多样性研究回顾

台湾海峡位于中国福建和台湾岛之间, 其特殊的海洋环境使得其鱼类物种多样性水平较高并独具特色。本文综述了台湾海峡鱼类物种多样性研究的历程和成果。20世纪以来, 台湾海峡鱼类物种多样性的研究可以划分为早期研究时期、研究起步时期、系统调查时期和综合研究时期4个阶段, 从最初以新种描述为主的零星报道, 到大规模系统性的综合调查和研究; 目前为止, 大陆文献共记录台湾海峡鱼类1390种, 台湾地区文献共记录鱼类1525种, 总计台湾海峡鱼类1697种。这些种类多数为暖水性广布种, 鱼类区系以印度-西太平洋暖水区的印度-马来亚区和中-日亚区过渡海区种为主; 今后台湾海峡鱼类物种多样性的研究应加强两岸合作, 并充分发挥数据库应用的优势地位。     

经营措施对毛竹林土壤不同组分有机碳、氮及化学结构的影响

以次生常绿阔叶林为对照,选择立地条件相近的无经营、粗放经营和集约经营3种类型毛竹林为研究对象,应用密度-粒径联合分组以及化学、生物分析和傅里叶变换红外光谱(FTIR)方法,探讨经营措施对毛竹林土壤不同组分有机碳、氮含量,分配比例及结构特征的影响。结果表明: 与对照相比,无经营和粗放经营毛竹林显著提高了土壤总有机碳(TOC)、全氮(TN)、游离态颗粒有机碳、氮、可溶性有机碳(DOC)、氮(DON)和矿物结合态有机碳、氮的含量。无经营毛竹林虽然显著增大了游离态颗粒有机碳、氮的分配比例,但其与黏土矿物结合的有机碳依然是土壤有机碳的最大贮存库(67.6%)。集约经营导致竹林土壤有机碳、全氮的贮量及各组分有机碳、氮含量下降,但明显增大了DOC/TOC、微生物生物量氮与全氮比值以及微生物生物量碳和土壤有机碳的比值(微生物商)。经营措施对土壤有机碳的化学结构也具有显著影响。与对照相比,无经营和粗放经营毛竹林土壤有机碳中酚醇-OH、脂肪族-CH、芳香族C=C和羰基C=O吸收峰相对强度增强,土壤疏水性显著增加。土壤有机碳的脂肪碳、芳香碳和疏水性与土壤碳氮总量呈显著正相关,与微生物商呈显著负相关。在人为干扰减少的情况下,毛竹林凋落物、根系等有机质残体输入量的增多引起土壤难分解化合物的相对积累,使有机碳化学稳定性明显增强。同时,土壤黏土矿物质对土壤有机碳起到了很好的保护作用,通过矿物-有机碳复合使土壤碳储存稳定性更高,进而有利于土壤碳的长期保存。     

小菜蛾气味受体蛋白PlxyOr83b基因的克隆及表达

【目的】克隆小菜蛾Plutella xyostella气味受体Or83b基因, 并进行原核表达, 为研究小菜蛾寄主选择行为的分子机理, 开发昆虫行为调节剂提供基础。【方法】提取小菜蛾的总RNA, 反转录获得总cDNA, 采用RT-PCR方法扩增目的基因, 将其克隆至T载体并测序, 然后将目的基因克隆到大肠杆菌Escherichia coli表达载体pET-32a (+)中表达。经酶切、 PCR及测序鉴定正确后转化BL21 (DE3)菌株, 用IPTG诱导表达, 通过SDS-PAGE, Western印迹鉴定表达蛋白。【结果】获得了编码小菜蛾Or83b的cDNA序列, 该基因阅读框长1 413 bp, 编码471个氨基酸, 预测的等电点为7.19, 命名为PlxyOr83b（GenBank登录号为GQ923610）; 成功构建了pET-PlxyOr83b原核表达重组质粒, 目的基因获得高效表达, 其融合蛋白分子量为32.0 kD, Western blot 检测结果进一步表明PlxyOr83b在大肠杆菌DE3中得到正确表达。【结论】成功克隆和表达了小菜蛾气味受体基因PlxyOr83b, 该基因与其他昆虫Or83b基因基本一致。     

构树皮的化学成分研究

通过反复硅胶柱层析从构树根皮乙醇提取物石油醚部位中分离得到10个化合物,利用波谱方法分别鉴定为β-谷甾醇(1),lupeol acetate(2),6,7-二甲氧基香豆素(3),Broussonin A(4),Broussonin B(5),Broussonin F (6),(+) marmesin(7),(+)-(2...