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321.
322.
目的:为建立新的自身抗体检测方法,自行克隆、表达和鉴定人自身抗原SmB'。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从白血病淋巴细胞HL-60细胞株中克隆人自身抗原SmB'全长基因;将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEX-5T载体中,转入大肠杆菌BL-21;阳性克隆经鉴定后在IPTG诱导下表达,产物行SDS-PAGE和Western印迹。结果:PCR产物长约700bp,与预期的657bp接近,测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致。pGEX-5T-SmB'重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDS-PAGE和Western印迹结果显示融合蛋白相对分子质量为51000,具有天然人自身抗原SmB'的免疫原性。结论:克隆表达了人自身抗原SmB',为建立相应的自身抗体检测方法奠定了基础。 相似文献
323.
重组大肠杆菌高密度培养 总被引:5,自引:1,他引:5
重组大肠杆菌的高密度培养是增加单位时间,体积重组蛋白产率的最有效途径之一。如何在获得高密度的同时取得较高的单位时间/体积目的蛋白产率,是高密度培养(过程中亟待解决的问题,这与所选用的菌体、构建的表达系统、发酵时pH、溶氧、培养基成分及培养温度、质粒稳定性、代谢副产物的限制及时比生长速率的控制等因素有关。试从这些方面加以综述,分析这些条件对重组蛋白生产的影响,介绍大肠杆菌高密度培养领域的一些研究进展。 相似文献
324.
抗HSV-1淋巴细胞杂交瘤的建立及应用单克隆抗体对HSV分型 总被引:1,自引:0,他引:1
应用HSV-1 SM44株感染的BHK-21细胞及提取的感染细胞膜蛋白抗原免疫Balb/c小鼠。以免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp_2/0融合,经ELISA筛选仅与HSV-1反应的阳性克隆及克隆化,建立了一株产生抗HSV-1型特异性McAb的杂交瘤细胞系(Mad-2)。经ELISA,IF及抗原吸收试验证明,该细胞系的培养上清及制备的小鼠腹水均与HSV-1呈特异性反应,但不与HSV-2反应。ELISA测定McAb Mad-2的腹水效价为10~(-7)Ig亚类鉴定为IgG-1。应用Mad-2和抗HSV型共同性McAb 1A12及抗HSV-2型特异性McAb CH-A9,对43株临床HSV分离株做了ELISA及IF分型。结果表明,28株口唇、眼部感染分离株和1株宫颈炎分离株均与1A12和Mad-2反应,不与CH-A9反应,为HSV-1。余14株富颈炎分离株均与1A12和CH-A9反应,而不与Mad-2反应,为HSV-2。ELISA和IF分型的结果完全一致。本研究提出作者应用的一套抗HSVMcAb有可能作为HSV型别鉴定的标准试剂。 相似文献
325.
烟碱对槟榔红脉穗螟生长发育和存活的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
【背景】红脉穗螟是槟榔上的重要害虫,近年来危害日愈严重。【方法】采用饲喂法、浸卵法研究了烟碱对红脉穗螟不同龄期幼虫的生物活性及对卵、幼虫、蛹发育和存活的影响。【结果】烟碱对红脉穗螟各龄幼虫均表现出生物活性,且随着龄期的增大,红脉穗螟幼虫对烟碱的敏感性呈现降低的趋势;烟碱对红脉穗螟5龄幼虫的L%、£c。£cq。分别为5.13、20.69、292.10mg·L-1,同时烟碱可延长幼虫和蛹的发育历期。经不同浓度烟碱处理后,卵的孵化率大大降低,且初孵幼虫存活率也受到影响,部分幼虫无法成功转至2龄;同一卵龄中,LC25和LC50。处理的卵孵化率无明显差异,且显著高于LC90处理组。不同浓度烟碱处理后的红脉穗螟化蛹率和羽化率均显著降低,其中以LC90处理组影响最大,化蛹率和羽化率仅为18.89%和15.56%,显著低于对照组。【结论与意义】烟碱作为一种重要的植物源杀虫剂,对红脉穗螟的发育和存活均表现出生物活性,可作为该虫防治的备选药剂。 相似文献
326.
紫色小白菜有机酸的提取优化及UPLC定量分析 总被引:1,自引:0,他引:1
为建立一种紫色小白菜中精准的有机酸提取及定性定量分析方法。本研究在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken的中心组合试验设计原理,设计响应面试验优化紫色小白菜有机酸的提取工艺。结果表明,紫色小白菜有机酸提取的最优工艺参数为:乙醇浓度73%,料液比1∶21,超声时间11 min,超声温度70℃。通过超高效液相色谱法(ultra performance liquid chromatography,UPLC)对紫色小白菜叶片和叶柄部位有机酸进行定性定量分析,检测出苹果酸、柠檬酸、丙二酸、琥珀酸和酒石酸,其中苹果酸含量最高,分别为15.968、5.019 mg/g;其次为柠檬酸,分别为9.293、1.385 mg/g。定性定量结果表明,紫色小白菜叶片及叶柄部位含有丰富有机酸类物质,叶片部位苹果酸、柠檬酸、丙二酸、酒石酸含量均高于叶柄部位,而琥珀酸含量较低。 相似文献
327.
人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)超感染(Superinfection)的案例在近两年被陆续报道,到目前共有5个超感染的病例被确定。与共感染(Coinfection)不同,HIV超感染指的是一株HIV在机体内已经建立稳定感染之后的另外HIV毒株的感染,共感染则是两株病毒同时或几乎同时对机体的感染。超感染发生的背景是宿主已经存在HIV特异性的免疫反应并且免疫系统在某种程度上受到初次感染病毒的损伤,提示HIV的初次感染所激发的机体免疫反应不足以完全抵御另外HIV毒株的再次感染。 相似文献
328.
有机锗对绞股蓝愈伤组织生长及皂苷含量的影响 总被引:5,自引:1,他引:5
绞股蓝(Gynostemmapentaphyllum)的嫩茎以MS+2mg/L2,4D+ling/LBA的培养基诱导成愈伤组织,愈伤组织经继代数次后再以MS+0.5mg/L2,4D+0.2ms/LBA并加入不同浓度有机锗(Ge-132,由南昌大学化学系有机锗一132研制组提供)的培养基进行培养,20d后测定皂音含量[何心亮.中草药,1987,18(10):15]、鲜重和干重。结果如下:门)薄层层析显示各种样品均呈现与人参皂着Re相同的紫红色斑点(图略)。(2)有机锗促进绞股蓝愈伤组织的生长和皂苦的积累,与一定量的植物生长调节剂配合使用时效果更佳。有机锗的适宜浓度为5… 相似文献
329.
温度对麦蛾柔茧蜂功能反应的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为明确温度变化在麦蛾柔茧蜂Habrobracon hebetor对印度谷螟Plodia interpunctella寄生作用中的影响, 研究了室内17, 20, 23, 26, 29, 32和35℃条件下, 麦蛾柔茧蜂对不同密度的印度谷螟5龄幼虫的麻痹和寄生作用。结果表明: 在17~29℃范围内, 寄生蜂的寄主处理时间与温度成反比, 从17℃的0.341 d到29℃的0.068 d, 但温度再升高时, 处理时间又延长。寄主搜索率也随温度的改变而变化, 17℃时最低, 为0.056; 29℃时最高, 为1.895; 当温度升高到32~35℃时, 寄主搜索率又下降。温度调节的功能反应模型表明, 在26~29℃范围内, 寄生率较高。可见, 在26~29℃时, 麦蛾柔茧蜂对印度谷螟有较好的寄生效果, 对寄生蜂繁殖后代有利。 相似文献
330.
黄土丘陵沟壑区景观格局演变特征——以陕西省延安市为例 总被引:2,自引:0,他引:2
以陕西省延安市1985年、2000年和2008年三期1∶25万景观单元类型图,1∶5万地形图等生成的数字高程模型(DEM)为数据源,基于ArcGIS 9.3软件,采用多距离空间聚类、景观单元类型转移矩阵、空间数据叠加分析等方法分析了延安市景观格局的演变特征。结果表明:延安市的景观是由林地、灌木、草地和农田等基本景观单元构成的复合景观;研究期间农地面积急剧减少,流失的农地主要转变为林地、草地、灌木和聚落,除农地和裸地外,其他景观单元类型面积均有不同程度的增加;1985—2008年,林地、灌木和草地聚集的最大尺度减小,而农田聚集的最大尺度变大,农田和草地的空间聚集强度明显小于林地和灌木;延安市主要景观单元类型演变主要发生在海拔1100—1500 m之间的区域和坡度范围7—21°之间的区域,但农田向聚落的演变主要发生在海拔较低(900—1300 m)、坡度较缓(7°)的平川缓丘地带。1999年之前,经济的迅速发展是延安市景观格局演变的主要驱动因素;而1999年之后,国家推行的退耕还林(还草)等一系列生态重建措施成为延安市景观格局变化的主要驱动因素。 相似文献