中华绒螯蟹胰脂酶基因克隆及表达分析

采用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆获得了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)胰脂酶基因(pancreatic lipase, PL)的cDNA序列全长。该序列全长1 970 bp,开放阅读框长度为1 374 bp,编码457个氨基酸,5'和3'非编码区(UTR)长度分别为372 bp和224 bp。理化分析表明其预测分子量为51.066 kD,理论等电点为4.65。其序列中检测到脂肪酶典型的催化三联体结构、"盖子"结构以及"亲核弯"结构。蛋白同源性和进化树分析表明,中华绒螯蟹胰脂酶和其他物种同源性较高(50%左右),且和甲壳动物聚为一支而与脊椎动物相聚较远。组织表达模式分析表明,EsPL基因主要在肝胰腺、肠道、胸神经节表达较高;幼体发育阶段表达模式分析表明,EsPL基因在溞状幼体Ⅰ~Ⅲ期表达量逐渐递增,Ⅳ期显著下降,Ⅴ期较Ⅳ又显著增加,大眼幼体阶段表达最低;同一脂肪水平下,相比于含高不饱和脂肪酸的鱼油而言,植物油如豆油和亚麻油的添加均会增加胰脂酶基因的表达,且亚麻油鱼油混合油组促进效果最显著。上述结果表明饵料脂类显著影响中华绒螯蟹胰脂酶,从而为提高中华绒螯蟹对饵料脂类利用率提供了研究依据。     

肌肉生长抑制素调控动物骨骼肌生长机制的研究进展

肌肉生成抑制素（myostatin, MSTN）在动物机体骨骼肌的增殖、分化和生长中起着重要的负调控作用。MSTN基因的过表达会阻碍骨骼肌增殖分化及生长发育,而缺失或表达降低则会导致肌肉肥大,形成双肌现象（double muscle phenomenon, DMP）。MSTN能作用于多个基因及结合多种细胞因子广泛参与生理生化、物质代谢、病理调控等过程,在动物机体生长发育过程中扮演着重要的角色。本文将从MSTN基因的历史渊源、基因定位、时空表达特性、部分相关作用机制等方面进行论述,旨在对MSTN调控动物骨骼肌生长部分机制作梳理,以期为后期研究提供理论依据。     

宫颈癌患者外周血循环肿瘤细胞检测的意义

目的:通过分析宫颈癌患者的临床资料与循环肿瘤细胞(CTC)之间的关系,评估其在宫颈癌患者诊疗过程中的临床意义。方法:回顾性分析我院2017年3月至2018年6月行机器人辅助下宫颈癌根治术的病例共82例,术前术后分别行CTC检测,分析CTC阳性率及CTC水平与临床参数的相关性。结果:不同病理类型、分化程度、脉管侵犯、淋巴转移及临床分期宫颈癌患者术前及术后CTC阳性率及CTC水平比较差异均无统计学意义(P0.05)。当宫颈癌浸润深度≥5 mm时,CTC的阳性率及CTC水平明显升高,CTC阳性率的差异仅在术前有统计学意义(P0.05);而CTC水平的差异在术前及术后均有统计学意义(P0.05)。结论:CTC的阳性表达及水平与肿瘤的浸润深度密切相关。检测宫颈癌患者CTC水平可为宫颈癌的诊治及预后评估提供重要参考价值。     

右美托咪定对低血红蛋白全麻患者脑氧饱和度及术后认知功能的影响*

目的:探讨右美托咪定对低血红蛋白全麻患者脑氧饱和度及术后认知功能的影响。方法:选取择期在全麻行开腹妇科手术、血红蛋白8～9 g/dl的患者30例,ASA分级Ⅰ～Ⅱ级,将其随机分成两组:生理盐水组(N组)和右美托咪啶组(D组),每组15例。两组麻醉诱导后,均行七氟醚复合瑞芬太尼静吸复合麻醉维持。D组在麻醉诱导前经15 min静脉输注右美托咪定0.5μg/kg,继之以0.3μg·kg~(-1)·h~(-1)的速率输注至术毕,N组给予等容量生理盐水。分别于入室时(T_0)、吸氧后3 min(T_1)、手术开始即刻(T_2)、手术开始后10 min(T_3)、20 min(T_4)、30 min (T_5)、手术结束即刻(T_6)以及患者苏醒拔管后5 min(T_7)记录平均动脉压(Mean Arterial Pressure,MAP)、心率(Heart Rate,HR)、血氧饱和度(Percutaneous Oxygen Saturation,SpO_2)、呼吸末二氧化碳分压(End-Tidal Carbon DioxidePartial Pressure,PETCO_2)、脑氧饱和度(Regional Cerebral Saturation Of Oxygenation,rSO_2)、脑电双频指数(Bispectral Index,BIS)以及腋温。并于术前1 d、术后1 d以及术后3 d,记录蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment,MoCA)数值以及术后认知功能障碍(Postoperative Cognitive Dysfunction,POCD)的发生率。结果:与N组比较,D组在T_2～T_6时的rSO_2升高,HR降低(P0.05),两组各时点MAP、SpO_2、PETCO_2、BIS以及腋温比较差异无统计学意义(P0.05)。与N组比较,D组术后1天、术后3天MoCA评分均显著升高,且术后认知功能障碍的发生率明显降低(P0.05)。结论:右美托咪定能够提高低血红蛋白患者的脑氧饱和度,改善患者脑氧供需平衡,降低术后认知功能障碍的发生率。     

黑腹果蝇Mst84Db敲降引起的父本缺陷类似Wolbachia诱导的细胞质不亲和

【目的】Wolbachia 是广泛存在于昆虫体内的一类通过母系传递的共生菌,能够通过多种方式影响宿主的生殖。细胞质不亲和（CI）是Wolbachia 引起的最普遍的一种表型,即感染Wolbachia的雄性和未感染的雌性宿主交配后,胚胎发育停滞于早期阶段。但目前有关CI的分子机理还不清楚。本研究组前期实验表明,Wolbachia感染引起黑腹果蝇Drosophila melanogaster 3龄幼虫精巢中Mst84Db基因的表达显著下调。本研究的目的是进一步研究Mst84Db与CI的关系。【方法】我们体外合成了Mst84Db的双链RNA（dsRNA）,注射雄性果蝇,将注射过的雄果蝇与野生雌果蝇交配,检测其繁殖力。基因表达采用定量RT-PCR方法进行检测。胚胎表型采用DAPI染色进行分析。【结果】注射dsRNA 24 h后,Mst84Db基因的表达水平发生显著下调。注射后72 h,基因表达下调幅度最大。与对照组相比,基因敲降后的雄蝇繁殖能力显著下降,与雌果蝇交配后胚胎孵化率显著低于对照组,这与Wolbachia诱导的CI现象类似。未孵化胚胎的表皮上没有体节出现,说明胚胎停滞于发育的早期。部分胚胎细胞核分裂不同步,且有染色质间桥出现,这也与CI胚胎中的细胞学表型一致。【结论】Wolbachia感染可能抑制果蝇精子发生过程中Mst84Db基因的表达,从而使精子失去正常功能,最终导致与雌性果蝇交配后,胚胎发育停滞,并最终死亡。Mst84Db基因在雄性果蝇中表达下调可能是产生CI的重要原因之一。     

用于MALDI-TOF MS分析的毛细管层析柱制备方法研究

研究了一种用于MALDI-TOF MS分析中样品预处理毛细管亲和层析柱的制备方法。首先采用硫酸和双氧水氧化法将羟基引入到石英毛细管内表面,进一步使用氨基丙基三乙氧基硅烷（APTES）对毛细管进行修饰以将氨基偶联到毛细管内表面;采用1,4-丁二醇二缩水甘油醚（BDDE）将魔芋葡甘聚糖（KGM）进行活化,将活化后的KGM与毛细管上的氨基进行了偶联,在此基础上将模型蛋白（胰蛋白酶）偶联到毛细管内KGM,成功制备出毛细管亲和层析柱,考察了KGM和环氧基含量对模型蛋白偶联量及其样品预处理效果的影响。结果表明,KGM分子量是影响毛细管层析柱上蛋白偶联量的关键因素,以胰蛋白酶抑制剂为目标物结合MALDI-TOF MS对亲和层析柱的分离效果进行了评价,证明了偶联胰蛋白酶的毛细管层析柱可有效实现胰蛋白酶抑制剂的分离和浓缩。基于表面处理和KGM衍生的毛细管亲和层析柱制备技术具有可行性,并可用于MALDI-TOF MS分析的样品预处理。     

一种在格点模型上模拟蛋白质折叠结构的优化算法

蛋白质折叠问题是生物信息学中一个经典的多项式复杂程度的非确定性(non-deterministic polynomial,NP)难度问题.势能曲面变平法(ELP)是一种启发式的全局优化算法.通过对ELP方法中的直方图函数提出一种新的更新机制,并将基于贪心策略的初始构象的产生,基于牵引移动的邻域搜索策略与ELP方法相结合,为面心立方体(FCC)格点模型的蛋白质折叠问题提出一种改进的势能曲面变平(ELP+)算法.采用文献中9条常用序列作为测试集.对于每条序列,ELP+算法均能找到与文献中的算法所得到的最低能量相等或更低的能量.实验结果表明,ELP+算法是求解FCC格点模型的蛋白质折叠问题的一种有效算法.     

医院临床数据中心建设与应用

为解决医疗记录报告单的管理混乱问题,文章提出了医院临床数据中心体系架构,主要从系统整体架构、层次结构以及关键技术实现等方面进行了阐述,实现了基于Ensemble集成平台的医疗记录报告单数字化集中归档,生成PDF格式的报告单,为医护人员及病人提供各类应用服务。医生借助电子病历里调阅PDF格式的医疗记录报告单,解决了电子病历与各临床信息系统之间的信息集成,提高了医院的服务质量。     

大豆分离蛋白基脂肪模拟物初步研究

以大豆分离蛋白为原料,对大豆分离蛋白溶液实施加热、高速剪切处理,从而获得与油脂相近的感官特征。在单因素试验基础上,利用二因素中心组合设计原理及响应面法分析建立二次回归模型。以加热温度、蛋白质浓度为考察因子,以大豆分离蛋白溶液粘度及乳化稳定性为响应值,确定大豆分离蛋白基脂肪模拟物的最佳工艺条件。研究结果表明,最佳工艺条件为蛋白质浓度9.10%,加热温度79.6℃,加热时间10 min,均质时间40 s,此条件下大豆分离蛋白溶液的粘度为46.8 mPa·s,乳化稳定性为49.15 min,与市售植物油相当。     

I131内放射治疗对成人恶性脑胶质瘤癫痫发作的影响

目的：探讨内放射治疗对胶质瘤引起的癫痫的影响。方法：回顾性分析2004年后利用I131内放射治疗的成人幕上恶性脑胶质瘤合并有癫痫发作的患者23例,统计其在治疗前1月及治疗后1月、2月时的癫痫发作频率和类型,并分析肿瘤体积变化与发作频率变化的关系。结果：治疗后1月癫痫发作无明显改变,治疗后2个月癫痫发作明显减少,13例无癫痫发作,另外10例有发作患者频率也明显下降,其中肿瘤缩小超过1／2者78％无癫痫发作。结论：I131内放射治疗的成人幕上恶性脑胶质瘤可以明显减少患者的癫痫发作。