金钱鱼下丘脑转录组分析及其对雌激素在体注射的响应

为探究XX雌性和XY雄性金钱鱼(Scatophagus argus)下丘脑中的差异表达基因及雌激素(17β-Estradiol,E2)在体注射对XY雄鱼下丘脑中基因表达的影响,开展了转录组测序分析,包括测序数据质控、基因功能注释,差异基因筛选、鉴定和差异基因功能富集分析等,并利用实时定量PCR(Real-time quantitative PCR, qPCR)检测了金钱鱼下丘脑中相关基因的表达。金钱鱼下丘脑转录组共测得Clean reads 275833710,测序质量30(Q30)大于95%, GC含量值大于48%。其中, Ctrl-XX-H vs. Ctrl-XY-H组,共筛选和鉴定了91个差异表达基因,包括36个上调基因和55个下调基因。在Ctrl-XY-H vs. E2-XY-H组,筛选和鉴定了28个差异表达基因,包括11个上调基因和17个下调基因。GO和KEGG富集分析发现,差异表达基因主要显著富集在细胞、单生物过程,膜、膜组分,结合等生物学功能及泛醌和其他萜类-醌生物合成及类固醇激素生物合成通路等。转录组和qPCR结果表明, XX和XY金钱鱼下丘脑中prl、ccna1和hs...     

青藤碱对2型糖尿病合并肝癌小鼠的治疗作用研究

摘要 目的：研究青藤碱（SIN）对2型糖尿病（T2DM）合并肝癌（HCC）小鼠的治疗作用和可能机制。方法：将8周龄雄性BALB/c小鼠（20~25 g）分为Control组、T2DM+HCC组、SIN-L组、SIN-M组和SIN-H组。Control组小鼠正常饲养,其他组小鼠通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ）联合肝实质内接种小鼠肝癌细胞（H22）建立T2DM+HCC小鼠模型。SIN-L组、SIN-M组和SIN-H组小鼠分别通过腹腔注射10、20和40 mg/kg/d的青藤碱,每天1次。Control组和T2DM+HCC组小鼠分别腹腔注射0.5 mL的生理盐水,各组小鼠均治疗21 d。末次给药24 h后,计算各组小鼠的肝脏指数并检测各组小鼠空腹血糖（FPG）、空腹血胰岛素（FINS）、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）水平,肝脏组织超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和丙二醛（MDA）水平。通过苏木精和伊红（HE）染色观察肝脏形态,Western blot检测肝脏组织中BCL2、BAX、P53、信号转导和转录激活因子3（STAT3）、细胞因子信号抑制因子3（SOCS3）和固醇调节元件结合蛋白-1（SREBP-1）的蛋白表达。结果：T2DM+HCC组、SIN-L组、SIN-M组和SIN-H组小鼠的中位生存期依次为25、32、35和41 d,组间比较差异有统计学意义（P<0.001）,随着青藤碱浓度的升高,小鼠的中位生存期延长。与T2DM+HCC组比较,SIN-L组、SIN-M组和SIN-H组小鼠的血清FPG、FINS、TC、TG、ALT、AST和LDH水平降低,肝细胞排列基本规则,水肿、空泡样变性和炎性细胞浸润等病变明显减轻,肝脏指数降低,肝脏SOD、CAT和GSH-PX水平升高,肝脏MDA水平降低,肝脏BCL2蛋白表达水平降低,肝脏BAX和P53蛋白表达升高（P<0.05）。与T2DM+HCC组比较,SIN-L组、SIN-M组和SIN-H组小鼠肝脏组织STAT3 Tyr705磷酸化、SOCS3和SREBP-1蛋白表达降低（P<0.05）。结论：青藤碱可有效延长2型糖尿病合并肝癌小鼠的生存时间,稳定血糖和血脂水平,改善肝功能,并抑制癌细胞生长,其机制可能与抑制STAT3信号通路有关。     

青霉素G酰化酶工业进化的研究进展

青霉素G酰化酶是近几十年来β内酰胺类抗生素领域应用最广、开发最成功的酶之一。伴随着β-内酰胺类抗生素由化学合成法变更为酶法在中国的大规模产业化,得到了充分的开发与应用,取得了成功。青霉素G酰化酶不但用于水解制备6-APA、7-ADCA,更重要的是用于氨苄西林、头孢氨苄、阿莫西林、头孢拉定、头孢克洛等抗生素的制备。本文综述了近15年青霉素G酰化酶在我国研究与应用的历史沿革、基因与蛋白质结构、工业应用表达体系、工业评价标准与进化研究,还对各种突变株在具体医药工业领域的开发应用进行了综述,旨在梳理青霉素G酰化酶结构与性能的进化趋势以及在医药工业领域取得的巨大成就,同时也为相关人员在此领域进行深耕提供参考。     

心脏磁共振成像诊断原发性醛固酮增多症患者左室重构价值研究

摘要 目的：探讨心脏磁共振成像（CMRI）诊断原发性醛固酮增多症（PA）患者左室重构的价值。方法：选取2017年10月-2022年12月在辽宁省金秋医院诊断为PA的患者82例作为研究组，另选取同时期内在我院就诊的原发性高血压（EH）患者82例作为对照组。对比研究组和对照组临床资料、CMRI参数、生化及激素指标水平。根据研究组患者有无左室重构分为PA且有左室重构亚组（PA1组，n=38）和PA但无左室重构亚组（PA2组，n=44），对比PA1组和PA2组患者CMRI参数。采用多因素Logistic回归分析 PA患者左室重构的因素，建立回归方程及ROC曲线评价CMRI对PA患者左室重构的诊断效能。结果：研究组患者血清K、肾素活性低于对照组，醛固酮显著高于对照组（P＜0.05）。研究组患者EDVi、ESVi、Massi、初始T1 mapping值和ECV均高于对照组，增强后T1 mapping值低于对照组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，ESVi、Massi、增强后T1 mapping值、ECV均与PA患者左室重构密切关联（P＜0.05）。ROC分析结果显示，ESVi、Massi、增强后T1 mapping值、ECV各指标及其联合诊断PA患者左室重构时的AUC分别为0.623、0.677、0.736、0.675、0.779，说明联合诊断效能较高。结论：CMRI可定量评估PA患者的左室重构情况，其诊断效能较高，可为临床治疗、监测进展等提供参考依据。     

光质对黄芩生长与生理生化特征的影响

冠层光谱组成的差异显著影响着林下植物生长和功能性状的表达。本文采用全光谱、紫外-A(UV-A)辐射、蓝光、绿光、红光等不同LED定制光源对黄芩幼苗进行培养,研究林下药用植物黄芩生长、形态发育、生物量分配、生理特征以及主要次生代谢产物对不同光质的响应特征,旨在探究适合其产量与品质提升的最佳光环境,为林下药用植物资源开发利用提供科学参考。结果表明：与全光谱相比,UV-A显著降低了黄芩株高、地径、叶片厚度和叶面积比,以及各器官生物量;红光显著降低了黄芩地径、生物量、光系统Ⅱ的有效量子产量(Ф_PSⅡ)及总黄酮浓度;蓝光下黄岑的根长和总生物量显著增加,分别上升了48.0%和10.8%,而叶片数、叶绿素含量显著降低,降幅为20.0%和31.6%,其余主要生理生化性状均与全光谱下响应一致。蓝光在黄芩光合功能维持、生物量积累及次生代谢物合成方面起促进作用,而红光和UV-A在黄芩生理生化代谢过程方面具有明显的抑制作用。因此,黄芩种植可适当增加蓝光的配比,以提高其产量与品质。     

人骨髓基质细胞体外分离及定向培养内皮细胞

用Ficoll(比重1.077 g/ml)从正常成人骨髓中分离骨髓基质细胞(BMSCs),DMEM-HG 培养基内含20?S、GM-CSF(100 u/ml)、VEGF(10 ng/ml)、FGF(5 ng/ml)、L-谷氨酰胺(2mmol/ L)、肝素(90 u/ml),以及抗生素液进行定向培养和扩增其中的内皮细胞(ECs),Ⅷ因子相关抗原的免疫组化法和透射电镜观察(TEM)鉴定其细胞的性质。结果5.0×105个BMSCs在体外经定向ECs 培养和扩增8代后,获得了6.0×109个ECs,扩增了约1.2×104倍。70%-80%的细胞对Ⅷ因子相关抗原免疫组化呈阳性反应;光镜下细胞呈典型的“鹅卵石”样;TEM下可观察到胞浆内有Weible- palade小体,证实为内皮细胞。实验表明,BMSCs在体外分离和定向培养的ECs,经扩增后可能是心血管组织工程所需种子细胞的又一个重要来源。     

两种纺织娘线粒体基因组的比较分析

目前关于螽斯科昆虫的线粒体基因组全序列及其分子进化的研究报道很少。本研究利用L-PCR技术结合嵌套步移PCR扩增获得纺织娘Mecopoda elongata和日本纺织娘M. niponensis的线粒体基因组全序列, 同时对二者之间的碱基组成和结构特点进行了比较分析。结果显示： 纺织娘线粒体基因组（GenBank登录号JQ917910）序列全长15 284 bp, A+T含量71.8%; 日本纺织娘线粒体基因组（GenBank登录号 JQ917909）序列全长15 364 bp, A+T含量72.4%; 2种纺织娘序列长度差异主要是控制区长度不同引起（纺织娘控制区长294 bp, 日本纺织娘控制区长393 bp）。2种纺织娘基因组基因含量、 相对位置及转录方向均与其他已报道的螽斯科昆虫一致, 未发现基因重排现象; 基因组中均存在较长的间隔序列, 在trnA/trnR之间的间隔序列长度分别为63 bp与68 bp, 在trnQ/trnM之间的分别为55 bp和26 bp, 在trnS^UCN/nad1之间的均为21 bp。而最长的基因重叠区域在2种纺织娘trnC/trnW之间均为8 bp, 在atp8/atp6和nad4L/nad4L之间均为7 bp。蛋白质编码基因的碱基组成和密码子使用均具有明显的偏倚性; 除nad1和nad2以特殊的TTG作为起始密码子, cox1使用特殊的起始密码子ATGA外, 其余的10种蛋白质编码基因均使用典型的ATN作为起始密码子。在tRNA基因中, 除trnS^AGN外, 均能折叠形成典型的三叶草形二级结构。在这些tRNA基因中均存在一定数目的以G-U错配为主的碱基错配, 类似现象同样存在于其他已测定的六足动物线粒体基因组中, 表明G-U配对在线粒体基因组中很可能是一种完全正常的碱基配对方式。基因组中控制区的A+T含量略低于线粒体基因组的其他区域, 表明高A+T含量并不是该区域的必要特征。本研究结果为螽斯科系统发生关系重建积累了有价值的数据资料。     

RGD多肽与尿激酶原嵌合分子的构建及性质研究

利用定点突变及DNA重组技术 ,将编码RGD多肽 (GPRGDWRMLG)的双链DNA片段 ,定向插入到相对于编码尿激酶原的Gly118 Leu119的cDNA分子中 ,构建了尿激酶原的嵌合体基因 ,并在甲醇酵母表达系统中进行了分泌表达。经过Zn²⁺ 螯合柱及SP阳离子柱两步层析后 ,目的蛋白质被纯化。经纤维蛋白平板测活 ,嵌合分子的比活为 6 5 0 0 0IU mg。嵌合分子与尿激酶相比 ,对显色底物S2 44 4作用的催化效率偏低 ,但具有较强的抑制血小板聚集的功能 ,抑制常数IC5 0为 2 1μmol L。以上结果表明嵌合分子不但具有较强的溶栓功能 ,而且具有抗栓功能 ,很可能是一种具有发展前景的双功能溶栓 抗栓分子     

中国齿裂菌属研究IV.*

报道我国齿裂菌属的 ５个分类单元,其中多角齿裂菌 Ｃｏｃｃｏｍｙｃｅｓ　ｍｕｔｔａｎｇｕｌａｒｉｓ Ｙ． Ｒ．Ｌｉｎ　＆ Ｚ． Ｚ． Ｌｉ ｓｐ． ｎｏｖ,中国齿裂菌 Ｃ ｓｉｎｅｎｓｉｓ Ｙ． Ｒ Ｌｉｎ　＆ 　Ｚ． Ｚ． Ｌｉ ｓｐ． ｎｏｖ．和山矾齿裂菌 Ｃｓｙｍｐｌｏｃｉ　Ｙ．Ｒ　Ｌｉｎ　＆　ｚ．ｚ．Ｌｉ　ｓｐ．ｎｏｖ．是新种,辐射状齿裂菌Ｃｒａｄｉａｔｕｓ　Ｓｈｅｒｗ为中国新记录。提供了新种的拉丁文简介、汉文描述和形态特征图。模式标本存放在安徽农业大学森林保护教研室（ＡＡＵＦＰ）。