流行性感冒病毒M2蛋白可溶性表达及其免疫原性的研究

流行性感冒（流感）的M2蛋白是其保护性抗原之一,在几科所有甲型流感病毒中高度保守,因此可以用来研究具有交叉保护能力的流感疫苗。然而M2分子在病毒颗粒中含量非常少,用从病毒中纯化的方法很难获得足够的免疫原。在原核表达时发现,M2蛋白对宿主菌具有很强的毒性作用,导至其死亡,因此很难获得高表达。在本研究中,采用RT－PCR方法从病毒感染的MDCK细胞中克隆了A1／PR／8／34毒株的M2基因,然后通过基因工程手段缺失了M2蛋白的跨膜区26－55位氨基酸的编码序列,将其克隆以pET-32a中,与硫氧还蛋白融合,在大肠杆菌中获得了高效表达,并且表达产物以可溶形式存在,不形成包涵体。利用硫酸铵盐析结合金属离子鏊和柱亲和层析的方法纯化了表达的融合蛋白。免疫荧光实验表明,融合蛋白免疫小鼠后产生的抗血清能够与流感病毒感染的细胞发生特异性的结合,证明表达产物具有流感病毒M2蛋白的抗原性。     

蛋白质嵌入脂质体的研究——Ⅱ.猪心线粒体腺三磷酶复合体在脂质体上进行重组的研究

本文报导从猪心线粒体内膜腺三磷酶复合体拆离疏水蛋白(基部、F_0),成功地与偶联因子F1组装在脂质体上。并比较了疏水蛋白嵌入脂质体的三种方法(超声法、胆酸盐稀释法、胆酸盐透析法)的重组效果。(1)摸索了从线粒体、亚线粒体提取活力较高的疏水蛋白(F_0)的最适条件。当F_0嵌入脂质体后,腺三磷酶水解活力增高4～6倍,并表现出对寡霉素敏感的特性,酶活力受寡霉素抑制约50%左右(2)将可溶性腺三磷酶(F_1)与嵌有F_0的脂质体(LF_0)进行重组,~(32)pi-ATP 交换活力、腺三磷酶水解活力以及萤光强度的增加都表明重组获得成功。(3)根据腺三磷酶抑制剂(寡霉素、二环己基碳二亚胺)和解偶联剂(碳酰氰-P-三氟甲氧苯腙)等对重组后上述各项指标的影响,也都表明重组获得成功。(4)对三种嵌入方法(超声、胆酸盐稀释法、胆酸盐透析法)的重组效果进行了比较。实验结果表明,各项指标的表现往往并不一致,重组后~(32)Pi-ATP 交换活力以超声法为最高,胆酸盐透析法交换活力最低。     

生物炭对设施连作黄瓜根域基质酶活性和微生物的调节

以日光温室内连作6年(11茬)营养基质作为对照进行黄瓜盆栽试验,研究添加量为5%和3%(质量比)的生物炭对营养基质中酶活性、微生物数量及群落结构的调节作用.结果表明: 经生物炭处理后,在定植30～120 d,基质的过氧化物酶活性均显著提高至1茬水平,且5%生物炭处理效果显著高于3%生物炭处理,中性磷酸酶活性则显著低于对照; 在定植30～90 d,仅5%生物炭处理对蔗糖酶和脲酶活性有明显的调节作用.经生物炭处理后,基质内细菌和放线菌数量在定植30～90 d均有所增加,真菌数量则均降低,且5%生物炭处理效果显著高于3%生物炭处理.同时,生物炭处理能够显著提高基质内细菌的群落结构多样性.说明生物炭的添加对连作营养基质中的酶活性、微生物数量及群落结构有明显的调节作用.     

草鱼、中华鳖造血器官和血细胞凝集素结合部位的观察

Lectin binding patterns in the hemopoietic organs and blood cells of Grass carp ( Ctenopharyngodon idellus ), Chinese soft shelled turtle ( Trionyx sinensis) were observed with two affinity histochemical methods, ABC staining and fluorescence bound lectin staining. Concanavalin (ConA), Phytohemagglutinin (PHA), Pokeweed agglutinin (PWM) and Lipopolysaccharide (LPS) binding sites were distributed mainly on the plasma membrane of lymphocytes. ConA, PHA binding sites were distributed in thymus, cordic structure of head kidney and scatterly spleenic tissue of C. idellus, also in thymus and periellipsoidal lymphatic sheaths and marginal region of T. sinensis. PWM, LPS binding sites were scatterly distributed in cordic structure of head kidney of C. idellus, spleenic tissue of C. idellus and T. sinensis, but positive cell groups were not obvious. ConA, PHA and PWM positive percents of lymphocytes in blood smears were repectively 36%～41%, 33%～37%, 38%～43% in C. idellus and 37%～48%, 36%～45%, 44%～53% in T. sinensis, but percents of positive cells were repectively 15%～18%, 14%～17%, 9%～12% in imprints of head kidney of C. idellus.     

下田菊挥发油化学成分的研究

利用水蒸汽蒸馏法、两相溶剂萃取法提取下田菊(Adenostemma lavenia(L.)O.Ktze.)地上部分的挥发油,提取10h的挥发油得率为0.990%。采用毛细管气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术结合计算机检索对该挥发油的化学成分进行了分析和鉴定,采用色谱峰面积归一化法计算了各成分的相对含量。从挥发油中共分离出36个峰,鉴定了其中的35种成分,占总量的99.56%,其中α-荜澄茄油烯(32.62%)、石竹烯(24.97%)和γ-榄香烯(5.53%)为主要成分,此外α-石竹烯(3.97%)、α-恰米烯(3.57%)、双环[4,3,0]-7-亚甲基-2,4,4-三甲基-2-乙烯基-壬烷(3.41%)、γ-萜品烯(3.07%)、d-柠檬烯(2.57%)、α-蒎烯(2.49%)及2-蒈烯(2.28%)的含量也较高。     

铜胁迫对丛枝菌根真菌群落功能的影响

过去20年来,对不同来源丛枝菌根真菌(AMF)的功能开展了大量研究,但多数基于对单个AMF功能的比较,群落水平的研究较少,且很多研究混淆了AMF来源和群落结构对其功能的影响,忽略了宿主的重要作用.本研究通过两个短期温室盆栽试验,分析了铜胁迫对AMF群落结构的影响,比较了不同AMF群落的功能差异.结果表明:铜胁迫显著改变了AMF群落的孢子丰度和组成.以根内球囊霉和幼套球囊霉为优势种的AMF群落有效减缓了铜胁迫对玉米生长和部分生理特性的抑制作用.     

白细胞介素-33在慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者黏膜组织中的表达及意义

目的观察慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)患者鼻黏膜组织中白细胞介素-33(IL-33)的表达与嗜酸性粒细胞(Eos)的浸润情况,探讨IL-33与Eos在其发病中作用及相关性。方法采用免疫组织化学LSAB法分别检测CRSwNP患者(观察组)32例和单纯鼻中隔偏曲患者(对照组)24例的鼻黏膜组织中IL-33的表达情况;苏木精-伊红染色下观察炎性细胞浸润程度并对Eos计数;全血细胞分析法测定两组患者血液中嗜酸性粒细胞含量。结果 (1)CRSwNP组织中上皮层及间质内Eos、中心粒细胞为主的炎性细胞及部分腺体内有IL-33的表达;(2)免疫组织化学检测显示IL-33阳性细胞数、苏木精-伊红染色Eos计数均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。Eos计数与IL-33阳性细胞数在CRSwNP中存在正相关性(P0.05);(3)血液中Eos含量无统计学意义。结论 IL-33是一种新型的细胞因子,在CRSwNP患者体内高表达,可能与嗜酸性粒细胞浸润互相促进,在CRSwNP发生发展中具有重要的作用。     

舒芬太尼联合氟比洛芬酯预防全麻苏醒期躁动

目的:探讨术中应用舒芬太尼联合氟比洛芬酯预防全麻苏醒期躁动的效果.方法:选择ASA Ⅰ～Ⅱ级全身麻醉下进行胆囊切除术患者90例,随机分为3组,各30例.Ⅰ组给予舒芬太尼0.1μg·kg-1;Ⅱ组给予舒芬太尼0.15μg·kg-1;Ⅲ组给予氟比洛芬酯1 mg·kg-1,舒芬太尼0.1μg·kg-1.在手术结束前20 min静脉给药,观察比较苏醒期三组患者的躁动发生情况、疼痛评分及不良反应(恶心、呕吐等).结果:Ⅱ组和Ⅲ组患者躁动发生率和疼痛评分均低于Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组间差异无显著性(P>0.05).Ⅲ组不良反应发生率小于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05).结论:术中应用舒芬太尼联合氟比洛芬酯对预防全麻苏醒期躁动具有良好的效果,并能降低不良反应发生率.     

四种斑腿蝗科昆虫染色体带型的比较

应用染色体C带及银染核仁组成区定位分析方法对斑腿蝗科4种昆虫,即小蹦蝗属2种;峨眉小蹦蝗Pedopodisma emeiensis和秦岭小蹦蝗P.tsinlingensis;无翅蝗属2种;小无翅蝗Zubovskiaparvula和柯氏无翅蝗Z.koeppeni进行了研究,结果表明：4种蝗虫染色体数目（2n♂=21,XO)一致,小蹦蝗属M8染色体上具有端带;无翅蝗属X染色体具有特殊带纹,银染核仁组成区定位在两属各有特点,小蹦蝗属位于第8号染色体端部区域;无翅蝗属位于X染色体端部区域,除上述属内共性之外,各物种C带带纹又存在明显差异,其中峨眉小蹦蝗带型极为特殊。文中还对上述4种蝗虫带型结构特征及其进化意义作了讨论。     

紫外辐射增加对植物生长及某些生理代谢的影响

本文就紫外线辐射增加对植物生长发育、生理特性和作物产量等方面的影响进行了论述。