基因工程人胰岛素原和胰岛素的分离纯化及性质研究

E. coli DH 5 alpha cells harboring a plasmid pWR 590-BCA 4 for fused human proinsulin production were cultured. The fused human proinsulin was isolated from the fermented cells and then subjected it to cleavage with BrCN. The cleaved product was then converted to crude proinsulin-S-sulfonate using oxidative sulfitolysis. The isolation of human proinsulin-S-sulfonate was accomplished by ion exchange chromatography on QAE-sephadex A-25, followed by gel filtration on sephadex G-50. The purified human proinsulin-S-sulfonate was folded using a disulfide interchange method. The folding mixture was then chromatographed on sephadex G-50 and purified proinsulin was obtained. The proinsulin was then converted to human insulin and C-peptide by a combination cleavage with trypsin and carboxypeptidase B. The total yield of human insulin was about 5 mg/L The Zinc insulin crystals were obtained with amorphous human insulin using citrate method. The amino acid composition N-terminal sequences as well as C-terminal amino acid residues are in agreement with expected results. The hypoglycemic activity of purified human insulin is 26-27 U/mg, as judged by mouse convulsion assay, and the RIA activity is about 99% of that of porcine insulin.     

主编寄语——纪念《中国细胞生物学学报》创刊四十周年

<正>岁月不居,春秋代序。《中国细胞生物学学报》(原名:细胞生物学杂志)(Chinese Journal of Cell Biology)经历了四十年风雨历程,进入了"不惑之年"。《中国细胞生物学学报》的建设与发展长期以来得到了各级领导、同行专家、广大作者和读者的关怀、支持与厚爱,己亥年伊始,万象更新,在此谨向各位致以亲切的问候与诚挚的感谢!《中国细胞生物学学报》创刊于1979年,由中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所和中国细胞生物学学会共同主办,是国内外公开发行的专业性学术期刊。经新闻出版总署批     

基因组工程研究

一、基因组工程的诞生 1.基因研究与基因工程的发展 随着生命科学和生物技术的发展,对基因的释义也在不断地发展和深化。最初将基因与遗传学性状相挂钩,提出所谓一个基因一个性状的概念,以后发展到一个基因一个酶、一个基因一个多肽、一个基因一个转录本等,今天看来这些概念都不能涵盖基因所有的内涵,因为基因还应该包括与转录相关的所有遗传结构信息。在结构上可以连续,也可不连     

AFP基因细胞专一性的表达依赖于某些核蛋白

Southern blotting分析没有发现成年大鼠肝、胚肝及肝癌细胞AFP基因5′端及上游有任何不同。以AFP基因转录起始点到5′端上游255 bp DNA片段为探针进行Southwestern blotting分析,发现表达AFP基因的细胞核蛋白中存在与其结合的核蛋白,这些在成年大鼠肝、肺、脾、心和肾细胞核蛋白中不存在。含有结合蛋白的肝癌核蛋白部分能使作为RNA聚合酶Ⅱ来源的成年大鼠肝细胞核蛋白部分具备较高的体外转录活性,表明基因细胞专一的表达确与某些结合蛋白有关。     

诱导多能干细胞（iPSCs）：过去、现在和未来

诱导多能干细胞技术诞生至今已有6年多历史了，许多人认为这是生命科学和再生医学研究领域的一场革命，也是细胞生物学发展的里程碑，很多人预言这项技术迟早会获得诺贝尔生理医学奖。但是，对这项技术诞生的历史背景、发展历程、研究现状以及未来前景，能够真正了解的并不多。为此，我们将此项技术发明人日本京都大学iPS细胞研究和应用中心山中伸弥（ShinyaYamanaka）最近发表的评述（YamanakaS．Inducedpluripotentstemcells：Past，present，andfuture．CellStemCell2012；10（6）：678—84）翻译成中文以飨读者。     

Na~ /Cl~-神经递质转运蛋白

神经信号传导的终止依赖于特异性神经递质转运蛋白对神经递质的重摄取作用,而大部分的神经递质转运蛋白都属于Na~ /Cl~-转运蛋白家族。本文综述了Na~ /Cl~-转运蛋白家族的五个亚类以及Na~ /Cl~-转运蛋白的结构和生理学功能方面的研究进展。     

美国《Science》杂志评出2011年十大科学突破——介绍光合系统Ⅱ的结构研究成果

上一期"热点评析"栏目(中国细胞生物学学报2012;34(2):195-6)中介绍了"阻断艾滋病传播的突破性研究成果",本期着重介绍2011年在光合作用研究领域对光合系统II(photosystem Ⅱ,PSII)研究的重大进展。这一研究成果通过下面对光合作用中需要光的反应(简称"光反应")机制介绍可以得到深入了