异种器官移植中的Galα（1,3）Gal抗原表位的研究进展

改造猪的器官移植给人类被认为是解决人类移植器官供不应求的可能方案,但由于猪和人在免疫学上的差异使移植到人体的猪的带血管器官很快被排斥掉,本文综述了近十年来对猪-人之间最重要的差异性抗原表位的研究进展.     

利用SPR原理研究mGAT-1基因5’区域和组织核蛋白的相互作用

用PCR方法扩增到小鼠GAT-1基因5’近侧序列-1775—-1594片段(F182DNA),通过生物素偶联到感应片(SA5)上,利用生物传感器,研究了小鼠肾、肝组织核蛋白提取液和F182DNA的相互作用,实验表明不同浓度的小鼠肾、肝核蛋白与F182DNA片段结合明显,并且它们的表观解离速率常数都是k_d=1.4E-5/秒。实验还发现,在F182序列中一人鼠保守的序列是一个蛋白主要的结合位点,证明这一保守序列在mGAT-1基因调控中可能起重要的作用。     

酒精对γ-氨基丁酸转运蛋白Ⅰ(GAT1)功能调节方式的初步研究

已有报道GABA能系统参与酒精耐受和成瘾。我们实验室先前的研究表明急性和慢性酒精处理能快速增强小鼠中枢神经系统γ-氨基丁酸转运蛋白(GATs)的功能,但不影响中枢神经系统GAT1的基因表达水平;GABA 转运蛋白对底物的亲和性也未发生变化在本文中,我们用免疫荧光实验发现酒精处理后,GAT1蛋白向突触体质膜一侧聚集。蛋白磷酸化检测实验显示突触体内GAT1蛋白上丝氨酸、苏氨酸及酪氨酸的磷酸化水平降低。这些结果提示酒精通过刺激GAT1蛋白从胞内转位到突触质膜上而提高GABA 重摄取的功能,GAT1蛋白去磷酸化可能在此过程中发挥了重要作用。     

用于DNA无性繁殖的EcoRI接头的化学合成

利用二酯法化学合成了一个脱氧八核苷酸(d-G-G-A-A-T-T-C-C)。此八核苷酸片段自身互补形成双链DNA片段,能被限制性内切酶EcoRI酶解。利用双向同系层析测定了它的核苷酸序列,证明这一片段的序列符合实验设计要求。     

麦胚无细胞蛋白合成体系的改进

麦胚无细胞蛋白合成体系的特点是内源信息含量低,对外源RNA 反应灵敏,故在检测外源mRNA 和tRNA 的功能和蛋白质合成机制的研究中起着重要的作用。按Marcus 等的方法,制备无tRNA 的麦胚无细胞蛋白合成体系S_(100-)     

主编寄语——纪念《中国细胞生物学学报》创刊四十周年

<正>岁月不居,春秋代序。《中国细胞生物学学报》(原名:细胞生物学杂志)(Chinese Journal of Cell Biology)经历了四十年风雨历程,进入了"不惑之年"。《中国细胞生物学学报》的建设与发展长期     

人胰岛素A,B链基因的合成,克隆及其在大肠杆菌中的表达

Human insulin A and B chain genes were designed and synthesized by using a rapid and simple method. The synthesized A and B chain genes were cloned separately. The expression (plasmids) pWR 590-HIA and pWR 590-HIB were constructed, and the two plasmids can direct the synthesis of the approximately 590 amino acid-long truncated beta-galactosidases fused to human insulin A or B chains. The fused A or B chain proteins were isolated from the fermented cells and cleaved with BrCN. The resulting mixtures were sulfonated and the sulfonated A and B chains were purified. Human insulin was obtained by using an A and B chain combination method.     

对tRNA和mRNA双依赖的兔网织红细胞无细胞蛋白合成体系的制备

本文在Gilbert和Anderson及Pel-ham和Jackson方法的基础上加以改进,制备了一个对tRNA和二RNA双依赖的兔网织红细胞无细胞蛋白合成体系。在有TMV RNA存在的情况下,加入兔网织红细胞总tRNA,氨基酸参入比不加tRNA的对照高40倍以上。在有兔网织红细胞总七RNA存在的情况下,加入TMVNA或Poly(rU),氨基酸参入分别比不加外源mRNA的对照高10倍和7倍以上。这个双依赖的无细胞蛋白合成体系是检测单一tRNA和mRNA生物活性的有用工具。     

人生长素基因的合成及克隆

根据人生长素基因的氨基酸序列,选择大肠杆菌所偏好的密码子,人工设计并合成了20个寡核苷酸片断。通过重叠区扩增法,利用PCR成功地合成了人生长激素基因的全序列。经克隆测序,证明已成功地实现了人生长素基因的合成及克隆。