西藏嵩草ISSR-PCR反应体系优化研究

西藏嵩草( Kobresia tibetica )为莎草科嵩草属多年生草本,根状茎短,秆密集丛生。生于海拔2550~4950 m的河滩地、湿润草地、高山灌丛草甸,分布于甘肃、青海、四川西部、西藏东部,其根系发达,喜湿,耐寒,生活力强。西藏嵩草繁殖以营养繁殖为主、有性繁殖为辅,其茎叶茂盛,有较高的营养价值,产草量高,是青藏高原夏、秋两季的主要放牧饲草。该研究以青藏高原高寒沼泽化草甸的建群种和优势种———西藏嵩草为材料,对影响其ISSR-PCR反应的因素( Mg2＋、Taq DNA聚合酶、dNTP、引物和模板DNA)进行5因素4水平的正交试验,以确定西藏嵩草ISSR分析的最佳反应体系,并筛选适宜的ISSR引物及各引物的最佳退火温度。结果表明：建立了适宜于西藏嵩草ISSR-PCR反应的最佳体系为20μL反应液中包括10× PCR buffer 2μL、1.5 mmol?L-1 Mg2＋、1.0 U Taq DNA聚合酶、0.100 mmol?L-1 dNTP、0.3μmol?L-1引物和30~40 ng DNA模板;同时从100条ISSR引物中筛选出了扩增结果清晰、稳定的12条引物,各引物的最佳退火温度为48.0~53.2℃(引物不同,其最佳退火温度也不同);西藏嵩草ISSR-PCR适宜的扩增程序为首先预变性94℃5 min,然后变性94℃20 s、复性48.0~53.2℃1 min、延伸72℃80 s、38个循环,最后72℃延伸6 min。体系稳定性验证结果表明,该体系在西藏嵩草其他样品中所得条带清晰且多态性丰富,为后续西藏嵩草的遗传多样性分析和优良牧草种质资源筛选研究奠定了基础。该研究结果对以西藏嵩草为优势种的高寒沼泽化草甸研究及湿地生态系统的修复和保护具有重要意义。     

带教新护士的工作心得

随着21世纪的到来,医疗事业的飞速发展及护理模式的转变,给护士提出了更高的要求.每年的护理队伍都会补充新生力量,她们能否健康成长将直接关系到护理事业的发展前途和命运.如何将新护士培养成独当一面的优秀护士,使之成为护理队伍的主要力量则是关键.现将我们在疗养工作中的带教心得叙述如下.     

连翘试管植株的诱导

植物名称:连翘(Forsythia Suspensa)。材料类别:子叶、苗端、下胚轴。取成熟的连翘种子,进行常规消毒后,接种于不加激素的MS培养基上。当苗高1.5—2cm时,在无菌条件下切取子叶、苗端、下胚轴分别接种。培养条件:以MS培养基为基本培养基,添加不同的激素,组成不同激素水平的培养基进行试验。在室温(17—23℃)黑暗条件下诱导愈伤组织,在26℃左右,每日光照10—12小时(光强为2000     

IGF-I和GH在缺氧缺血性脑病新生儿血清中的表达及其临床意义

目的：探究新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）血清胰岛素生长因子1（IGF-I）和生长激素（GH）水平与患儿病情程度之间的关系。 方法：选取2005 年6 月~2014 年10 月期间我院产科出生的HIE 患儿49 例为研究对象（研究组）,选取同期健康新生儿50 例作 为对照组,分别于出生后72 小时内和26~28 天测量IGF-I和GH水平,HIE 组患儿在急性期和恢复期做神经行为测定(NBNA), 分析各个指标之间的关系。结果：新生儿血清IGF-I水平在72 h内和26-28 d四组间比较,其中重度组低于其他三组,中度组低于 轻度和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);新生儿血清GH 水平在72 h内和26~28 d四组间比较,差异无统计学意义（P>0.5）; 新生儿血清IGF-I与GH不存在显著相关性（r=0.193,P>0.05）;HIE 组患儿IGF-I 水平与NBNA分值在急性期和恢复期均存在显 著正相关(r=0.315,P<0.05;r=0.249,P<0.05),而GH 与NBNA 分值在急性期和恢复期均不存在显著的相关性（r=0.210,P>0.05）。 结论：新生儿IGF-I水平不仅可以预测HIE 患儿的病情,且可以影响新生儿HIE的预后情况。     

枸杞胚乳植株的诱导和它的倍性水平

开花后20天左右的枸杞胚乳,在附加2,4-D(0.2—2ppm)的MS培养基上长出愈伤组织。将胚乳愈伤组织转移到含有BA 0.2ppm的MS培养基上分化出苗,其中发现少数畸形苗。小苗转入不加激素的MS培养基促进了生根。胚乳愈伤组织及植株根尖细胞染色体数目很不一致,并观察到了极有丝分裂现象,获得了移栽成活的不同倍性的20棵胚乳植株。其中5棵胚乳植株三倍体水平细胞占50％以上。     

文冠果可孕花与不孕花发育过程的比较研究简

利用半薄切片和透射电镜技术对文冠果可孕花和不孕花的发育过程进行观察和比较。结果显示：(1)小孢子发育初期,两种类型花花药形态无明显差别;小孢子发育双核期,可孕花花药内壁纤维层细胞壁带状加厚,无唇细胞形成。而不孕花花药同侧两个花粉囊之间唇细胞正在分化;小孢子发育成熟期,不孕花花药唇细胞完全形成;散粉期,不孕花花药开裂呈双心形,而可孕花花药则不能开裂散粉。(2)可孕花雌蕊子房内有两室,柱头细胞排列紧密,柱头逐渐发育成圆球形,周围密布乳突细胞,具中空花柱道;不孕花雌蕊柱头停止发育,无中空花柱道,子房室变小,胚囊发育退化。(3)不孕花花药绒毡层中含大量蛋白体,小泡以及乌氏体等细胞器,发育后期绒毡层解体。而可孕花花药绒毡层中细胞器和营养物质积累均较少,发育后期绒毡层解体不完全。(4)可孕花花药内花粉粒细胞壁连续无萌发孔,细胞内含物较少。不孕花花药内花粉出现3个向内凹陷的萌发孔,且花粉内含有大量造粉质体和脂类物质。     

清香木的组织培养与快速繁殖

1植物名称清香木(Pistacia weinmannifolia Poiss.ex Franch.)。2材料类别带芽茎段。3培养条件(1)诱导丛芽培养基:MS 6.BA 1 mg·L~(-1)(单位下同) NAA 0.1:(2)不定芽增殖培养基:MS 6-BA2 NAA 0.5;(3)生根培养基:1/2MS     

藏红花瓣状体的诱导与花柱-柱头状物的定向分化

藏红花(Crocus sativus L.)又名番红花、西红花;藏药中称为苟日苟木.它是鸢尾科草本植物,原产于欧洲、地中海地区.我国长期以来把它作为珍贵的中藏药.其药用部位是柱头,有效成分主要是藏红花素、藏红花酸、藏红花醛和藏红花苦素.丁葆祖等于1979年首次从藏红花的球茎获得完整的植株[1].Sano等人1987年在离体条件下,诱导花柱-柱头状物再生获得成功[2],此后国内外不断有相关报道[3～7].但试验大多集中在由外植体直接或由愈伤组织间接诱导柱头状物,且花柱-柱头状物的频率低和数量少.我们试图先由藏红花花瓣诱导瓣状体,再定向分化花柱-柱头状物,来提高花柱-柱头状物的诱导频率和数量.从而为以后的大规模生产奠定基础.     

老年患者全身麻醉气管插管后致下呼吸道感染的相关因素分析及对策

目的:探讨老年患者全身麻醉气管插管后致下呼吸道感染麻醉相关影响因素,并采取相对应的处理措施,以期提高临床治疗水平。方法:回顾性分析2010年1月-2013年1月103例老年全身麻醉气管插管患者,对其中出现下呼吸道感染的13例患者进行回顾性麻醉影响因素分析。结果:老年患者全身麻醉气管插管后下呼吸道感染麻醉相关影响因素有插管过深、插管不熟练、拔管指征不完全、拔管延迟(3 h)、麻醉时间长(3 h)等(P0.05)。而与患者插管途径、插管方式、拔管延迟(3 h)无关(P0.05)。结论:老年患者全身麻醉气管插管后致下呼吸道感染麻醉相关影响因素较大,临床上要加以规范。     

Rho GTPases及其在口腔领域的新应用

Rho GTPases是重要的信号转导分子,参与多种重要的细胞生命活动,如肌动蛋白细胞骨架的重构、细胞黏附、细胞运动、囊泡运输、基因表达和细胞周期的调控等.调节这些生物信号的转导通路非常复杂,因此,Rho GTPases早已成为研究的热点.最新的研究进展集中在描述Rho GTPases具体在细胞的哪个部位发生反应与参与通路的具体的分子及新功能等,同时细胞分子实验已经证实Rho GTPases在肌动蛋白细胞骨架的组装、细胞粘附、细胞运动、和基因表达等方面的作用与临床上多种口腔疾病,如正畸,牙周疾病的发生有密切关系.因此,对Rho GTPases的研究可能为口腔领域正畸,牙周病的治疗提供新的思路.