曲霉菌的RAPD分析及其在酿造工业中的应用

以米曲霉沪酿3.042(AS3.951)、黄曲霉GIM3.18、酱油曲霉AS3.495为参照,利用RAPD分子标记技术对16株曲霉菌进行系统发育分析。通过改进提取方法,获得了质量较好的模板DNA,凝胶电泳结果和分光光度法检测结果表明其适合用于进一步的RAPD-PCR试验。从9个待选引物中筛选到3个扩增产物谱带多、特征好、覆盖面广的引物:Primer1、Primer2、Primer5,重复实验证明其RAPD-PCR扩增图谱具有较好的稳定性,扩增产物谱带一般8~14条,各试验菌株主带4~9条,次带丰富。由此构建的系统进化树较好地吻合了传统的形态分类学,证实了RAPD分子标记技术在此类微生物系统发育分析中应用的可行性,也为酿造工业中检出产黄曲霉毒素的污染菌株提供了理论基础。     

拟南芥植物硫肽激素基因在玫瑰茄细胞中的表达

利用玫瑰茄愈伤组织遗传转化体系,通过根癌农杆菌将AtPSK2基因导入玫瑰茄细胞,并获得了功能性表达。研究结果表明,所获得的转基因玫瑰茄细胞系的临界植板细胞密度和临界起始细胞密度分别降低了60%和50%,悬浮细胞培养周期由16d缩短到12d,转化愈伤组织的比生长速率比对照提高了75%,转基因玫瑰茄细胞和愈伤组织中的花黄素含量与对照相比没有发生明显变化。本研究所获得的转基因玫瑰茄细胞系不仅为花青苷和花黄素等次生代谢产物高产细胞株的选育提供出发材料,而且为PSK-α作用机理的深入研究提供一个有用的模型。     

根癌农杆菌介导的玫瑰茄愈伤组织的遗传转化

以根癌农杆菌LBA4404和EHA105为供体菌株,对玫瑰茄愈伤组织进行了转化条件的研究,建立了一套玫瑰茄愈伤组织遗传转化体系。利用该转化体系获得了2个稳定表达新霉素磷酸转移酶活性的玫瑰茄转化细胞系。GUS活性组织化学检测和PCR扩增鉴定的结果表明,愈伤组织的转化率为4%。说明采用农杆菌介导法将外源基因经愈伤组织导入玫瑰茄细胞是可行的。     

褐色种皮大豆与其黄色种皮衍生亲本的表型及基因型比较

大豆种皮色在从野生大豆到栽培大豆的选择过程中逐渐由黑色变成黄色,是重要的形态标记,因此,大豆种皮色相关基因的研究无论是对进化理论研究还是育种实践都具有非常重要的意义。利用褐色种皮J1265-2大豆及其衍生亲本黄色种皮大豆J1265-1为材料,通过SSR引物扩增片段,检验遗传背景的异同,同时对控制种皮的候选基因GmF3’H进行扩增和测序分析。结果表明,褐色种皮和黄色种皮材料不仅用161对SSR分子标记检测没有发现差异,其褐色种皮候选基因GmF3’H的编码区及起始密码子上游1465 bp序列也是一致的。因此,证明褐色种皮J1265-2大豆与其衍生亲本黄色种皮大豆J1265-1为近等基因系,其控制褐色种皮的基因型与已报道的基因型不同。     

番木瓜细胞悬浮培养中细胞生长及过氧化氢酶的研究

按常规植物细胞培养技术获得的20天种龄的番木瓜(Carica papaya)愈伤组织,悬浮于分别含有0.3％酵母膏的MS_3-CM及B_5培养基中,于25℃、100 r╱min 进行振荡培养,测定细胞生长(根据细胞湿重)和过氧化氢酶活性的结果表明:1.在MS_3-CM培养基中,经过144小时的培养,番木瓜细胞达到最大生长量,然后逐步降低。细胞达最大量后,pH值逐步上升,过氧化氢酶开始大量产生(图1A)。2.在B_5培养基中,细胞生长迅速,84小时达到最大生长量,过氧化氢酶的产生与在MS_(?)—CM培养基中一样,同属于滞后型(图1B)。从两种培养的效     

原位负染色法鉴定过氧化氢酶

原位负染色法鉴定过氧化氢酶曾庆平，郭勇（华南理工大学生物工程系，广州５１０６４１）关键词过氧化氢酶，色谱过氧化氢可使橙黄色的高铁还原为普蓝色的亚铁，而过氧化氢在过氧化氢酶作用下分解成水和氧后，便失去还原能力。因此，将过氧化氢酶原位固定于滤纸等支持介质...